Лабораторное занятие
Цель занятия: Изучить сущность воспаления, его признаки, причины и последствия воспалительного процесса.
Задание 1. Вызвать воспалительный процесс у собаки.
Методика: Проводят общее клиническое обследование животного с определением температуры тела, частоты пульса и дыхания. Проводят гематологические исследования: подсчет количества форменных элементов (эритроциты, лейкоциты), содержание гемоглобина.
У собаки в области грудной клетки выстригают шерсть приблизительно на площади 25-30 см2. В этом месте подкожно вводят 1-2 мл скипидара. Внешние признаки воспаления обнаруживаются через 2 суток.
Задание 2. Изучить внешние признаки воспаления. Приготовить мазки-отпечатки раневой поверхности.
Методика: Внешне воспаление характеризуется следующими кардинальными симптомами: покраснение, припухание, жар, боль, расстройство функции.
Одновременно констатируют влияние воспаления на организм в целом: убеждаются в изменении клинических и гематологических показателей.
Через 3-4 дня после инъекции скипидара воспалитель-ный процесс размягчается, образуется абсцесс, при вскрытии которого вытекает значительное количество гнойного экс-судата.
С поверхности раны, после вскрытия абсцесса, удаляют экссудат стерильным тампоном, смоченным Физиологическим раствором. Затем прикосновением к поверхности раны стерильного тампона или непосредственно предметным стеклом, наносят на него отпечаток. При этом следует избегать грубого надавливания или скользящих движений, чтобы не деформировать клетки. С одного участка берут отпечатков. Отпечатки следует брать с разных участков раны и со дна. Полученные отпе-чатки высушивают на воздухе, Фиксируют к спирте (5 мин) или спирт-эфире (15 мин) и окрашивают мазки по Романовскому-Гимза. Просматривают мазки под микроскопом.
Задание 3. Просмотреть мазки-отпечатки раневой по-верхности.
Методика: В мазках - отпечатках раневой поверхности обнаруживаются: микробы, фибрин, гнойный детрит и две группы клеток. Первая группа клеток раневого экссудата.
НЕИТРОФИЛЫ - содержатся постоянно в раневом экссудате (сходны с нейтрофилами крови). Они активно фагоцитируют и переваривают микробы в своей протоплазме. Наличие фагоцитоза указывает на высокую активность защитных иммунно - биологических сил организма, поэтому нейтрофилы раневых отпечатков в мазках будут набухшими. В протоплазме нередко появляются вакуоли, в ядрах обнаруживаем гиперхроматоз, кариопикноз, кариорексиз.
ЭОЗИНОФИЛЫ - встречаются в сравнительно небольшом количестве, отличаются полиморфизмом. Их бывает много при обострении раневого процесса.
ЛИМФОЦИТЫ - встречаются в отпечатках в меньшем количестве, нежели в крови, и не отличаются от лимфоцитов последней. Они не фагоцитируют микробов, но участвуют в регенеретивном процессе, принимая форму полибласта. В первой фазе раневого процесса их бывает несколько больше, чем во второй Фазе, но в мазках они появляются на 3-4 сутки.
МОНОЦИТЫ - не имеют отличия от моноцитов крови. Они фагоцитируют микробов, распавшихся клеток и эритроцитов. Вторая группа клеток - пролиферата.
ПОЛИБЛАСТЫ - это одноядерные клетки округлой или овальной формы. Ядро располагается эксцентрично или по периметру клетки, а иногда в специальном выпячивании протоплазмы. Протоплазма голубоватого или дымчато-голубоватого цвета. Она содержит различные включения и вакуоли, так как полибласты проявляют высокую Фагоцитарную активность, становятся типичными макрофагами, принимают веретенообразную Форму. Массовое появление фагоцитирующих полибластов в раневом очаге указывает на хорошую сопротивляемость организма. Полибласты участвуют в выработке местного тканевого иммунитета.
ОТРОСЧАТЫЕ ПОЛИБЛАСТЫ - или профибробласты. Полибласты в процессе регенерации, вытягиваясь в длину, принимают веретенообразную Форму, превращаясь в профибробласты. Массовое появление этих клеток говорит об активной регенерации и рубцевании. Профибробласты реже встречаются у собак и овец.
ГИГАНТСКИЕ МНОГОЯДЕРНЫЕ КЛЕТКИ - эти клетки имеют базофильную протоплазму и отличаются от других клеток по своей величине и количеству ядер. Роль их в раневом процессе недостаточно ясна: полагают, что они появляются в ранах после применения сильных антисептиков.
ПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ КЛЕТКИ УННА - встречаются редко, они небольших размеров, хорошо контурированы и имеют базофильную синюю протоплазму. Они появляются в медленно заживающих ранах.
Оформление протокола опыта: Фиксируют полученные результаты исследований, анализируют, объясняют патогенетическое значение. Делают выводы.
Вопросы для самоконтроля
1. Понятие о воспалении. Биологическая сущность воспалительной реакции. Признаки воспаления?
2. Альтерация, экссудация и пролиферация, их характеристика?
3. Сосудистая реакция при воспалении?
4. Механизм экссудации и эмиграции лейкоцитов при воспалении?
5. Обмен веществ и физико-химические изменения в тканях при воспалении?
6. Учение И.И. Мечникова о фагоцитозе. Стадии фагоцитоза?