Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Все лк фарм бт

.pdf
Скачиваний:
19
Добавлен:
03.02.2025
Размер:
62.68 Mб
Скачать

Расчет заряда и изоточки белка по первичной последовательности

http://protcalc.sourceforge.net/

Катионобменная хроматофокусировка – элюция при изменении рН буфера

pI Aspartate = 2,77

pI Threonine = 5,60

pI Histidine = 7,59

Исходный буфер имеет рН = 2, все АК заряжены положительно

По мере увеличения рН буфера заряд АК будет становиться отрицательным, и они будут элюироваться с катионообменного сорбента

Ионообменная хроматография (IEX) – элюция в градиенте соли при постоянном рН буфера

Salt gradient elution:

Cation exchange at various pH

+ + +

- + +

- - +

- - -

Первым всегда элюируется компонент, ближайший по значению pI к рН буфера

Anion exchange at various pH

+ + +

++ -

+ - -

- - -

Ионообменная хроматография (IEX) – элюция в градиенте соли при

постоянном рН буфера

IEX – выделение альбумина

из плазмы крови

Let’s keep in touch

Aleksey Tsivov, PhD

Advanced Application Specialist, Russia & CIS Cytiva, formerly GE Healthcare Life Science

M +7 916 092-06-35

aleksey.tsivov@cytiva.com

Лекция 3. Гидрофобная, мультимодальная и обращенно-фазовая хроматография

Алексей Цивов, к.х.н.

Научный консультант по применению биотехнологического оборудования Cytiva

РТУ-МИТХТ, Москва, 2022

Выбор типа хроматографии зависит от физико-химических свойств целевой молекулы

Типичная молекула белка.

Заряженные группы, гидрофобные сайты, активные центры, размер, растворимость – определяют химические и биофизические свойства и прямо влияют на поведение молекулы при очистке.