ЯГТУ / Профессиональная подготовка специалистов для производства иммунобиологических лекарственных препаратов (вакцин). Направление «Biotechnical» / Презентация лекции 2 Промышленное культивирование клеточных культур
.pdf
ПРОДУКТ |
11 |
Преимущества:
аденовирусные векторы хорошо изучены
можно выращивать в стабильные запасы с высоким титром
инфицируют неделящиеся и делящиеся клетки разных типов
сохраняются в клетках как эписомы
безопасны и хорошо переносятся
АДЕНОВИРУСЫ
ПРОДУКТ |
12 |
Аденовирусные векторы
Репликационнодефектные (RD)
Репликационнокомпетентные (RC)
Хэлпер- |
|
|
|
Хэлпер-зависимые |
|
независимые |
|
|
|
|
|
|
|
|
ХЭЛПЕР-НЕЗАВИСИМЫЕ ВЕКТОРЫ |
13 |
Важные гены E1A и E1B, удаленны и замененны последовательностью кодирующей требуемые белки
William S.M. Wold, Karoly Toth 2013
ХЭЛПЕР-ЗАВИСИМЫЕ ВЕКТОРЫ |
14 |
Большая часть генома удалена, но сохранены точки начала репликации ДНК на каждом конце генома, а также ~ 500 пар оснований на левом конце геном, необходимый для упаковки генома в вирионы
Конструируются и размножаются в присутствии репликационнокомпетентного помощника, обеспечивающего необходимые ранние и поздние белки, необходимые для репликации
William S.M. Wold, Karoly Toth 2013
БИООБЪЕКТ ПРОДУЦЕНТ |
15 |
КЛЕТОЧНЫЕ ЛИНИИ |
16 |
•клеточная линия, полученная из эмбриональных почек человека
(HEK 293)
•клетки, полученные из эмбриона сетчатки человека (PER.C6 )
•клетки, основаны на амниоцитах человека, стабильно трансформированных E1A и E1B
Ad5.(N52.E6)
СТЕРИЛИЗАЦИЯ H20
компон
.
Приготовление и |
Выращивание |
|
||
посевного материала |
||||
стерилизация |
||||
t, pH, аэрация, T |
|
|||
пит. среды |
|
|||
|
|
|
||
|
стер. |
пос. |
стер. |
|
|
пено |
мат. |
возд. |
|
|
гас |
|
|
|
стер.
пит.ср. ФЕРМЕНТАЦИЯ
PH, t, аэрация, перемешивание, Tферм
натив. р-р
Выделение и очистка
биомасса
мицелий
17
чист
.культ
культ. жидкость
Фильтрация
Сепарация
|
Приготовление |
лек. |
|
субстанция |
товарных форм |
||
препарат |
|||
|
|
УСЛОВИЯ МАКСИМАЛЬНОГО СИНТЕЗА БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ПРОДУКТА: 18
Приготовление качественной и стерильной питательной среды
Приготовление активного посевного материала
Проведение процесса в специальных биореакторах – ферментаторах
Поддержание стерильности ( соблюдение асептичных условий) – отсутствие посторонних микроорганизмов в процессе ферментации
Поддержание оптимальной t°
Поддержание оптимального PH
Обеспечение культуры продуцента необходимым газообменом (кислород, углекислый газ, если необходимо)
СТЕРИЛИЗАЦИЯ |
19 |
Физическая
стерилизация
-стерилизация
ультрафиолетовым излучением;
-стерилизация
ионизирующим излучением;
-стерилизация высокими температурами:
1)сухим горячим воздухом;
2)водяным паром под давлением.
Химическая
стерилизация
1)Газами: пары окиси этилена, формальдегида или специализированными многокомпонентными системами.
2)Растворами: химической стерилизации растворами применяются основных четыре группы веществ:
•Кислота+окислитель (например, «Первомур»)
•Альдегид (например, формалин)
•Детергент (например, хлоргексидина биглюконат)
•Галоид (например, Повидон-йод)
Стерилизующая
фильтрация
Органические жидкости, не выносящие нагревания, освобождаются от бактерий при пропускании через стерильные мелкопористые бактериальные фильтры с диаметром пор 0,45 мкм или 0,22мкм.
СТЕРИЛИЗАЦИЯ |
20 |
Sartorius.com