- •Люминесцентные метки в анализе лекарственных средств
- •Люминесценция
- •Классификация видов люминесценции
- •Классификация люминесценции по длительности свечения
- •Классификация люминесценции
- ••В аналитической практике чаще используют фото- и хемилюминесценцию
- ••Кроме того, в ряде случаев наблюдается большой диапазон определяемых содержаний
- •Диаграмма Яблонского
- •Основные закономерности молекулярной люминесценции
- ••Энергия испускаемого фотона ниже, чем энергия поглощенного фотона, поэтому спектр флуоресценции молекулы находится
- •• Правило Левшина:
- ••Спектр фосфоресценции в соответствии с диаграммой Яблонского лежит в области более длинных волн,
- •Характеристики
- ••Энергетический выход люминесценции Вэн. - отношение излучаемой энергии к поглощенной
- •змерения в люминесценци
- •Упрощенная схема спектрофлуориметра 18
- ••В основе количественного анализа лежит зависимость интенсивности люминесценции от концентрации люминесцирующего вещества
- ••Зависимость линейна в пределах 3-4 порядков величин концентрации (10 -7 -10 -4 М)
- •Применение метода
- •• кристаллофосфоров или твёрдых растворов.
- ••Например, уран в количестве 10 –5 мкг можно определить с применением кристаллофосфора на
- •определения
- •Флуорофор
- •Флюорофоры.Флюорофор.
- •флуорофоров
- •вещества -
- •Проблема анализа терпеновых
- •деятельности
- •Состояние изысканий
- •Синтез новых флуоресцентных веществ
- •Новые флуоресцентные материалы
- •Сульфохлорид пирена как реагент для анализа аминов
- •цитологии
- •Флуорофоры в
- •Спасибо за внимание
• Правило Левшина: |
• поскольку структура |
спектры поглощения и |
колебательных |
флуоресценции |
подуровней |
зеркально |
одинакова в |
симметричны, |
основном и |
|
возбужденном |
|
состояниях |
11
12
•Спектр фосфоресценции в соответствии с диаграммой Яблонского лежит в области более длинных волн, чем спектр флуоресценции
13
14
Характеристики
люминесцирующих молекул
•Спектр возбуждения люминесценции - зависимости интенсивности люминесценции I от частоты (волнового числа) или длины волны возбуждающего света
•Спектр эмиссии (испускания)- зависимость интенсивности люминесценции от ее длины волны I = f(λ); I = f(v)
•Время жизни люминесценции – время, за которое интенсивность излучения уменьшится в е раз, поскольку затухание люминесценции происходит по закону:
•It = I0 e-t/τ
15
•Энергетический выход люминесценции Вэн. - отношение излучаемой энергии к поглощенной
Bэн Ефл
Епогл
• Квантовый выход Вкв. - отношение числа
излучаемых квантов к числу поглощенных квантов светового потока
Bкв Nфл
N погл
16
змерения в люминесценци
17
Упрощенная схема спектрофлуориметра 18
•В основе количественного анализа лежит зависимость интенсивности люминесценции от концентрации люминесцирующего вещества
Iфл К I0 Bкв c l
oгде К – коэффициент пропорциональности
oВкв – квантовый выход люминесценции
oI0 – интенсивность возбуждающего света
oε - молярный коэффициент поглощения
ol – толщина слоя раствора
•Это соотношение справедливо, если постоянны:
oквантовый выход
oинтенсивность возбуждающего света
I kC |
20 |
•Зависимость линейна в пределах 3-4 порядков величин концентрации (10 -7 -10 -4 М)
I ф л
c
Зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации флуоресцирующего вещества
•При концентрациях >10 -4 М линейность графика нарушается из-за концентрационного тушения люминесценции , самопоглощения и др.
21
