11. Генетические особенности штамма:

Устойчивость (чувствительность) к антибиотикам: устойчив к пенициллину, доксацилину, линкомицину, ампициллину, амокссоциллину, каномицину, эритромицину.

Паспорт штамма микроорганизма

(CLOSTRIDIUM TETANI)

1. Родовое и видовое название культуры (с указанием автора, впервые описавшего вид): Clostridium tetani открыта в 1883 г. русским хирургом Нестором Монастырским.

2.Родословная штамма, номер штамма в другой коллекции (если он существует)

Домен: Bacteria

Тип: Фирмикуты

Класс: Clostridia

Порядок: Clostridiales

Семейство: Clostridiaceae

Род: Clostridium

Виды: Clostridium tetani

3. Способ получения штамма (выделен из природных источников, где, когда, кем; получен селекционным путем; получен как мутант и т.п.): Возбудитель заболевания обнаружил в экссудате раны умершего от столбняка человека.

4. Культурально-морфологические особенности штамма: Облигатный анаэроб, поэтому не продуцирует ферменты, необходимые для аэробного дыхания (цитохромоксидаза, пероксидаза, каталаза). Столбнячная палочка растет при температуре от 14 до 45°С. Оптимальные условия рН 6,8-7,4, t=37°С. Грамположительная. Возбудитель столбняка может существовать в виде вегетативных клеток или спор. Вегетативная клетка С. tetani представляет собой крупную палочку с закругленными концами размером 4-8х0,3-0,8 мкм. При неблагоприятных условиях внешней среды возбудитель столбняка образует споры круглой формы, располагающиеся терминально. Диаметр споры превышает поперечник вегетативной клетки, поэтому клетка со спорой имеет вид барабанной палочки.

5. Активность (продуктивность) штамма, другие производственные показатели (если есть): С. tetani не обладает сахаролитической и протеолитической активностью. Не образует индола. Некоторые штаммы ферментируют глюкозу, медленно пептонизируют молоко и разжижают желатин с образованием газа. Обладает фибринолитической активностью.

6. Способ, условия и состав сред для культивирования штамма: В качестве жидких питательных сред для выращивания возбудителя столбняка используют среду Китта-Тароцци, бульон Мартена, среду Вейнберга. Для создания анаэробных условий среды разливают высоким столбиком, помещают в них адсорбенты кислорода (кусочки печени или мяса), сверху наносят слой вазелинового масла. Перед посевом среды дополнительно кипятят на водяной бане с целью удаления растворенного кислорода. В жидких питательных средах столбнячная палочка вызывает равномерное помутнение.

В плотные питательные среды для культивирования С. tetani добавляют

кровь, сыворотку крови, молоко, яичный желток. Для обеспечения анаэробных условий культивирование на плотных питательных средах осуществляют в анаэростатах или в герметизируемых специальных контейнерах с использованием газогенерирующих пакетов типа Gas Pack.

На поверхности агаровых сред в анаэробных условиях образуются прозрачные со стеклянным блеском сливающиеся паукообразные шероховатые колонии R-формы с отростками. На средах с кровью (кровяном агаре) выявляется зона гемолиза.

При посеве уколом в столбик агара образуются мелкие колонии, похожие на кусочки ваты. При посеве в столбик желатина – разжижение в виде «елочки».

7. Оптимальные условия и состав среды для ферментации (если есть: С. tetani обладают слабой ферментативной активностью. Углеводы не расщепляют (встречаются штаммы, расщепляющие глюкозу). Протеолитические свойства выражаются в восстановлении нитратов в нитриты, медленном свертывании молока и медленном разжижении желатина. С. tetani образует фибрилизин.

8. Генетические особенности штамма (указать имеющиеся): Хромосома C. tetani содержит 2 799 250 bp с содержанием G+C 28,6%. Плазмида pE88 74,082-bp демонстрирует удивительно низкое содержание G+C-24,5%. В геноме C. tetani удалось идентифицировать лишь несколько подвижных элементов: Присутствуют 16 генов транспозазы, которые могут быть классифицированы в четырех различных семействах последовательностей вставки. Большинство из этих генов, по-видимому, не функционируют из-за вставок, делеций и точечных мутаций, приводящих к смещению фрейма или дегенерации Орф. Вариабельность G+C в геноме очень низка; единственными областями со значительно более высоким содержанием G+C (≈50%) являются области, содержащие шесть кластеров генов рРНК и гены, кодирующие рибосомные белки. Это отсутствие флуктуации G+C указывает на то, что недавние события приобретения генов путем латерального переноса генов не имели места, и что C. tetani геном более стабилен, чем геномы энтеропатогенов.