АНАЛИЗ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ
Методы
иммунодиагностики
2
Иммунологическая реакция –
это взаимодействие антигена с антителом, которое определяется специфическим взаимодействием активных центров антитела (паратопа) с эпитопами антигенов.
Общая классификация:
1. СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ
реакции между антигенами (Ag) и антителами (Ig) in vitro
2.КЛЕТОЧНЫЕ РЕАКЦИИ
сучастием иммунокомпетентных клеток
3.АЛЛЕРГИЧЕСКИЕ ПРОБЫ
выявление гиперчувствительности
4
Фазы серологических реакций:
специфическая фаза – фаза взаимодействия, в которой происходит комплементарное соединение активных центров антител и эпитопов антигена. Длится несколько секунд или минут .
неспецифическая фаза – фаза проявления, характеризующаяся внешними признаками образования иммунных комплексов. Длится от нескольких минут до нескольких часов.
Серологические реакции
Цели постановки
•для идентификации антигена
–в патологическом материале (экспресс- диагностика)
–в чистой культуре
•серологическая идентификация (определение вида)
•серотипирование (определение серовара)
•для выявления антител (Ig)
–наличия
–количества (нарастание титра – метод «парных сывороток»)
6
Серологические реакции
Общая классификация
1.Простые (2-х компонентные: Ag + Ig)
РА (с корпускулярным антигеном)
РП (с растворимым антигеном)
2.Сложные(3-х компонентные:
Ag + Ig + C)
3. С использованием метки
7
Реакция коагглютинации
Она основана на способности белка А золотистого стафилококка неспецифически связывать Fc-фрагменты Ig. Стафилококки играют роль частиц с сорбированными на их поверхности AT. При внесении в систему соответствующих Аг с ними взаимодействуют Fab-фрагменты AT и образуются агрегаты из стафилококков, диагностических
AT и исследуемых микробных Аг
8
Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА)
9
Реакция преципитации
С растворимым антигеном
Объемная
В геле (иммунодиффузия)
1.Простая (по Манчини)
2.Двойная или встречная (по Оухтерлони)
Реакция нейтрализации токсина антитоксином (РН)
Другие варианты
1.Иммуноэлектрофорез
2.Иммуноблотинг
10