Capto L, KappaSelect, и LambdaFabSelect – альтернативные
аффинные сорбенты для выделения фрагментов антител
Optimize Antibody Fragment Purification - Working with antibody fragments offers opportunities and challenges
Сорбент MabSelect VL для захвата биспецифических mAb
Сорбент на базе Protein L с повышенной DBC для выделения:
-фрагментов антител
-биспецифических антител
Стабилен при санитизации 0,1 M NaOH
Очистка тэговых белков с применением аффинных сорбентов
StrepTactin Sepharose High Performance
Protein A/G для очистки антител
Пептидные метки:
HA-tag
FLAG-tag
Myc-tag
V5-tag
Авидин/стрептавидин – biotin
Strep-tag a peptide which binds to streptavidin
BCCP (Biotin Carboxyl Carrier Protein),
a protein domain biotinylated by BirA enabling recognition by streptavidin
GST (Glutathione-S-transferase-tag) binds to immobilized glutathione
Maltose binding protein-tag
a protein which binds to amylose agarose S-tag
Dextrin Sepharose High Performance
Металл-аффинная хроматография (IMAC)
•Частный случай AC – металл-аффинная хроматография - основан на обратимом взаимодействии белков с гистидиновым тэгом (HIStag) с ионами металлов (Ni, Co, Zn, Cu)
•Связывание и элюирование (ступенчатое или градиентное)
осуществляется с помощью увеличения концентрации имидазола, используемого в качестве конкурентного лиганда
•Метод может быть использован даже для неочищенного лизата
http://iairas.ru/mag/2013/full1/Art9.pdf
Total solutions for preparation of histidine-tagged proteins Selection Guide
Металл-аффинная хроматография (IMAC)
Аффинная хроматография для захвата специфических молекул
Affinity Chromatography Handbook Vol.3: Specific groups
Ионообменная хроматография (IEX)
•Метод основан на обратимом взаимодействии заряженного
белка с противоположно заряженным сорбентом
•Типичная схема включает этапы: нанесение образца / связывание, отмывка, элюирование, регенерация
•Нанесение образца происходит в буферах с малым
содержанием соли
•Элюирование проводится при увеличении ионной силы раствора – в буфере с повышающейся концентрацией соли
•Суммарный заряд белковой молекулы зависит от pH буфера и pI (изоэлектрическая точка) белковой молекулы