Белок A и белок G имеют различные специфичности к различным субтипам антител
Белок A и белок G являются бактериальными белками бактерий Staphylococcus Aureus и Streptococcus
соответственно. В сочетании с сефарозной матрицей, белок A и белок G создают полезные и простые в использовании аффинные хроматографические сорбенты для высокоэффективной очистки антител
+++ = strong binding + = weak binding
- = no binding
+/- = weak binding in some cases
Структура домена белка A в виде трехспирального пучка, связывающегося с тяжелой вариабельной цепью человеческого Fab VH3 (IgG1 и IgG2) слева. Минимизированный белок А, связанный с Fc-фрагментом ритуксимаба. Wikipedia.
Columns and resins for antibody purification Selection Guide
Эволюция Protein A - based сорбентов Cytiva
Cytiva Protein A resins
For routine purification |
|
|
|
If you need thorough cleaning |
in research |
|
|
of the resin between runs |
|
|
|
|
|
|
|
|
First choice for routine |
|
High binding capacity is |
First choice for optimal |
|
Established method with |
|
the priority or need for |
|
purification |
|
performance |
|
MabSelect SuRe™ or LX |
|
batch purification |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Protein A Sepharose™ |
|
rProtein A Sepharose |
|
MabSelect™ PrismA |
|
MabSelect SuRe >> |
|
|
Higher binding capacity than |
|
|
High Performance* |
|
Fast Flow |
|
predecessors MabSelect SuRe |
|
MabSelect SuRe LX >> |
|
|
|
|
and LX |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
*only available in prepacked columns
Эволюция Protein A - based сорбентов: высокая динамическая связывающая способность и общие условия элюирования
Example of HiScreen MabSelect PrismA
MabSelect™ PrismA
MabSelect SuRe™ LX
MabSelect
SuRe
DBC (Qb10) = Dynamic Binding Capacity, mg of loaded protein per ml of resin
HiScreen™ MabSelect PrismA DBC compared to HiScreen MabSelect SuRe LX and HiScreen MabSelect
SuRe at different residence time.
Эволюция Protein A - based сорбентов: устойчивость к щелочной
отмывке
MabSelect PrismA, Protein A HP and rProtein A FF after purification/CIP with 1 M NaOH for up to 25 cycles
Use of sodium hydroxide for cleaning and sanitization of chromatography resins and systems Application Note
AKTA™ PCC - Periodic Counter Current (continuous) chromatography
Уменьшение времени контакта - Fibro Prism A
https://www.cytivalifesciences.com/en/us/solutions/bioprocessing/products-and-solutions/downstream- bioprocessing/fibro-chromatography
Fibro formats and ÄKTA systems
Разнообразие различных вариантов антител – от полноразмерных до т.н. наноформ