3. Методы лабораторной диагностики гинекологических заболеваний.
К лабораторным методам исследования в гинекологии относят: бактериоскопический, бактериологический, молекулярно-биологический, серологический, цитологический, радиоиммунологический, иммунологический методы:
Бактериоскопический метод – определение микрофлоры содержимого влагалища и возможного возбудителя в мазках, взятых из цервикального канала, влагалища и уретры.
Материал
для исследования из уретры берут с
помощью одноразового стерильного зонда,
ложечкой Фолькмана, специальной щеточкой
или тампоном, обладающим повышенной
адсорбцией.
Материал из влагалища нужно забирать до влагалищного исследования. Взятие материала из канала шейки матки проводят после обнажения ee с помощью зеркал и протирания сухим ватным тампоном.
У девочек берут материал со слизистой оболочки преддверия влагалища, иногда из заднего свода влагалища путем введения зонда через отверстие в девственной плеве.
Для бактериоскопического исследования материал наносят тонким равномерным слоем на 2 предметных стекла. После высушивания один мазок окрашивают метиленовым синим, другой – по Граму.
Р
азличают
4 степени «чистоты влагалища»:
• I – нормоценоз;
• II – нормоценоз (носительство);
• III – бактериальный вагиноз (дисбиоз);
• IV – вагинит.
• I – под микроскопом видны только клетки плоского эпителия и лактобактерии (палочки Додерлейна), лейкоциты отсутствуют, реакция кислая (pH 3,8-4,2);
• II – лактобактерий меньше, эпителиальных клеток много, встречаются единичные лейкоциты (до 10), реакция кислая (pH 4,0-4,5);
• III – лактобактерий мало, лактоморфотипы, доминирует кокковая флора, возможно обнаружение мицелиев грибов, много лейкоцитов (10-40), реакция слабощелочная (рН 5,0-5,5):
• IV – влагалищные палочки отсутствуют, преобладает пестрая бакте риальная флора, возможны единичные трихомонады, гонококки, масса лейкоцитов, эпителиальных клеток мало, реакция щелочная (pH 6,0-6,5).
Термин «чистота влагалища» является некорректным, не полностью отражающим возможные состояния флоры влагалища, поэтому результаты микроскопического исследования отделяемого влагалища оцениваются с позиций новой классификации:
• Норма — соответствует картине, описанной выше как I-II степени чистоты;
• Бессимптомное носительство — при выявлении условно-патогенных микроорганизмов в концентрациях, превосходящих физиологические, на фоне единичных лейкоцитов и снижении числа эпителиальных клеток (pH 4,0-4,5);
• Бактериальный вагиноз — резкое нарушение флоры при единичных лейкоцитах и эпителиальных клетках (PH более 4,5);
• Вагинит — микроскопическая картина соответствует описанной выше как III и IV степени чистоты влагалища.
Бактериальный вагиноз и вагинит свидетельствуют о патологическом процессе и требуют количественного бактериологического исследования или количественной ПЦР.
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
На бактериологическое исследование направляют материал из церви кального канала, содержимое брюшной полости, полученное при пункции через задний свод влагалища при острых и хронических воспалительных процессах половых органов, а также взятое из брюшной полости во время операции.
Цель этого исследования — определение вида возбудителя, его количества и чувствительности к антибиотикам.
Метод высокоинформативен и считается эталонным. Однако, к сожалению, результаты его могут быть получены не раньше, чем через 7-10 сут.
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Серологические исследования основаны на реакции антиген-антитело и дают косвенные указания на инфицированность. К ним относят определение уровня специфических иммуноглобулинов различных классов (IgA, IgG, IgM) в сыворотке крови путем иммуноферментного анализа (ИФА).
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Цитологический метод является одним из важнейших диагностических методов (онкоцитология) и применяется для ранней диагностики патологических изменений в эпителии.
По
способу получения материала выделяют
пункционную (изучение пунктатов),
эксфолиативную (исследование секрета
и экскрета), экскохлеационную (изучение
соскобов, снятых тампонами, острыми
предметами с очагов поражения) и
аспирационную (исследование аспиратов)
цитологию.
Наибольшее распространение получила оценка цитологических изменений по Папаниколау с выделением 5 групп (англ. - PAP-test):
• I – атипичных клеток нет, что соответствует нормальной цитологиче ской картине;
• II – изменение морфологии клеточных элементов, обусловленное воспалением;
• III – имеются единичные клетки с аномалиями цитоплазмы и ядре (в этом случае необходимо повторное цитологическое исследование или гистологическое исследование патологически измененной ткани или органа);
• IV – обнаруживаются отдельные клетки с явными признаками злокачественности: аномальная цитоплазма, измененные ядра, хроматиновые аберрации, увеличение массы ядер;
• V – множество типично раковых клеток (диагноз злокачественного процесса не вызывает сомнений).
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Гистологические исследования: обычно для гистологического исследования направляют удаленную ткань слизистой оболочки цервикального канала и слизистой оболочки тела матки, полученную во время раздельного диагностического выскабливания, биоптаты, а также удаленный орган или его часть. Гистологическое исследование помогает поставить окончательный диагноз.
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Для определения содержания в крови гонадотропинов, стероидных гормонов яичников и надпочечников используют радиоиммунологические и иммуноферментные методы.
Исследование гормонов должно выполняться в определенной фазе цикла (обычно назначают два исследования: на 5-7-е и 19-21-е сутки месячного цикла).
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Иммунологические исследования – применяются при изучении патогенеза некоторых форм бесплодия, воспалительных заболеваниях. Для диагностики туберкулеза широко используют туберкулиновые пробы.
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Медико-генетические методы – показаны при нарушениях полового развития, некоторых формах нару шений менструального цикла, привычном невынашивании беременности малых сроков, бесплодии, пороках развития половых органов, дисгенезии гонад и т.д.
Эти методы включают:
• определение полового хроматина и кариотипирование;
• хромосомный анализ;
• биохимические исследования, позволяющие выявить наследственные нарушения обмена веществ, связанные с энзимопатией;
• составление генеалогической схемы, позволяющей оценить вероятность появления определенных наследственных признаков у членов изучаемой семьи.
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Определение онкомаркёров – для ранней (доклинической) диагностики и для дифференциальной диагностики опухолевых процессов в крови пациентки определяют содержание опухоль-ассоциированных антигенов СА-125, РЭА, СА-19-9, MCA и др., позволяющих в 84-87% случаев выявлять злокачественные образования яичников и матки, а также контролировать эффективность лечения онкологических заболеваний.