Гистология как наука

Предмет и разделы гистологии

Гистология – наука о микроскопическом строении развитии, функциях, и жизнедеятельности клеток и тканей живого организма.

Предмет гистологии – ткани и клетки живого организма, их развитие, функции и жизнедеятельность.

Разделы гистологии:

1. Цитология

2. Эмбриология

3. Частная гистология

4. Общая гистология

Объекты исследования в гистологии — гистологические препараты. Их готовят из живых или мёртвых (фиксированных) структур.

Гистологические препараты могут представлять собой:

• взвесь клеток (например, клеток крови);

• мазок (например, костного мозга);

• отпечаток (например, печени, селезёнки);

• общий препарат органа (например, мягкая мозговая оболочка);

• тонкий срез ткани или органа.

Классический объект исследования в гистологии — фиксированный и окрашенный срез ткани или органа.

Задачи гистологии:

• изучение структур на системном, органом, клеточном и молекулярном уровнях;

• изучение физиологии структур всех уровней;

• изучение закономерностей дифференцировки и регенерации;

• изучение возрастных особенностей тканей и клеточных структур, включая закономерности эмбриогенеза;

• изучение закономерностей адаптации структур всех уровней, в первую очередь связанных с проблемами экологии;

• изучение закономерности нервной, эндокринной, иммунной регуляции.

Гистология тесно связана с другими науками, прежде всего с медицинскими и биологическими: анатомией, физиологией, биохимией, биофизикой, генетикой и др. Знание нормального строение и функции всех частей тела человека на органном, тканевом, клеточном и субклеточном уровнях необходимы для глубокого понимания изменений, происходящих в организме больного человека. На этом фундаменте строится понимание патологической анатомии и патфизиологии.

Методы изучения гистологии и окрашивание препаратов

I. Основным методом изучения в гистологии является световая микроскопия.

Разновидности световой микроскопии:

• фазово-контрастный микроскоп (для изучения живых неокрашенных объектов)

• темнопольный микроскоп (для изучения живых неокрашенных объектов)

• люминесцентный микроскоп (для изучения живых неокрашенных объектов)

• ультрафиолетовый микроскоп (повышает разрешающую способность микроскопа)

• поляризационный микроскоп (для исследования объектов с упорядоченным расположениеммолекул - скелетная мускулатура, коллагеновые волокна и т.д.)

• интерференционная микроскопия (для определения сухого остатка в клетках, определение толщины объектов)

Более современный метод — электронная микроскопия. Вместо луча света используется пучок электронов. Он проходит через образец биоматериала, затем обрабатывается и преобразуется в изображение. Благодаря электронному микроскопу можно рассмотреть мельчайшие детали клеток, которые не видны в обычном световом приборе, и изучать процессы, происходящие в живой клетке.

II. Немикроскопические методы:

• Цито- и гистохимический метод. Заключается в использовании строгоспецифических химических реакций в клетках и тканях с цветным конечным продуктом для выявления наличия различных веществ (белков, ферментов, жиров, углеводов и т. д.).

• Цитофотометрия. Применяется для оценки результатов цито- и гистохимических реакций и даёт возможность определить количество выявленных веществ в клетках и тканях (белков, ферментов и т. д.).

• Авторадиография. В организм вводят вещества, содержащие радиоактивные изотопы химических элементов. Эти вещества включаются в обменные процессы в клетках. Локализацию и дальнейшие перемещения этих веществ в органах определяют на гистопрепаратах по излучению, которое улавливается фотоэмульсией, нанесённой на препарат.

• Рентгеноструктурный анализ. Позволяет по спектру поглощения рентгеновских лучей определить количество химических элементов в клетках, изучить молекулярную структуру биологических микрообъектов.

Окрашивание препаратов производится различными красителями.

Базофильными называются структуры, которые окрашиваются основными красителями (гематоксилин, тионин, кармин, метиловый зелёный), т.к. содержат в себе аминокислоты, кислотные остатки и т.д. Например, базофильными являются ядрышко, хроматин и т.д.

Оксифильными называются структуры, способные окрашиваться кислыми красителями (эозин, орандж G, фуксин, пикрииновая кислота), из-за сдержания щелочных веществ. Например, часто оксифильно окрашивается цитоплазма из-за большого содержания в ней белков.

Метахромазия – явление, когда структуры имеют искажённую окраску из-за каких-то заболеваний или нарушений.

Полихромазия – когда одна структура может окрашиваться сразу в несколько цветов. Часто встречается у эритроцитов при повышенном гемолизе, гемолитических анемиях, кровотечениях, в норме может встречаться у детей до 1,5 месяцев. Показатель повышенной регенерации костного мозга, высвобождение большого количества молодых эритроцитов.

Методика приготовления гистологического препарата

Приготовление препарата производится поэтапно:

1. Взятие небольшого кусочка ткани

2. Фиксация формалином

3. Дегидратация спиртами возрастающей концентрации (70-100%)

4. Заливка в парафин

5. Изготовление парафиновых блоков

6. Нарезка на микротоме (3-5 микрон)

7. Монтаж препарата на предметное стекло

8. Депарафинирование ксилолом

9. Батарея спиртов нисходящей концентрации

10. Окрашивание полученного препарата

11. Батарея спиртов восходящих концентраций

12. Заключение в консервирующую среду.