- •Вопросы к коллоквиуму по микробиологии
- •Устройство микробиологической лаборатории.
- •Правила работы в микробиологической лаборатории.
- •Устройство биологического микроскопа.
- •Правила работы с микроскопом.
- •Окончание микроскопирования
- •Какие особенности устройства и принципы работы темнопольного, фазово-контрастного, люминесцентного и электронного микроскопов?
- •Как проводится отбор проб чистой культуры микроорганизма?
- •Перечислите основные этапы приготовления фиксированного окрашенного препарата.
- •Какие признаки учитывают при идентификации микроорганизмов. Какие признаки являются основными при дифференциации бактерий?
- •Как провести дифференциацию кокковых форм бактерий по их взаимному расположению?
- •Каким образом можно провести дифференциацию палочковидных бактерий по их внешнему виду?
- •Каково назначение сложных методов окраски бактерий? Какие сложные методы окраски бактерий Вам известны?
- •Для чего используются дифференциальные (специальные) методы окраски бактерий? Привести примеры.
- •В чем заключается сущность метода окраски бактерий по Граму?
- •Каким образом проводят окрашивание фиксированных препаратов бактерий по методу Грама?
- •Что такое питательные среды? Какие требования предъявляются к питательным средам?
- •Каким образом готовятся плотные питательные среды и для чего они используются?
- •На какие группы делятся питательные среды по происхождению и составу?
- •Что такое синтетические среды и в каких случаях они применяются?
- •Для каких целей используются универсальные, избирательные и дифференциально-диагностические среды?
- •Что такое стерилизация? Какие методы стерилизации Вам известны? Какими способами можно стерилизовать посуду?
- •Какими из известных Вам способов можно стерилизовать питательные среды?
- •Как готовятся питательные среды и посуда для стерилизации?
- •Каково устройство и принцип работы парового стерилизатора?
- •Что такое «чистые культуры» микроорганизмов и для чего их выделяют из объектов окружающей среды?
- •Каким образом создаются элективные условия при выделении накопительных культур микроорганизмов? Какие микроорганизмы можно выделить методом нагревания?
- •По каким признакам описывают культуральные свойства микроорганизмов, выросших на плотных средах в чашках Петри?
- •Перечислите основные этапы пересева микроорганизмов из пробирки в пробирку.
- •Спиртовое брожение, возбудители.
- •Молочнокислое брожение, возбудители.
- •Маслянокислое брожение, возбудители.
Устройство биологического микроскопа.
Микроскоп – это оптический прибор, состоящий из трёх основных частей: механической, оптической и осветительной.
Основные характеристики
Общее увеличение: не характеризует качество изображения.
Разрешающая способность: даёт раздельное изображение двух близких точек. Лучший световой микроскоп улучшает разрешающую способность человеческого глаза примерно в 500 раз (до 0,2 мкм).
Механическая часть
Штатив: ножка, основание, тубусодержатель, предметный столик, монокулярная насадка (тубус), револьверное устройство, рукоятки грубой и тонкой фокусировки.
Тубус: сверху вставлен окуляр, снизу снабжён револьвером для объективов.
Предметный столик: для размещения препарата, с зажимами и отверстием для света.
Фокусировка: рукоятки грубой и тонкой фокусировки для перемещения тубуса.
Оптическая часть
Окуляры: две линзы (верхняя и нижняя), обозначаются по увеличению (5х, 7х, 10х, 12х, 15х).
Объективы: система линз, передняя линза даёт увеличение, остальные корректируют изображение. Объективы бывают сухие и иммерсионные.
Осветительная часть
Конденсор: система линз для лучшего освещения препарата.
Ирис-диафрагма: регулирует поток света.
Патрон с лампой: низковольтная лампочка накаливания, питающаяся через понижающий трансформатор.
Примечания
Общее увеличение микроскопа: произведение увеличения объектива на увеличение окуляра.
Иммерсионные объективы: используют масло для улучшения изображения.
Правила работы с микроскопом.
Работать с микроскопом следует сидя.
Микроскоп осмотреть, вытереть от пыли мягкой салфеткой объективы, окуляр, зеркало или электроосветитель.
Микроскоп установить перед собой, немного слева на 2-3 см от края стола. Во время работы его не сдвигать.
Поднимите до упора конденсор, поднимите тубус.
Установите объектив малого увеличения (8х).
Вращая зеркало, отрегулируйте освещение так, чтобы все поле зрения было освещено равномерно и ярко.
На приготовленный и окрашенный мазок нанесите небольшую каплю иммерсионного масла.
Поместите препарат на предметный столик микроскоп.
Окрашенные препараты рассматривают только с иммерсионным объективом (ОИ 100х). Поворачивая револьвер, установите объектив ОИ 100х (объектив с большим увеличением).
Осторожно опустите объектив с помощью макровинта до соприкосновения с маслом.
Наблюдая в окуляр, проведите грубую фокусировку макровинтом.
Окончательную фокусировку произведите с помощью микровинта (вращение микровинта допускается в пределах одного оборота).
Вовремя микроскопирования правой рукой производите вращение микровинта, левой – передвижение препарата.
Окончание микроскопирования
Приподнимите тубус, снимите препарат.
Вытрите масло с объектива чистой тряпочкой.
Опустите конденсор.
Переведите револьвер в нейтральное положение.
Опустите тубус до упора.
Поставьте микроскоп в шкаф
Какие особенности устройства и принципы работы темнопольного, фазово-контрастного, люминесцентного и электронного микроскопов?
Микроскопия в темном поле
Используется для исследования малых и слабоконтрастных живых объектов.
Специальный конденсор темного поля затемняет центральный пучок световых лучей.
Объект освещается лучами под углом, становясь видимым как светящаяся точка на темном фоне.
Увеличивает разрешающую способность объектива примерно в 10 раз.
Фазово-контрастная микроскопия
Позволяет изучать живые объекты без окраски и фиксирования.
Преобразует фазовые изменения световых волн в амплитудные, улучшая контрастность.
Изучает структуры клеток: жгутики, оболочки бактерий, ядра и митохондрии.
Люминесцентная микроскопия
Изучает клетки в живом виде, выявляет мембранные структуры.
Использует явление люминесценции, где молекулы поглощают свет и испускают его с другой длиной волны.
Усиливается предварительным окрашиванием препаратов флуорохромами.
Электронная микроскопия
Разрешающая способность оптических микроскопов около 0,2 мкм.
Использует поток электронов вместо световых лучей, увеличивая разрешение в 100 и более раз.
Электроны движутся в безвоздушном пространстве и отклоняются в магнитном поле.
Позволяет наблюдать вирусы, фаги, микоплазмы и строение клеток.
Препараты готовят в виде тонких срезов или пленок.
