
- •1. Мембранные технологии, их использование в биотехнологии.
- •1. Пластинчатый диализатор
- •2. Диализатор типа «фильтр-пресс»
- •2. Роль мембранных технологий в очистке генно-инженерных белков.
- •1. Ультрафильтрация
- •2. Диализ
- •3. Электродиализ
- •3. Предложить вариант мембранной технологии для концентрирования большого количества раствора генно-инженерного белка
- •1. Ультрафильтрация: Первичный этап концентрирования
- •2. Диализ: Удаление остаточных солей и буферных компонентов
- •3. Электродиализ: Регулировка ионного состава
- •4. Центрифугирование, основные методы.
- •1. Этапы применения центрифугирования
- •1.1. Удаление клеточного мусора (клеточный лизат)
- •1.2. Концентрация белка
- •Тип ротора:
- •Условия центрифугирования:
- •Особенности
- •Виды колориметрии
- •Пример работы фотоколориметра
- •Строение и принцип работы спектрофотометра на диодной матрице:
- •Преимущества и особенности:
- •1. Поглощение белков в уф-области
- •2. Поглощение нуклеиновых кислот (нк) в уф-области
- •3. Изобестическая точка
- •Применение в бт:
- •1. Ультрафиолетовая видимая спектроскопия (uv-Vis)
- •1. Источник инфракрасного излучения
- •2. Монохроматор
- •3. Оптическая система
- •4. Образец
- •5. Приемники излучения
- •Принцип работы
- •Особенности и преимущества Фурье-ик-спектрометра
- •1. Инфракрасная (ик) спектроскопия Описание метода:
- •Применяемые техники:
- •Применение:
- •2. Раман-спектроскопия (спектроскопия комбинационного рассеяния) Описание метода:
- •Применяемые техники:
- •3. Спектроскопия комбинационного рассеяния ближнего ик-диапазона (nir-спектроскопия)
- •Применение флуоресценции в биотехнологии
- •Тушение флуоресценции
- •Иммунофлуоресценция
- •Основные элементы устройства
- •Импульсные спектрометры с преобразованием Фурье (ft-nmr)
- •Основные этапы maldi масс-спектрометрии:
- •1. Время удерживания:
- •2. Время удерживания несорбируемого компонента или мертвое время:
- •3. Мертвый объём
- •4. Фактор удерживания к (коэффициент ёмкости)
- •5. Селективность (α):
- •6. Эффективность - число теоретических тарелок
- •7. Высота теоретической тарелки (h):
- •8. Пиковая емкость колонки
- •9. Разрешение Rs:
- •10. Фактор асимметрии для Асимметричные пики («с хвостом»)
- •1. Экстракция водорастворимых биологически активных соединений
- •2. Экстракция жирорастворимых биологически активных соединений
- •1. Лиофильные сушилки (фриз-драйеры)
- •Принцип действия:
- •2. Ротационные испарители
- •3. Сушильные шкафы
- •2. Спрей-сушилки (распылительные сушилки)
- •3. Вакуумные сушилки Принцип действия:
- •Применение:
- •1) Источники питания
- •38.Сравнительный анализ хроматографических и электрофоретических задач в биотехнологии.
- •2. Типы анализируемых веществ:
- •5. Оборудование и сложность:
- •40. Капиллярный электрофорез, особенности и достоинства метода в сравнении с планарным электрофорезом.
Особенности
Область применения:
Анализ окрашенных растворов (например, ионы металлов, органические красители, биологические вещества).
Применение в химии, экологии, медицине (анализ крови, воды, почв).
Ограничения:
Подходит только для окрашенных веществ.
Зависимость результатов от внешних факторов (качество источника света, свойства растворителя).
Меньшая точность по сравнению с более сложными методами (например, спектрофотометрией).
Аппаратное оформление
Источник света:
Белый свет (лампы накаливания, светодиоды).
Светофильтры или монохроматоры:
Отделяют определённый цвет или длину волны, соответствующую максимальному поглощению анализируемого вещества.
Например, зелёный светофильтр используется для анализа веществ с красным оттенком.
Кюветы:
из стекла, кварца или пластика.
Детектор света:
Фоторезисторы, фотодиоды или фотоэлектронные умножители.
Измеряют интенсивность света до и после прохождения через раствор.
Виды колориметрии
Визуальная колориметрия:
Использует глаз как детектор.
Интенсивность окраски образца сравнивается с серией стандартных растворов.
Пример: сравнение с цветовой шкалой (например, шкала pH).
Фотоколориметрия:
Использует приборы для измерения интенсивности света.
Более точна, чем визуальная колориметрия.
Пример работы фотоколориметра
Этап 1: Определение длины волны максимального поглощения.
Для этого готовят раствор вещества и проводят сканирование спектра поглощения.
Этап 2: Построение калибровочного графика.
Измеряют интенсивность света для стандартных растворов известной концентрации.
Этап 3: Анализ образца.
Интенсивность поглощения тестового раствора сравнивают с данными калибровочного графика для определения концентрации.
Спектроскопия и спектрофотометрия
Спектроскопи́я — раздел физики, посвящённый изучению спектров электромагнитного излучения. В более широком смысле — изучение спектров различных видов излучения. Методы спектроскопии используются для исследования энергетической структуры атомов, молекул и макроскопических тел, образованных из них. Они применяются при изучении таких макроскопических свойств тел как температура и плотность, а в аналитической химии — для обнаружения и определения веществ.
Спектрофотометрия (абсорбционная) — физико-химический метод исследования растворов и твёрдых веществ, основанный на изучении спектров поглощения в ультрафиолетовой (200— 400 нм), видимой (400—760 нм) и инфракрасной (>760 нм) областях спектра.
Классический спектрофотометр состоит из нескольких ключевых компонентов, которые работают вместе для измерения интенсивности света на различных длинах волн. Вот схема его строения:
Источник света (например, лампа с водородным или дейтериевым спектром):
Обеспечивает монохроматический или широкий спектр света, который направляется на образец.
Монохроматор (или фильтр):
Системы для разделения света на отдельные длины волн. Монохроматор может быть решеткой дифракции или фильтром, который пропускает только одну длину волны или узкий диапазон.
Образец:
Вставляется в путь света для анализа. Это может быть жидкость в кювете или твёрдое вещество, через которое проходит свет.
Детектор (например, фотодиод или фотомножитель):
Измеряет интенсивность света, прошедшего через образец. Детектор преобразует световую энергию в электрический сигнал.
Система обработки сигналов:
Электронные схемы, которые обрабатывают сигналы от детектора и отображают результаты на дисплее в виде графика или числовых значений.
В спектрофотометрии на диодной матрице, используя дифракционную решетку и фотодиоды, процесс измерения спектра значительно ускоряется и упрощается, благодаря интеграции множества компонентов в одно устройство. Рассмотрим, как это работает, учитывая все элементы.