
Конспекты / Сводки по темам / Стерилизация и дезинфекция
.pdfСтерилизация и дезинфекция
Стерилизация (от лат. sterilis - бесплодный) в микробиологии - удаление всех жизнеспособных микроорганизмов (в вегетативной форме или в состоянии споры) в материале или на объектах. Дезинфекция (от франц. приставки des – удаление, уничтожение) - удаление всех патогенных или условно-патогенных микроорганизмов (но обычно без уничтожения бактериальных спор). Данная процедура предусматривает обработку загрязненного микробами предмета с целью их уничтожения до такой степени, чтобы они не могли вызвать инфекцию при использовании данного предмета. Антисептики
– дезинфектанты используемые для обработки живых тканей (поверхности кожи, ран, дренаж и т.д.). Дезинфектанты оказывают биоцидный (убивающий) эффект; антисептики имеют биоцидный или биостатический (угнетающий рост) эффект. Дезинфектанты и антисептики оказывают неизбирательное действие, поэтому их, в отличие от антибиотиков, используют только для обработки поверхностей (не употребляют внутрь).
A.Методы стерилизации:
1.Физические методы.
Физические методы подразделяют на термические (паровой, воздушный) и радиационные (гамма-излучение и др.). Стерилизация высокой температурой вызывает денатурацию белков, в том числе ферментов, вследствие чего
вегетативные формы микробов погибают. Стерилизация с помощью повышенного давления удаляет воду из микробов. Стерилизация облучением приводит к денатурации белков и нуклеиновых кислот.
Термическая (тепловая) стерилизация – наиболее надежный, экологически безопасный, дешевый и хорошо контролируемый метод. Однако его не возможно применять в тех случаях, когда предметы и вещества повреждаются от действия высокой температуры. В этих ситуациях используют другие методы.
1)Прокаливание в верхнем пламени горелки (фламбирование). Используется в микробиологической лаборатории для обработки бактериальных петель (до красного накаливания), шпателей, игл, пинцетов.
2)Сжигание инфицированного материала, трупов животных, малоценных предметов обихода, постельного белья и т.д.
3)Стерилизация в сухожаровых шкафах при температуре 160 C в течение часа. Этот метод используется для стерилизации стеклянных шприцов, чашек Петри, пробирок, флаконов, скальпелей, ножниц и т.д.
4)Автоклавирование - комбинация высокой температуры и давления (121 C в течение 15-20 минут при 2 атмосферах или 111 C при 1.5 атмосферах, учитывая атмосферу воздушного столба) используется для стерилизации питательных сред, изделий из резины, шприцов, белья и т.д.
5)Тиндализация (дробная стерилизация)- процесс, при котором среда обрабатывается при 56-58 C в течение 30 минут последовательно в течение 3 дней. Данный метод используется для обработки белоксодержащих питательных сред.
Рентгеновское и другие виды ионизирующего излучения используются для стерилизации одноразового материала (шприцы) в промышленных масштабах.
2. Механический метод (фильтрование) используется для сред или материалов не устойчивых к высокой температуре, облучению и т.д. (антибиотики, углеводы, белки). Не рекомендуется использовать фильтрацию для стерилизации биологических жидкостей, поскольку данный метод не обеспечивает удаления из среды мельчальших бактерий (микоплазмы
идр.) и вирусов.
3. Химический метод
1)газовый (например, формальдегидом, окисью этилена или пропилена, которые в присутствии воды вызывают денатурацию белка).
2)стерилизация растворами химических веществ (Н2О2, Дезоксон-1) применяется в тех случаях, когда другие методы недоступны. Данный метод опасен для персонала, окружающей среды и пациентов.
Микробиологический контроль объектов, подвергшихся стерилизации, как правило, не проводится. Его заменяет контроль работы стерилизаторов, который осуществляется несколькими способами:
1)персонал должен строго соблюдать установленный режим стерилизации, который обеспечивает гибель микробов.
2)косвенно о поддержании определенной температуры можно судить по изменению окраски химических индикаторов (индикаторные бумажки, бензойная кислота, мочевина), которые помещают на поверхности и в глубине стерилизуемого объекта.
3)соответствующей службой должен регулярно проводиться технический контроль аппаратуры.
4)3 раза в год осуществляют биологический контроль, помещая внутрь стерилизуемых предметов биотесты, приготовленные из термоустойчивых спорообразующих бактерий. Для проведения микробиологического контроля производят посев кусочков материала, смывов с предметов, подвергшихся стерилизации, на среды, позволяющие обнаружить аэробные и анаэробные бактерии, грибы. Отсутствие роста после 14 дней инкубации в термостате свидетельствует о стерильности предмета. Более тщательный контроль стерильности осуществляют в промышленных условиях: методом случайного отбора исследуют образцы стерилизуемых материалов. Для сохранения стерильности предметы должны иметь упаковку, не допускающую микробного загрязнения. С этой целью применяют полимерную пленку, бумагу, фольгу, биксы, стеклянные флаконы и т.п.
В. Методы дезинфекции
В ЛПУ используют два основных метода дезинфекции: физический и химический. Выбор того или иного метода зависит от дезинфицируемого материала.
1. Физический метод. При физическом методе используют следующие механические приемы: вытряхивание, выколачивание, подметание, влажная уборка, проветривание, обработка помещений пылесосом. При этом достигается значительное снижение микробной обсемененности объектов внешней среды. К физическому методу относят также некоторые способы обеззараживания, основанные на физических параметрах:
а) действие высоких температур
-кипячение при 100 С может исп для обеззараживания многоразового инструментария из резины, стекла и металла;
-пастеризация в режимах 63 C в течение 30 минут или 80 C в течение 5-10 мин уничтожает только вегетативные формы бактерий;
-действие горячего воздуха, пара, высушивание;
б) действие низких температур (приостанавливает жизнедеятельность патогенных микробов)
-охлаждение; -замораживание;
в) действие лучистой энергии
-ультрафиолетовое излучение метод выбора для дезинфекции (кварцевания) общественных мест и лабораторий (для обеззараживания воздуха в различных помещениях);
-ионизирующее излучение; -ультразвук.
2. Химический метод дезинфекции основан на использовании различных химических веществ в виде водных растворов, эмульсий, суспензий, таблеток, порошков, полимерных покрытий.
Дезинфицирующие химические средства – это вещества, употребляемые для разрушения микроорганизмов на поверхностях, но слишком токсичные, чтобы применять непосредственно в тканях. Свойства данных веществ: обычно легко растворимы в воде, действуют быстро, дешевы, и при правильном применении не оказывают вредного воздействия на организм человека. Их эффективность зависит от концентрации химических веществ и времени контакта с микробом.
Классификация дезинфектантов по механизму действия:
1.деструктивный механизм с литическим или денатурирующим эффектом
2.окислительный механизм (перекись водорода, перманганат калия, галогены)
3.мембраноатакующий механизм (детергенты, нарушающие проницаемость мембран)
4.антиферментный механизм (соли тяжелых металлов, оксихинолины, нитрофураны). Классификация дезинфектантов по химическому составу:
1.Спирты (этанол, изопропанол и др.) осаждают белки и вымывают из клеточной стенки липиды.
2.Галогены (препараты йода и хлора) широко применяют как дезинфектанты и антисептики. Эти вещества взаимодействуют с гидроксильными группами белков, нарушая их структуру. Как дезинфектанты применяют хлорсодержащие препараты: газообразный хлор (в присутствии воды образует хлорноватистую кислоту), хлорную известь, хлорамин Б, хлоргексидина биглюконат (гибитан), хлоргексидин глюконат (гибискраб).
3.Альдегиды алкилируют сульфгидрильные, карбоксильные и аминогруппы белков, вызывая гибель микроорганизмов. Формальдегид и глютаральдегид проявляют раздражающее действие.
4.Кислоты и щелочи (борная, бензойная, уксусная, салициловая кислоты, раствор аммиака (нашатырный спирт), применяемый в качестве 0,5% раствора для обработки рук хирурга).
5.Соли металлов. Антимикробный эффект основан на способности осаждать белки и другие органические соединения.
Вкачестве антисептиков широко применяют нитрат серебра (ляпис), сульфат меди (медный купорос) и хромат ртути (мербромин).
6.Фенолы и их замещенные производные денатурируют белки и нарушают структуру клеточной стенки. Фенол не применяют из-за его токсичности, но его производные (резорцин, салол, тимол) применяют часто.
7.Детергенты оказывают бактерицидное действие, связанное с изменением проницаемости цитоплазматической мембраны. Применяют для обработки рук хирурга (циригель, дегмицид).
8.Красители (бриллиантовый зеленый, метиленовый синий, риванол, основной фуксин).
9.Окислители. Механизм действия связан с окислением метаболитов и ферментов микроорганизмов, либо денатурацией микробных белков (перекись водорода, перманганат калия).
10.Производные нитрофурана (фурацилин, фурагин, фуразолидон).
11.Производные 8-оксихинолина (нитроксолин, интестопан, хинозол), 4- хинолона (оксолиновая кислота) и хиноксолина (диоксидин, хиноксидин).
Различают профилактическую дезинфекцию и дезинфекцию в эпидемическом очаге. Профилактическая дезинфекция осуществляется для предупреждения появления и распространения различных заболеваний. При возникновении эпидемического очага проводят текущую (во время вспышки) и заключительную (после ее окончания) дезинфекцию.
С. Обработка рабочего стола в микробиологической лаборатории.
Возможные варианты обработки столов в учебной микробиологической лаборатории представлены в таблице 4. Таблица 4. Возможные варианты обработки лабораторных столов.
Дезинфицирующий агент |
Концентрация раствора,% |
Хлорамин Б с 0,5% моющего средства |
0,75 |
Перекись водорода |
3,0 |
Перекись водорода с 0,5% моющего средства |
3,0 |
Амфолан |
1,0 |
Хлорцин |
1,0 |
Хлоргексидин биглюконат |
0,5 |
Нейтральный гипохлорит кальция |
1,0 |
Гипохлорит натрия |
0,25 |
Сульфохсорантин |
0,25 |
|
0,2 |
Протирание проводится двукратно, с интервалом в 15 мин и последующей экспозицией 60 мин или до полного высыхания.