Все лк фарм бт
.pdf
Выбор типа хроматографии зависит от физикохимических свойств целевой молекулы
Типичная молекула белка
Заряженные группы, гидрофобные сайты, активные центры, размер, растворимость – определяют химические и биофизические свойства и прямо влияют на поведение молекулы при очистке.
Типы (модальности) хроматографии
Классификация методов на основе свойств компонентов смеси
Свойство белковой молекулы |
Тип хроматографии |
|
|
Специфический сайт взаимодействия |
Аффинная (AC) |
|
|
Сайт связывания ионов металлов |
Металл-аффинная (IMAC) |
|
|
Заряд |
Ионообменная (IEX) |
|
|
Изоэлектрическая точка |
Хроматофокусировка (CF) |
|
|
Гидрофобность / гидрофильность |
Гидрофобная (HIC) |
|
Обращеннофазная (RPC) |
|
|
Размер |
Гель-фильтрация (GF, SEC) |
|
|
Классификация хроматографии по цели проведения
В зависимости от цели проведения хроматографического процесса различают:
•аналитическую хроматографию - качественный и количественный анализ получаемых продуктов (ОКК – отдел контроля качества).
•препаративную хроматографию – разработка ЛС, фундаментальные исследования (отдел разработки, био… лаборатория)
•промышленную – наработка фармбиотехнологического продукта надлежащего качества (производственный отдел)
Виды хроматографии и терминология
•Фронтальная хроматография – процедура, в которой образец непрерывно подается на хроматографический сорбент, без дополнительной подвижной фазы
•Вытеснительная хроматография - процедура , когда подвижная фаза содержит компонент (вытеснитель), более прочно сорбирующийся на неподвижной фазе, чем разделяемое вещество
•Элюентная хроматография – подача вещества в непрерывном потоке подвижной фазы, или элюента. Основной метод, используемый на сегодняшний день
•https://iupac.org/recommendation/terminology-separation-methods/
•https://www.degruyter.com/view/journals/pac/90/1/article-p181.xml
Фронтальная хроматография
Фронтальная хроматография —
метод разделения и анализа веществ, в котором анализируемая смесь непрерывно протекает через слой сорбента. При этом наименее сорбируемый компонент опережает остальные и выходит в виде зоны чистого вещества раньше всех, а за ним в порядке сорбируемости последовательно располагаются зоны смесей компонентов. То есть только один компонент может быть получен в чистом виде, остальные – не разделяются. Метод удобен для очистки некоторых веществ от примесей, если они сорбируются значительно лучше, чем очищающее вещество
Элюентная хроматография