Паспорт штамма микроорганизма

(BORDETELLA PERTUSSIS)

1. Родовое и видовое название культуры: Bordetella pertussis впервые выделена в 1906 году бактериологами из Бельгии и Франции Ж. Борде и О. Жангу, благодаря которым она и получила свое название. Заболевание коклюш.

2. Номер или наименование штамма: Bordetella pertussis 211-03.

3.Родословная штамма:

Домен: Bacteria

Тип: Протеобактерии

Класс: Бета-протеобактерии

Порядок: Burkholderiales

Семейство: Alcaligenaceae

Род: Бордетеллы

Вид: Bordetella pertussis

4. Способ получения штамма: Ученые обнаружили данный микроорганизм в мокроте больного ребенка и выделили чистую культуру.

5. Культурально-морфологические признаки штамма: Грамотрицательные коккобактерии - мелкие типичные палочки овоидной формы, располагающиеся в мазках отдельно или парами, образующие на среде Борде-Жангу с добавлением 20-25% дефибринированной крови человека мелкие колонии, диаметром 0,5-1,0 мм, круглые, выпуклые, с ровными краями, блестящие (с характерным «жемчужным» блеском), полупрозрачные, сероватого цвета, в тонком слое среды (1,5-2 мм) окружены нередко ограниченной зоной гемолиза.

6. Условия культивирования штамма: Для культивирования Bordetella pertussis используют жидкую синтетическую питательную среду, содержащую аминокислоты (цистеин, глутаминовую кислоту, пролин), соли (КН2РО4; KCl, MgSO4; CaCl2; NaCl) и витамины (аскорбиновая и никотиновая кислоты). Культивируют в статических условиях в течение 70-122 часов при температуре (36±1) °C.

Классической средой для первичного выделения В. pertussis является среда Борде-Жангу (картофельно-глицериновый агар), позднее были предложены синтетические и полусинтетические среды, в частности, казеиново-угольный агар (КУА). На указанных средах бордетеллы вырастают в виде характерных колоний: на среде Борде-Жангу - выпуклые, гладкие, блестящие, серебряного цвета, напоминающие капли ртути, окруженные зоной гемолиза; на КУА - выпуклые, гладкие, серого цвета с жемчужным, желтоватым или беловатым оттенком. Колонии маслянистые, легко снимаются петлей.

7. Дифференциально-диагностическая среда: КУА (казеиново-угольный агар). Селективная среда с соляно-кислым гидролизатом казеина глубокой степени расщепления для выделения и культивирования Bordetella pertussis из инфицированного материала бактериологическим посевом в санитарной и клинической микробиологии. Уголь адсорбирует токсические вещества, образующиеся в процессе длительного инкубирования. Результат определяют визуально по наличию выпуклых, гладких, круглых с ровными краями, блестящих (в виде «жемчужин») колоний серовато-кремового цвета, диаметром 0,5-1,0 мм.

Состав (г/л):

Кислотный гидролизат казеина 28,62

Экстракт хлебопекарных дрожжей 2,86

Калий фосфорнокислый однозамещенный 0,5

Медь сернокислая5-водная 0,005

Магний хлористый 0,4

Уголь активныйи5,0

Крахмал растворимый 2,0

L-цистеин гидрохлорид 0,03

Агар микробиологический (12,58±1,3)

8. Область применения: Получение из заявляемого штамма коклюшной вакцины

9. Условия хранения штамма: После восстановления культуру поддерживают пересевом каждые 7-10 дней на пробирках со средой Борде-Жангу с 30% крови или КУА (казеиново-угольный агар) с 5% крови. На питательных средах культуру хранят при температуре (5±3) °С не более 10 дней. Для производственных посевов используют не более 3-4 пересевов с момента восстановления культуры из высушенного состояния.

10. Ферментативные свойства: В. pertussis ферментативно малоактивны, сахаров не расщепляют, не обладают протеолитической активностью, не восстанавливают нитратов, продуцируют оксидазу, каталазоположительны, лакмусовое молоко подщелачивают за 12-14 дней