- •Вопросы к коллоквиуму по микробиологии
- •Устройство микробиологической лаборатории.
- •Правила работы в микробиологической лаборатории.
- •Устройство биологического микроскопа.
- •Правила работы с микроскопом.
- •Окончание микроскопирования
- •Какие особенности устройства и принципы работы темнопольного, фазово-контрастного, люминесцентного и электронного микроскопов?
- •Как проводится отбор проб чистой культуры микроорганизма?
- •Перечислите основные этапы приготовления фиксированного окрашенного препарата.
- •Какие признаки учитывают при идентификации микроорганизмов. Какие признаки являются основными при дифференциации бактерий?
- •Как провести дифференциацию кокковых форм бактерий по их взаимному расположению?
- •Каким образом можно провести дифференциацию палочковидных бактерий по их внешнему виду?
- •Каково назначение сложных методов окраски бактерий? Какие сложные методы окраски бактерий Вам известны?
- •Для чего используются дифференциальные (специальные) методы окраски бактерий? Привести примеры.
- •В чем заключается сущность метода окраски бактерий по Граму?
- •Каким образом проводят окрашивание фиксированных препаратов бактерий по методу Грама?
- •Что такое питательные среды? Какие требования предъявляются к питательным средам?
- •Каким образом готовятся плотные питательные среды и для чего они используются?
- •На какие группы делятся питательные среды по происхождению и составу?
- •Что такое синтетические среды и в каких случаях они применяются?
- •Для каких целей используются универсальные, избирательные и дифференциально-диагностические среды?
- •Что такое стерилизация? Какие методы стерилизации Вам известны? Какими способами можно стерилизовать посуду?
- •Какими из известных Вам способов можно стерилизовать питательные среды?
- •Как готовятся питательные среды и посуда для стерилизации?
- •Каково устройство и принцип работы парового стерилизатора?
- •Что такое «чистые культуры» микроорганизмов и для чего их выделяют из объектов окружающей среды?
- •Каким образом создаются элективные условия при выделении накопительных культур микроорганизмов? Какие микроорганизмы можно выделить методом нагревания?
- •По каким признакам описывают культуральные свойства микроорганизмов, выросших на плотных средах в чашках Петри?
- •Перечислите основные этапы пересева микроорганизмов из пробирки в пробирку.
- •Спиртовое брожение, возбудители.
- •Молочнокислое брожение, возбудители.
- •Маслянокислое брожение, возбудители.
Для каких целей используются универсальные, избирательные и дифференциально-диагностические среды?
По назначению среды делятся на универсальные (основные), избирательные (накопительные, элективные) и дифференциально-диагностические.
Универсальные (основные) среды
Используются для выращивания многих видов микроорганизмов.
Примеры: мясопептонный агар и бульон (МПА, МПБ), среда для определения КМАФАнМ, картофельная среда.
Для грибов и дрожжей: неохмеленное пивное сусло, сусло-агар (СА), среда Сабуро.
Избирательные (накопительные, элективные) среды
Предназначены для выделения микроорганизмов из мест их естественного обитания.
Обеспечивают преимущественное развитие определённой группы микроорганизмов.
Примеры: жидкие среды Кесслера (для бактерий группы кишечной палочки), Мюллера и Кауфмана (для сальмонелл).
Плотные среды: молочно-солевой агар (МСА), желточно-солевой агар (ЖСА), кровяной агар, агар с гидролизованным молоком и мелом.
Дифференциально-диагностические (индикаторные) среды
Используются для определения видовой принадлежности микроба на основе особенностей его обмена веществ.
Пример: плотная среда Эндо (для определения бактерий группы кишечной палочки).
Что такое стерилизация? Какие методы стерилизации Вам известны? Какими способами можно стерилизовать посуду?
Стерилиза́ция — полное уничтожение микроорганизмов (включая бактерии, грибы и вирусы) и их спор на различных изделиях, поверхностях и препаратах.
Виды стерилизации
Стерилизация кипячением
Используется стерилизатор с дистиллированной водой.
Стеклянные предметы погружают в холодную воду, металлические – в горячую с гидрокарбонатом натрия.
Кипячение на слабом огне 30-60 минут.
Инструменты берут стерильным пинцетом.
Стерилизация сухим жаром
Печь Пастера.
Материал кладут на полки, не соприкасаясь со стенками.
Температура: 150°С – 2 ч, 160°С – 1,5 ч, 180°С – 1 ч.
Охлаждение до полного остывания.
Стерилизация паром под давлением
Автоклав с водопаровой и стерилизационной камерами.
Давление и температура регулируются манометром и клапанами.
Стерилизация при давлении 1,5 атм. – 60 минут, 2 атм. – 90 минут.
Тиндализация
Дробная стерилизация при температуре ниже 100°С.
Прогревание в водяной бане при 60-65°С (5 дней) или 70-80°С (3 дня).
В промежутках материал выдерживают при 25°С для прорастания спор.
Механическая стерилизация
- Бактериальные ультрафильтры для освобождения жидкости от бактерий.
- Материалы: каолин, асбест, нитроцеллюлоза.
Стерилизация материалов
Стерилизация посуды
Сухой жар: 180°С – 1 ч, 160°С – 150 минут.
Автоклав: 1,5 атм. – 60 минут, 2 атм. – 90 минут.
Охлаждение до 80°С перед выгрузкой.
Стерилизация бумаги, марли и ваты
Сухожаровая печь: 160°С – 1 ч.
Автоклав: 1 атм. – 30 минут.
Материалы заворачивают в плотную бумагу.
Стерилизация резиновых изделий
Кипячение в 2% растворе гидрокарбоната натрия или текучим паром – 30 минут.
Автоклав: 1,5-2 атм. – 30 или 20 минут.
Перчатки пересыпают тальком и заворачивают в марлю.
Стерилизация патогенных культур микробов
Автоклав: 1 атм. – 30 минут.
Режим стерилизации регистрируется в журнале.
Стерилизация газообразными веществами
Используются оксид этилена, метилбромид, оксид пропилена и др.
Газовая стерилизация в герметичных аппаратах.