Все лк фарм бт

Cytiva

Capto Core 400 / 700 - сорбент для очистки AAV / AV вирусов и крупных биомолекул в режиме протока

• Неактивная пористая оболочка - гельфильтрационная составляющая

• Активированное лигандом ядро - мультимодальная составляющая – для захвата примесей

• Малые примеси проникают в оболочку и связываются с мультимодальным лигандом в ядре

• Целевой продукт (вирусы, крупные биомолекулы) не может проникнуть в оболочку и собирается в протоке

• Capto Core 400 для AAV, Capto Core 700 для

AVвирусов

Комбинирование гель-фильтрационной и мультимодальной связывающей

Применение Capto Core 700 для очистки AV в режиме протока

Multimodal Chromatography – справочные материалы

https://cdn.cytivalifesciences.com/dm

m3bwsv3/AssetStream.aspx?mediafor

matid=10061&destinationid=10016&a

ssetid=16870 https://www.cytivalifesciences.com/en/us/solutions/protein-research/knowledge- center/protein-purification-methods/Multimodal-chromatography

Обращенно-фазовая хроматография

•Метод основан на обратимом взаимодействии биомолекул с

неполярной гидрофобной поверхностью сорбента

•Неподвижная фаза ОФХ-сорбентов модифицирована неполярными длинными углеродными цепями (пример – С18)

•Связывание как правило очень сильное, на степень влияют условия и состав буферов.

•Для повышения гидрофобности наносимого образца часто используется добавление специальных соединений - ион-

парных агентов

Обращенно-фазовая хроматография

•Для элюции необходимо, чтобы подвижная фаза стала более гидрофобной, чем неподвижная – т.е. чтобы полярность

элюирующего буфера понижалась

•Элюирование осуществляется в градиенте - повышающейся концентрации органического растворителя с индексом

полярности меньшим, чем у воды

•Первым всегда будет элюироваться компонент с наибольшей

полярностью

•Высокоразрешающий метод, в основном применяется на финальных стадиях (Polishing) или в аналитике (контроль)

Гидрофобная и обращенно-фазовая хроматография

Hydrophobic and Reversed Phase Chromatography

Хроматография RPC – влияние ион-парных агентов

A common way to increase the hydrophobicity of charged components, enhance binding to the medium, and so alter retention time, is to add ion-pairing agents to the buffer. These agents bind via

ionic interactions with charged groups and thereby suppress their influence on overall hydrophobicity

(Figure 70). Since most proteins and peptides are slightly basic, ion-pairing agents are often acids such

as trifluoroacetic acid (TFA) whereas a base such as triethylamine is used for negatively charged molecules.

In some cases, the addition of ionpairing agents is an absolute requirement for binding to the RPC medium. For example, an ion-pairing agent such as trifluoroacetic acid is essential to ensure binding of hydrophilic peptides