1.3 Лабораторное занятие
Задание 1. Изучить общее проявление анафилаксии - анафилактический шок.
Опыт проводят на заранее сенсибилизированных морских свинок. Для этого подбирают особей с массой тела не менее 300-350 г. За 2 нед. до занятия животным вводят под кожу лошадиную сыворотку крови в объеме 0,01-0,1 мл. Одной морской свинке за 0,5ч до введения разрешающей дозы лошадиной сыворотки в кровь инъецируют этот антиген под кожу в объеме 0,01-0,02 мл. Затем одной и другой (сенсибилизированной и десенсибилизированной) морским свинкам вводят лошадиную сыворотку в полость сердца. Для этого животное фиксируют руками в спинном положении на столе, покрытом клеенкой. Указательным пальцем левой руки фиксируют левую переднюю лапку, а большим пальцем правую переднюю таким образом, чтобы мордочка свинки находилась под впадиной ладонной поверхности. Правой рукой фиксируют тазовые конечности. В области грудины и слева от нее выстригают шерсть, кожу протирают спиртом. В шприц с иглой набирают сыворотку крови лошади. Иглу резким движением вкалывают слева от грудины в области сердечного толчка. Игла должна быть косо направлена в сторону правой лопатки. Глубина вкола около 15 мм. При появлении в шприце струйки крови вводят лошадиную сыворотку в объеме 0,5 мл и извлекают иглу. Морскую свинку немедленно освобождают от фиксации и наблюдают за ее поведением и развитием картины анафилактического шока. Опыт хронометрируют по минутам. Если животное погибнет, его вскрывают и обращают внимание на положение легких в грудной клетке.
В протоколе отмечают даты сенсибилизации и введения разрешающей дозы, а также объем использованной лошадиной сыворотки. Затем в хронологическом порядке описы-вают клиническую картину анафилактического шока у каждой свинки. В случае гибели свинки отмечают относительное положение сердца и легких. Делают выводы. Объясняют механизм развития анафилактического шока и проявления десенсибилизации.
Задание 2. Анафилактическая реакция сосудов брыжейки лягушки (опыт Фрелиха).
Лягушку подготавливают за 15 дней (сенсибилизируют): под кожу вводят 1 мл сыворотки крови свиньи. Лягушку фиксируют в брюшком положении. Справа разрезают брюшную стенку, извлекают петлю кишечника и расправляют брыжейку над отверстием в пластинке. Под малым увеличением микроскопа отыскивают участок с хорошо развитой сосудистой сетью. Получив исходные данные о состоянии кровообращения (скорость кровотока, число функционирующих капилляров, диаметр артериол), на брыжейку наносят каплю свиной сыворотки. За состоянием кровообращения наблюдают в течение нескольких минут. Сначала опыт ставят на интактивной лягушке, а затем на сенсибилизированной.
В протоколе описывают исходное состояние кровообращения в брыжейке, а затем изменения его динамики после нанесения свиной сыворотки. Обращают внимание на различие реакции сосудов интактной и сенсибилизированной лягушек. Делают выводы. Объясняют механизм аллергической реакции сосудов.
Вопросы для самоконтроля:
1.Виды аллергии. Аллергены.
2. Патогенез аллергических реакций немедленного типа.
3.Три стадии в развитии аллергических реакций.
4.Местные проявления аллергических реакций.
5.Специфическая десенсибилизация и неспецифическая.
6.Анафилактический шок и его особенности у разных видов животных.