Лимфоцитопоэз.
Все лимфоциты имеют единого предшественника – стволовую кроветворную клетку и проходят начальные этапы дифференцировки в костном мозге.
Т-клеточная популяция лимфоцитов является наиболее многочисленной и нуждается в особых условиях развития, которые она находит, мигрируя из костного мозга в тимус. В костном мозге формируются ранние предшественники Т-лимфоцитов, которые затем заселяют тимус и далее периферические лимфоидные органы. Зрелые Т-клетки покидают тимус и, поступив в кровоток, становятся частью единого пула рециркулирующих Т-лимфоцитов. При контакте с антигеном Т-клетки вовлекаются в процессы активации и иммунного ответа. Большая часть их относится к долгоживущим клеткам, время их обновления составляют годы.
Дифференцировка В-лимфоцитов осуществляется в костном мозге.
Зрелые В-лимфоциты покидают костный мозг, попадают в циркуляцию и заносятся в периферические лимфоидные органы, где при встрече с антигеном проходят этап антигензависимой дифференцировки. В этих органах они выполняют свои функции. Продолжительность жизни в отсутствии антигенной стимуляции составляет несколько месяцев. Основной функцией В-лимфоцитов является реализация гуморального иммунного ответа.
В результате иммунного ответа образуются Т- и В-клетки памяти,
которые обеспечивают ускоренное развитие реакции на повторное попадание в организм тех же антигенов – вторичный иммунный ответ.
Клетки памяти представляют собой малые лимфоциты, обладающие двумя важными признаками: способностью к рециркуляции и большой продолжительностью жизни, которая обусловливает длительное сохранение
21
иммунитета к возбудителям инфекционных заболеваний и другим чужеродным агентам.
Естественные киллеры – фракция лимфоцитов, лишенных маркеров Т-
и В-клеток. Содержание их наиболее значительно в печени и селезенке. В
периферической крови на долю NK-клеток приходится от 5 до 25%
лимфоцитов.
Основная функция – контактный цитолиз клетки-мишени
(инфицированные вирусом, опухолевые и быстропролиферирующие клетки)
с выбросом сигнальных молекул, включающих в них апоптоз.
Морфологически это большие гранулярные лимфоциты (12-15 мкм),
имеют азурофильные гранулы в цитоплазме. В гранулах содержатся:
перфорин – белок, обусловливающий формирование пор в клетке-мишени,
гранзимы – ферменты, вызывающие индукцию апоптоза при проникновении в клетки-мишени, хондроитинсульфат А, защищающий NK-клетки от аутолиза.
Плазматические клетки, также называемые плазматическими В-
клетками или эффекторными В-клетками, представляют собой лейкоциты,
которые образуются в лимфоидных органах в виде В-лимфоцитов и выделяют большое количество антител, в ответ на присутствие специфических антигенов. Ядро округлой или овальной формы, имеет грубую колесовидную исчерченность и расположено эксцентрично.
Цитоплазма окрашена в интенсивно синий цвет (иногда фиолетовый) с ясно выраженной перинуклеарной зоной просветления, обусловленного комплексом Гольджи.
Лимфоцитарные плазматические клетки локализуются в периферических органах иммунной системы: в селезёнке, в лимфоузлах,
червеобразном отростке слепой кишки, миндалинах лимфатического кольца Вальдейера-Пирогова, в слизистых оболочках полых органов. Большинство зрелых плазматических клеток не рециркулирует в крови, но иногда могут
22
присутствовать в периферической крови в небольших количествах при инфекционных процессах. Плазматические клетки представлены на рисунке
19.
Рис. 19. Плазматические клетки.
Мегакариоцитарный росток.
Мегакариобласт – крупнее других родоначальных кроветворных элементов, имеет большое ядро нежной сетчатой структуры, содержащее 1-2
нуклеолы, и узкий ободок базофильной цитоплазмы. Мегакариобласты представлены на рисунке 20.
23
Рис.20. Внизу два мегакариобласта, в центре миелобласт. Справа клетка в митозе.
Промегакариоцит – в 1.5-2 раза крупнее мегакариобласта, ядро более грубое, многолопастное, без нуклеол. Цитоплазма базофильная, по величине превалирует над ядром, содержит скудную азурофильную зернистость. На этой стадии начинается образование тромбоцитов. Промегакариоциты представлены на рисунке 21.
Рис. 21. Промегакариоциты. Сравните размеры крупных промегакариоцитов с миелоцитами и эритроцитами.
Мегакариоцит – зрелая форма с грубыми полиплоидными ядрами,
широкой цитоплазмой и обильной грубой зернистостью. Мегакариоциты являются основными продуцентами тромбоцитов. Последние образуются из цитоплазмы мегакариоцитов, содержащей гранулы, располагаются скоплениями, иногда в виде цепочек или ленточек, исходящих из цитоплазмы гигантской клетки. Мегакариоциты представлены на рисунке 22.
24
Рис. 22. Мегакариоцит. Сравните размер мегакариоциты с находящимися рядом миелоцитами и другими клетками гемопоэза.
Тромбоциты – круглые или овальные клетки диаметром 2-4 мкм.
Центральная часть тромбоцита представляет собой скопление гранул и носит название грануломера. Гранулы окружены голубоватой или розоватой цитоплазмой. Фотография тромбоцитов представлена на рисунке 23.
Рис. 23. Тромбоциты между эритроцитами.
Дифференцировка и созревание клеток мегакариоцитопоэза происходит в костном мозге. Процесс преобразования мегакариобластов в мегакариоциты продолжается около 25 часов. Время созревания мегакариоцита составляет примерно 25 часов, а жизненный цикл его около
10 суток. Норма содержания тромбоцитов в периферической крови составляет 150-400 х 109/л.
25
Морфология клеток эритроидного ряда.
Особенностью номенклатуры клеток этого ряда является окончание
«бласт» у всех ядросодержащих элементов независимо от степени зрелости.
Вторая особенность строгая субординация по размеру: каждая последующая по зрелости генерация меньше предыдущей.
Эритробласт – родоначальная клетка эритроцитарного ряда размером от 15 до 25 мкм, с ядром, занимающим большую часть клетки и характеризующимся нежным сплетением хроматиновых нитей. Отличается от родоначальных клеток других ростков кроветворения более интенсивной окраской ядра и цитоплазмы. В ядре имеется одна или несколько (1-3)
нуклеол, иногда трудно различимых. Цитоплазма насыщенно синего цвета с фиолетовым оттенком (ультрамариновая), имеет четкие контуры, с зоной просветления вокруг ядра. Иногда отмечается одно или два почковидных выпячивания цитоплазмы («ушки»). Эритробласты представлены на рисунке
24.
Рис. 24. Эритробласты. Слева клетка с «ушками».
26
Пронормобласт. Морфологически близок к эритробласту, но имеет меньшие размеры (12-18 мкм) и более грубую структуру ядра. Нуклеол нет.
Цитоплазма базофильна. Пронормобласты представлены на рисунке 25.
Рис. 25. Пронормобласты.
Нормобласт базофильный размером 10-18 мкм, цитоплазма темно или светло-синяя, нуклеол нет. Хроматиновая сеть в ядре более грубая, с
четким разделением на бази- и оксихроматин, в результате чего ядро имеет колесовидную структуру. Цитоплазма синяя, но окрашена менее интенсивно,
чем у эритробласта. Базофильные нормобласты представлены на рисунке 26.
Рис. 26. Базофильные нормобласты.
27
Нормобласт полихроматофильный размером 9-12 мкм, ядро колесовидной структуры, но с пикнотическими изменениями. Окраска цитоплазмы полихроматофильная, зависит от начинающейся гемоглобинизации клетки. Гемоглобин имеет щелочную реакцию, и
цитоплазма нормобласта, содержащего достаточное количество гемоглобина,
теряет свою кислую реакцию, наряду с основным красителем голубого цвета начинает воспринимать кислые розовые краски, окрашиваясь в разные оттенки сиреневого цвета, т.е. становится полихроматофильной. На полихроматофильной стадии клетки проходят несколько митотических циклов, накапливая гемоглобин в цитоплазме. Полихроматофильные нормобласты представлены на рисунке 27.
Рис. 27. Полихроматофильные нормобласты.
Нормобласт ортохромный (оксифильный). Размер 7-10 мкм. Ядро расположено несколько эксцентрично, плотное, грубо пикнотическое,
напоминает вишнёвую косточку. Цитоплазма имеет розовую окраску. Иногда вблизи ядра видны оторвавшиеся ядерные частицы (тельца Жолли). На стадии отрохромного нормобласта происходит выталкивание ядра и превращение клетки в безъядерный эритроцит. Это явление осуществляется параллельно накоплению гемоглобина в цитоплазме. Оксифильные нормобласты представлены на рисунке 28.
28
Рис. 28. Оксифильные нормобласты.
Промежуточной стадией между ортохромным нормобластом и нормоцитом (полностью гемоглобинизированный эритроцит) является
ретикулоцит – эритроцит, содержащий базофильный компонент,
выпадающий при суправитальной окраске в виде сеточки (ретикулюма).
Размеры 9-11 мкм (несколько больше нормоцита). У взрослого человека в периферической крови встречаются 0,2-1,2 % ретикулоцитов. Ретикулоциты представлены на рисунке 29.
Рис. 29. Ретикулоциты (под стрелкой).
29
Эритроцит образуется из ретикулоцита по выходе его из костного мозга, причем окончательное созревание ретикулоцита в зрелый эритроцит совершается в течение нескольких часов. Зрелые эритроциты имеют вид круглого диска со средним диаметром 7-8 мкм, окрашенного в розово-
красный цвет, с просветлением в центре; базофильной субстанции не содержит. Норма содержания эритроцитов в периферической крови составляет у женщин 3,8-5,2 х 1012/л, у мужчин 4,2-5,6 х 1012/л.
Общий анализ крови.
Изменения клеточного состава периферической крови наблюдаются как при патологии, так и при различных физиологических состояниях организма. Для подсчета и анализа клеток крови используют ручные микроскопические методы и гематологические счетчики разного уровня автоматизации. За последние 20 лет произошло существенное развитие технологии и аппаратуры для автоматического исследования клеток на принципе проточной цитометрии. Во многих странах мира автоматический анализ крови почти полностью заменил ручные и полуавтоматические методы.
Автоматические счетчики крови оценивают размеры, структурные,
цитохимические и другие характеристики клеток. Они анализируют около 10 000 клеток в одном образце, что существенно повышает точность анализа по сравнению с ручными методами, где анализируется от 100 до 1000 клеток на образец.
На основании количества определяемых параметров и степени сложности современные гематологические анализаторы можно разделит на 3
класса.
I класс – автоматические гематологические анализаторы,
определяющие до 20 параметров, включая частичную дифференцировку лейкоцитов на три популяции – лимфоциты, средние клетки и гранулоциты.
30