Все лк демидюк
.pdf
136.5 Каноническая инициация трансляции у эукариот
Схема предполагаемого расположения факторов инициации на 40S рибосомной субчастице. Вид со стороны головки. Номера соответствуют номенклатуре факторов инициации (eIF). Составлено по данным криоэлектронной микроскопии.
Модель сканирования, основанная на предотвращении обратного движения инициаторного комплекса путем циклического связывания фактора eIF4B с мРНК.
Успехи биологической химии, т. 52, 2012, с. 127–156
136.6 ДЛЯ ТОГО, ЧТОБЫ ПОЛУЧИТЬ БЕЛОК, НУЖНО
ОБЕСПЕЧИТЬ ТРАНСКРИПЦИЮ И ТРАНСЛЯЦИЮ ГЕНА
+1
|
|
|
|
|
P |
SD ATG |
CDS |
STOP |
tt |
|
|
|
|
RBS
Схема кассеты для экспрессии белка в клетках прокариот
P – промотор
+1 – точка начала транскрипции
SD – последовательность Шайна-Далгарно (Shine-Dalgarno) ATG – инициаторный кодон
RBS – сайт связывания рибосомы (ribosome binding site)
CDS – кодирующая последовательность ДНК (coding DNA sequence)
STOP– терминирующий кодон
tt – терминатор транскрипции
88 |
ИНГИБИТОРЫ ТРАНСКРИПЦИИ |
|
|||||
|
Игибитор |
Действие |
|
|
|
|
|
|
Актиномицин D |
Ингибирует все РНК-полимеразы. При концентрации |
|||||
|
|
актиномицина, приводящей к блокированию транскрипции, |
|||||
|
|
репликация ДНК не замедляется |
|
|
|||
|
Рифамицин и |
Блокирует транскрипцию у прокариот, но не влияют на |
|||||
|
рифампицин |
транскрипцию у эукариот. Блокирует инициацию синтеза РНК, |
|||||
|
|
связываясь с -субъединицами холофермента РНК-полимеразы. |
|||||
|
|
Если синтез РНК уже иницирован, то процесс элонгации |
|||||
|
|
оказывается нечувствительным к антибиотику. |
|
||||
|
Стрептолидигин |
Блокирует элонгацию, но не инициацию синтеза РНК |
|
||||
|
-аманитин |
Из |
трех |
эукариотических |
РНК-полимераз |
наиболее |
|
|
|
чувствительна |
к |
-аманитину |
РНК-полимера-за |
II. РНК- |
|
полимераза I не ингибируется совсем, а РНК-полимераза III
ингибируется только при высоких концентрациях антибиотика
Актиномицин D
89 |
ИНГИБИТОРЫ ТРАНСЛЯЦИИ |
Стрептомицин как большинство других аминогликозидов, связывается только с S12-белком 30S-субчастицы бактериальных рибосом
Пуромицин блокирует синтез полипептидов на рибосомах как у про-, так и у эукариот, имитируя действие аминоацил-тРНК
Эритромицин блокирует перемещение рибосомы после завершения элонгации или пептидилтрансферазную реакцию
Хлорамфеникол и циклогексимид.
Хлорамфеникол действует на рибосомы бактерий, митохондрий и хлоропластов, а циклогексимид - только на рибосомы эукариот, находящиеся в цитоплазме. Оба соединения влияют на пептидилтрансферазную активность больших субчастиц рибосом.
89.5 |
РЕГУЛЯЦИЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ |
|
|
|
|
|
Синтез первичного РНК |
|
|
транскрипта (транскрипция) |
|
||
|
|
Посттранскрипционная |
|
|
модификация мРНК |
|
Деградация мРНК |
|
|
|
|
|
|
Синтез белка (трансляция) |
|
|
Посттрансляционная |
|
|
модификация белка |
|
|
Транспорт белка |
|
Деградация белка |
|
|
|
90 |
РЕГУЛЯЦИЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ |
|
Согласованная регуляция экспрессии прокариотических генов |
Оперон – группа прокариотических генов, которые расположены друг за другом, находятся под управлением одного промотора и транскрибируются с образованием полицистронного транскрипта – одной мРНК, кодирующей несколько белков
Область, кодирующая регуляторный белок
Оператор - регуляторный
сегмент гена (участок |
|
Полицистронный |
связывания с белком- |
Промотор |
(или полигенный) |
репрессором) |
|
транскрипт |
92 Согласованная регуляция экспрессии прокариотических генов
Положение на генетической карте
E. coli генов,
кодирующих рибосомные белки.
91 Согласованная регуляция экспрессии прокариотических генов
Негативная регуляция инициации транскрипции, или репрессия, осуществляется белками репрессорами, которые связываются со специфическими нуклеотидными последовательностями ‒ операторами Позитивная регуляция инициации транскрипции может осуществляться при связывании специфических белков-активаторов с нуклеотидными последовательностями, расположенными в области промотора
93 РЕГУЛЯЦИЯ ЭКСПРЕССИИ ЛАКТОЗНОГО ОПЕРОНА E. COLI
Оперон – единица координированной транскрипции генов прокариот
Нобелевская премия 1965 г.
Jacques Monod and Francois Jacob
Оператор – регуляторный сегмент гена – участок связывания с белком-репрессором
94 |
Регуляция экспрессии лактозного оперона E. coli |
|
Негативная регуляция |
G
(индуктор) |
G |
|
|
|
|