Паспорт штамма микроорганизма

(LACTOCOCCUS CREMORIS)

1. Родовое и видовое название культуры: Lactococcus cremoris

2. Культурально-морфологические особенности: Клетки шаровидные, располагаются в виде коротких и длинных цепочек. Оптимальная температура роста 25-30 °С, при температуре 39-40 °С рост прекращается. Молоко свертывается за 6-8 ч, образуя плотный сгусток слегка вязкой или сметанообразной консистенции, что обусловлено способностью стрептококка синтезировать полисахариды. Штаммы этого вида не образуют аммиак из аргинина, не растут в средах с 4 %-м NaCl и с рН 9,5.

3. Способ получения: Источниками выделения являются сырое молоко, оборудование, самоквасные кисломолочные продукты, а также растения, корни растений, иногда почва, расположенная в зоне корневой системы.

Для выделения 1 г пробы растирают в стерильной ступке и готовят разведение 1:10 на физиологическом растворе. Полученную суспензию засевают в стерильное молоко (10 см³ в объеме 0,25-0,5 см³). Если культуру выделяют из кисломолочных продуктов, то одну каплю продукта вносят бактериологической петлей в стерильное молоко. Посевы термостатируют при 25-30°С до свертывания молока.

4. Область применения: Применяются в процессе приготовления ряда молочных продуктов. При помощи молочнокислого брожения получают творог, сметану, простоквашу, кефир, кумыс, ацидофильное молоко, различные сыры, кислосливочное масло и другие продукты.

5. Продукт, синтезируемый бактериями: Некоторые штаммы этого подвида синтезируют бактериоцин лактококцин.

6. Способ, условия и состав сред для культивирования: На обычных питательных средах они не развиваются, а растут на средах с добавлением аминокислот, гидролизатов белков мяса, лактальбумина, казеина, различных видов муки.

Состав среды(г/л):

Снятое молоко 10,00

Пептонизированное молоко 2,50

Глюкоза 5,00

Агар-агар 15,00

Конечное значение рН (при 25°С) 6,6 ± 0,2

Размешать 32,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 0,7 атм (115°С) в течение 12 мин. Остудить до 45°С и асептично добавить 10 мл стерилизованного 30 минут в струе пара 10%-ного раствора железосинеродистого калия и 10 мл раствора, содержащего 0,25 г цитрата железа и 0,25 г цитрата натрия. Осторожно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри. Подсушить чашки в течение 24 ч при 30°С.

7. Оптимальные условия и состав среды для ферментации: Культивирование проводят в культуральной среде при аэрации. Промышленные ферментации проводят с использованием комплексных сред ферментации нестрого определенного состава. Основными компонентами таких сред могут быть экстракт дрожжей, кукурузный крахмал, сывороточный белок или другие среды, основанные на молоке, которые все имеют сложный состав.

Паспорт штамма микроорганизма

(LACTOBACILLUS BULGARIS)

1. Родовое и видовое название культуры: Lactobacillus bulgaris впервые была выделена в 1903 г. в лаборатории И. И. Мечникова Коанди из болгарского молочнокислого пищевого продукта йогурта.

2. Культурально-морфологические особенности: Длинные и короткие палочки размером 5-20 x 0,8-1,0 мкм, грамположительные, спор не образуют. Факультативные анаэробы. Колонии на агаризованных средах диаметром 2-5 мм, выпуклые, с цельным краем, непрозрачные, непигментированные. Хемоорганотрофы, метаболизм бродильного типа, нитрат не восстанавливают, желатин не разжижают, каталазоотрицательные. Оптимальная температура для роста 30-40 ^оС. Чувствителен к стрептомицину, ампициллину, цефалотину, гентамицину, линкомицину, полимиксину, пенициллину-G, тетрациклину, эритромицину, налидиксовой кислоте, ванкомицину, имипенему, промежуточно-устойчив к канамицину, устойчив к хлорамфениколу (левомицетину) и ципрофлоксацину.

3. Способ получения: Встречаются в продуктах животного и растительного происхождения, входят в нормальную микрофлору пищеварительного тракта у птиц и млекопитающих и влагалища млекопитающих.

4. Область применения: Входят в состав заквасок для производства йогурта, простокваш южной, болгарской, мечниковской.

5. Продукт, синтезируемый бактериями: Молочную кислота (85% и более) и крайне небольшие количества фумаровой и янтарной, летучих кислот, этилового спирта и углекислого газа.

6. Способ, условия и состав сред для длительного хранения: При хранении при +4 °С культуры нуждаются в частых пересевах (не реже 1 раза в месяц). Для хранения при -86 °С необходимо посеять бактерии на жидкую среду, инкубировать 24-48 ч при 37 °С, отобрать часть культуры и смешать 1:1 с 50% раствором глицерина. Заморозить в жидком азоте, после размораживая, поместить образец в низкотемпературный холодильник, снабдив этикеткой, на которой указать штамм и дату.

7. Способ, условия и состав сред для культивирования: Оптимальная температура культивирования 40-45 °С. В качестве сред используются обезжиренное молоко.

Глюкозо-пептонная среда (ГПС): на 1000 мл водопроводной воды (г): пептон – 5, глюкоза – 10, NaCl – 5. Для получения плотной среды – глюкозо-пептонного агара (ГПА) добавить 20 г агара.

Среда Лоурия-Бертони (LB): на 1000 мл дистиллированной воды (г): триптон – 10, дрожжевой экстракт – 5, NaCl – 5.

Для получения плотной среды – LA (11) - добавить 20 г агара. Компоненты растворить в воде, довести pH 8.5, проавтоклавировать при 1 атм. в течение 20-30 мин.

Среду L.S. (Lactobacillus-Streptococcus) используют для обильного роста и дифференциации лактобактерий.

На обычных мясо-пептонных средах Б. п. не растет, что используется для определения чистоты культуры. Для культивирования Б. п. наиболее подходящими являются мясо-пептонные среды с добавлением сыворотки крови животных, молочной сыворотки, глюкозы или дрожжевого экстракта. На поверхности плотных питательных сред образует волокнистые колонии, в глубине среды растет в виде комочков ваты. Некоторые штаммы Б. п. на плотной среде могут образовывать слизь.

8. Оптимальные условия и состав среды для ферментации: Ферментирует глюкозу, фруктозу, лактозу, мочевину, замедленно ферментирует рамнозу, целлобиозу, ксилозу, D-арабинозу. Температура ферментации 38-42 ^оС, время 3,5 – 10 ч, pH < 4.