Все лк фарм бт
.pdf
Параметры процесса
•Время – чем дольше, тем полнее инактивация
•pH – чем ниже, тем эффективнее
•Концентрация детергента/растворителя – чем выше тем эффективнее
•Температура – чем ниже, тем медленнее инактивация
•Перемешивание – эквивалентно производственному
•Белки и липиды – могут влиять на процесс
Дополнение
•Температура – минимально допустимая при производстве (потребуется контроль)
•Недопустим слишком маленький объем – может произойти неполная инактивация в каплях и т.п.
•Процесс динамический – надо оценивать в разное время.
43
Параметры процесса
•Тип мембраны, производитель и т.п. – аналогично производственному
•Нагрузка на фильтр – не менее производственной
•Скорость фильтрации/трансмембранное давление –
должны охватывать производственный диапазон
•pH, осмоляльность и др. – влияют на скорость и забивку
•Концентрация белка, олигомеры и т.д. – влияет на забивку фильтра
Дополнение
Чистота вирусного материала – не параметр производственного процесса, однако очень сильно влияет на забивку мембраны
45
Хроматографические стадии не являются робастными стадиями с точки зрения удаления вирусов!
Однако при правильном планировании могут вносить существенный вклад
Параметры процесса
•Высота сорбента сохраняется, диаметр уменьшается до лабораторного
•Состав и параметры буферов – идентичны производственным или худший случай
•Скорость потока и объем промывок и элюции – худший случай
•Нагрузка на сорбент – как правило, увеличена относительно производственной
•Регенерация – оценка эффективности регенерации
•Оценка работы «старого сорбента»
Цитотоксичность
•Необходимо определить влияние исследуемых образцов на тестовые клеточные линии
•Определяется минимальное разведение образца, при котором влияние не выявляется
•Если цитотоскичность высока, то LRV и эффективность стадии будет низкой, могут потребоваться дополнительные методы
Влияние на тестовые системы и вирусы
•Даже при низкой цитотоксичности образцы могут препятствовать заражению тестовых клеток вирусами (инактивировать, мешать связыванию и т.п.)
•Проводятся исследования с добавлением известного титра вируса.
