Ебучие методы

6. Методика количественного подсчета эритроцитов и лейкоцитов в крови взрослого человека. Количественные показатели.

(а) Подсчет эритроцитов.

Кровь разводят в 200 раз, используя 3% раствор NaCl. Подсчёт клеток проводят в камере Горяева, где объём разбавленной крови над одним маленьким квадратом составляет

1/20*1/20*1/10 = 1/4000 мм3 (или мкл).

При большом увеличении микроскопа считают количество клеток в 80 маленьких квадратах. В каждом квадрате считают клетки, находящиеся внутри квадрата, а также клетки, попавшие на верхнюю и левую его стороны.

Формула для расчета количества эритроцитов в 1 мкл: Кол-во клеток в 80 мал кв.*200*4000/80

Нормальный показатель – 4-5 млн в мкл (или 4-5*1012 в литре) (б) Подсчёт лейкоцитов.

Кровь разводят в 20 раз раствором уксусной кислоты (для гемолиза клеток) с добавлением метиленовой сини (для окрашивания ядер лейкоцитов). Подсчёт проводят под малым увеличением микроскопа в 25 больших квадрат, что составляет 400 малых квадратиков. Формула для расчёта количества лейкоцитов в 1 мкл:

Кол-во клеток в 400 мал.кв.*20*4000/400

Нормальный показатель – 6-9 тыс в мкл (или 6-9*109 в литре)

7. Метод определения содержания гемоглобина

Определение проводится колориметрическим способом: путём сравнения цвета исследуемого раствора с цветом стандартных образцов («колор» – цвет).

(а) способ Сали (с использованием гемометра Сали): кровь смешивается с небольшим количеством HCl, в результате чего происходит гемолиз и образование солянокислого гематина тёмно-коричневого цвета. Добавлением дистиллированной воды цвет исследуемого раствора доводят до цвета стандартного образца, который находится в гемометре в запаянной пробирке. Пробирка с исследуемой кровью градуирована в единицах содержания гемоглобина в крови. Нормальный показатель для женщин 120-140 г/л, для мужчин – 130-160 г/л.

(б) фотоэлектроколориметрический способ: образец исследуемой крови, смешанный со специальным реактивом, помещается между источником света и фотоэлементом. Чем больше гемоглобина в растворе, тем меньше света попадает на фотоэлемент и меньший по величине фототок в нём возникает. Прибор предварительно калиброван с помощью стандартного образца.

8.Опыт, доказывающий наличие буферных систем в плазме крови (Опыт Фриденталя)

Сыворотка крови – это плазма, лишенная фибриногена. Она содержит те же буферные системы, что и плазма. Исследование заключается в том, чтобы выявить буферные свойства сыворотки и оценить её способность нейтрализовать кислоты и щелочи. Для этого в стаканчик с сывороткой и в стаканчик с таким же объёмом дистиллированной воды (для сравнения) добавляют раствор HCl до изменения цвета индикатора (метилоранж). Оказывается, к сыворотке нужно добавить в 300-400 раз больше кислоты, чем к дистиллированной воде. Затем другую пару растворов – сыворотку и дистиллированную воду – титруют щелочью до изменения цвета индикатора (фенолфталеин). Чтобы сделать реакцию раствора щелочной, к сыворотке нужно добавить щелочи в 50-70 раз больше, чем к воде. Сравнивают полученные результаты, чтобы убедиться, что буферная ёмкость сыворотки для нейтрализации кислот оказывается гораздо большей, чем для нейтрализации щелочей. Объясните, почему.

9.Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Диагностическое значение.

При стоянии стабилизированной крови эритроциты оседают, т.к. их плотность больше, чем плотность плазмы.

В норме СОЭ = 4-10 мм/час Для определения СОЭ к крови пациента добавляют цитрат натрия в соотношении 1:4 (для

предотвращения свёртывания). Цитратную кровь набирают в градуированный стеклянный капилляр и оставляют на 1 час в строго вертикальном положении.

СОЭ зависит от многих причин, в частности, от соотношения белков плазмы (альбуминоглобулиновый индекс). Крупнодисперсные белки (глогбулины, фибриноген) увеличивают

СОЭ (так как способствуют агрегации эритроцитов, образованию «монетных столбиков»). Мелкодисперсные белки (альбумины) уменьшают СОЭ, способствуют стабилизации крови как суспензии (взвеси отдельных форменных элементов в плазме).

10.Определение гематокрита. Факторы, влияющие на его величину.

Гематокрит – отношение объема эритроцитов к объему жидкой части крови.

Уровень гематокрита зависит от пола, возраста, физиологического состояния организма, воздействия факторов окружающей среды. Немаловажное значение имеет количество эритроцитов и их объем.

11.Метод определения времени свертывания крови. Диагностическое значение.

(а) Определение времени остановки кровотечения.

Этот показатель характеризует состояние первичного (сосудисто-тромбоцитарного) гемостаза. Используется видоизмененный метод Дюке: после неглубокого прокола пальца через каждые 20-30 сек промокают каплю выступившей крови с помощью фильтровальной бумаги до полной остановки кровотечения. Нормальный показатель – 1-3 минуты.

(б) Определение времени свёртывания крови.

Этот показатель характеризует состояние вторичного (коагуляционного) гемостаза. Используется метод Сухарева: в среднюю часть стеклянного капилляра помещают столбик крови и, периодически наклоняя капилляр, отмечают время до того момента, когда кровь перестанет перетекать по капилляру. Нормальный показатель – 5-10 минут (зависит от температуры воздуха в лаборатории).

12. Метод определения времени остановки кровотечения. Диагностическое значение Нарисовать кривую диссоциации оксигемоглобина, объяснить и перечислить факторы, на нее влияющие.

Кривая характеризует степень насыщения гемоглобина кислородом, которая зависит от РО2 и уровня метаболизма в тканях. Максимальный показатель – 100% – не зависит от количества гемоглобина.

Сдвиг вправо отражает низкое сродство гемоглобина к кислороду в капиллярах функционирующих тканей. Сдвиг влево отражает высокое сродство гемоглобина к кислороду в тканях с низкой функциональной активностью. + вопрос 11

13. Количественная характеристика дыхательных объёмов и дыхательных емкостей. Нарисовать схематически спирограмму и обозначить.

Дыхательный объем (ДО) - объем воздуха, который вдыхается и выдыхается за каждый дыхательный акт.

Частота дыхания (ЧД) - число дыхательных движений в 1 мин.

Минутный объем дыхания (МОД) – объем, который вентилируется через легкие за 1 мин МОД = ДО × ЧД.

Резервный объем вдоха - максимально возможный объем, который можно дополнительно довдохнуть после спокойного вдоха.

Резервный объем выдоха - максимального возможный объем, который можно дополнительно выдохнуть после спокойного выдоха. Он составляет около 1,5 л.

Жизненная емкость легких (ЖЕЛ) – максимально возможный объем, который можно выдохнуть после максимально глубокого вдоха, или максимальный объем, который можно вдохнуть после максимально глубокого выдоха. ЖЕЛ = РОвд + ДО + РОвыд Остаточный объем легких (ООЛ) - объем воздуха, остающийся в легких после максимально глубокого выдоха.

Функциональная остаточная емкость легких (ФОЕ) - объем воздуха в легких на глубине спокойного выдоха. ФОЕ = РОвыд + ООЛ Емкость вдоха – максимальный объем, который можно вдохнуть после спокойного выдоха. Евд = ДО+РОвд

Общая емкость легких (ОЕЛ) - объем воздуха в легких на глубине максимально глубокого вдоха. ОЕЛ =ЖЕЛ +ООЛ = ФОЕ +Евд.

14. Показатели вентиляции легких: минутный объем дыхания, альвеолярная вентиляция, максимальная вентиляция легких. В чем различие между понятиями легочной и альвеолярной вентиляцией.

Показатели вентиляции:

1.Минутный объём дыхания (МОД) – объём воздуха, проходящий через лёгкие за минуту (в покое 6-8 литров).

2.Максимальная вентиляция лёгких – тот объём воздуха, который мог бы пройти через лёгкие за минуту при максимально интенсивном (частом и глубоком) дыхании.

3.Альвеолярная вентиляция – часть минутного объёма дыхания, достигающая альвеол. МВЛ отражает максимальные резервы дыхательной системы, которые никогда не используются: МВЛ может достигать 180 л/мин, а МОД даже при самой интенсивной нагрузке не превышает 100 л/мин. Чтобы рассчитать МВЛ, человека просят дышать максимально интенсивно в течение 10 с и полученный объем воздуха перерассчитывают на 1 мин.

МОД всегда больше АВ, так как часть МОД идет на вентиляцию мертвого пространства. Динамические показатели связаны со статическими, а именно с дыхательным объемом и объемом мертвого пространства, через частоту дыханий:

МОД = ДО * ЧД АВ = (ДО - ОМП) * ЧД

15. Количественные показатели парциальных давлений О2 и СО2 в альвеолярной газовой смеси и во вдыхаемом и выдыхаемом воздухе.

(а) процентный состав газовых смесей:

16.Содержание и парциальное давление О2 и СО2 в артериальной и венозной крови.

В оксигенированной артериальной крови напряжение СО2 составляет 40 мм. рт. ст., а в венозной крови Рv СО2 равно 46 мм. рт.

В соответствии с кривой диссоциации оксигемоглобина насыщение артериальной крови кислородом в среднем составляет 97%, в венозной крови – 75%.

17.Формы переноса кислорода кровью. Содержание О2 в крови. Кислородная

емкость крови, коэффициент утилизации.

Кислород транспортируется в двух видах: в виде оксигемоглобина (19-20 мл на 100 мл крови), в растворённом виде в плазме (0,3 мл на 100 мл крови).

Гемоглобин – хромопептид, состоящий из белка глобина и четырёх молекул гема. Гемоглобин способен свободно и обратимо связывать молекулу О2 при помощи координационных связей. Образовавшееся соединение носит название оксигемоглобин. Оксисгемоглобин транспортируется кровью к тканям, где происходит его расщепление и отдача О2 тканям.

Кислородной ёмкостью крови называют максимальное количество кислорода, которое может связать кровь при полном насыщении гемоглобина кислородом. Одна молекула гемоглобина может присоединять четыре молекулы О2.

Для характеристики потребления кислорода тканями вводят коэффициент утилизации кислорода (измеряется в %). КУК – количество потреблённого кислорода от общего содержания его в артериальной крови:

При тяжёлой мышечной работе КУК может возрасти до 60%.

18. Представление о пульсоксиметрии. Цифровые показатели

(б) Пульсоксиметрия – современный метод определения степени насыщения гемоглобина кислородом (%HbO2). Пульсоксиметрический датчик состоит из двух светодиодов, излучающих красные и инфракрасные волны, и фотоприёмник, который улавливает излучение, оставшееся после поглощения его тканями. Процессор выделяет только тот спектр излучения, который остаётся после поглощения лучей артериальной кровью (по наличию пульсаций!)

На экране пульсоксиметра: показатель сатурации (97%). ЧСС (71 в мин) и кривая пульса

Портативный пульсоксиметр для использования в «полевых условиях» (внутренний датчик – вмонтирован в прибор)

19. Индекс Тиффно, его определение и значение.

(в) Индекс Тиффно – применяется для оценки бронхиальной проходимости.

Исследование проводится с помощью спирографа. Определяется объём форсированного выдоха за 1-ую секунду (ОФВ1). Для этого во время записи спирограммы пациент должен сделать максимально глубокий вдох, задержать дыхание на вдохе – затем максимально быстро и как можно глубже выдохнуть. Весь объём выдохнутого таким образом воздуха называется форсированной жизненной ёмкостью лёгких (ФЖЕЛ).

Индекс Тиффно = ОФВ1 / ФЖЕЛ В норме индекс = 0,75 (или 75%)

20. Кривая связывания кислорода гемоглобином крови и факторы на нее влияющие

Кривая отражает содержание в артериальной крови кислорода, связанного с гемоглобином, и кислорода, растворённого в плазме. Поскольку растворимость кислорода низкая, его абсолютное содержание зависит от количества гемоглобина и его способности связывать кислород.

21.Методы спирометрии и спирографии (нарисовать график с указанием должных объемов и емкостей).

По сути, спирография и спирометрия – одно и то же. Единственная разница между этими понятиями заключается в том, что спирометрией можно назвать сам процесс выполнения исследования, а при спирографии его результат выдается в виде графика, точно описывающего функцию легких. Сегодня эти понятия идентичны и взаимозаменяемы. Спирометрия необходима для выявления характера нарушений функции внешнего дыхания (ФВД) и степени нарушения ФВД. Различают обструктивный тип вентиляционных нарушений (нарушение прохождения воздуха по бронхам) (снижены ОФВ1, индекс Тиффно (ОФВ1/ЖЁЛ) и МВЛ) и рестриктивный тип (связан с уменьшением суммарной площади газообмена, или со снижением способности легочной ткани к растяжению при дыхании)

( снижены ДО, ЖЕЛ, МОД). + вопрос 13

22.Сущность непрямого метода оценки остаточного объема легких и функциональной остаточной емкости.

Обладающий известным объемом спирометр наполняют воздухом, смешанным с известным количеством гелия. До подключения к спирометру исследуемый делает нормальный выдох, после чего объем оставшегося в легких воздуха равен функциональной остаточной емкости. После выдоха исследуемый начинает дышать из спирометра. Гелий из спирометра смешивается с газами, содержащимися в функциональной остаточной емкости. В результате ее объем можно вычислить, исходя из степени разведения гелия при помощи следующей формулы.

где FRC — функциональная остаточная емкость, CiHe — начальная концентрация гелия в спирометре, CfHe — конечная концентрация гелия в спирометре, ViSpir— начальный объем спирометра.

После определения FRC можно определить остаточный объем (RV) путем вычитания из FRC измеренного при нормальной спирометрии резервного объема выдоха.

КАРДИОЛОГИЯ 1. Электрокардиограмма, определение сущность. Принцип метода

электрокардиографии. Основные изменения направления векторов электрической активности в течение сердечного цикла. + 2. Формирование зубцов ЭКГ. Амплитудновременные характеристики компонентов нормальной электрокардиограммы. + 3. Понятия моментного и среднего результирующего (интегрального) векторов при распространении волны возбуждения по сердцу. Проекции векторов на оси отведения. Электрическая ось сердца. Понятия нормограммы, правограммы, левограммы. + 4. Методика электрокардиографии. Стандартные и усиленные отведения от конечностей, грудные отведения. Значение электрокардиограммы в клинических исследованиях.

ЭКГ – запись биопотенциалов (которые возникают в сердце во время распространения возбуждения) с помощью электродов, расположенных на поверхности тела. ЭКГ помогает определить место возикновения импульса (водитель ритма) и характер распространения возбуждения по миокарду предсердий и желудочков.

ГЕНЕЗ ЗУБЦОВ:(См. схему ЭКГ): зубец Р отражает процесс деполяризации предсердий; сегмент PQ (изоэлектрическая линия) отражает время проведения через АВ-узел (атриовентрикулярная задержка); комплекс зубцов QRS отражает процесс деполяризации желудочков; сегмент ST (изоэлектрическая линия) – полное возбуждение всех кардиомиоцитов желудочков (совпадает с фазой «плато» потенциала действия); зубец Т отражает процесс реполяризации желудочков.

Отведение ЭКГ – это расположение двух электродов на поверхности тела (в определенных точках). Линия, соединяющая два электрода, называется осью отведения. Ось отведения имеет определенную полярность: один из электродов «отрицательный» (-), т.е. сигнал от него подается на отрицательный «вход» электрокардиографа, другой электрод -«положительный» (+), т.е. сигнал от него подается на положительный «вход» электрокардиографа.

При обследовании больных регстрируют как минимум 12 отведений: 3 стандартных отведения от конечностей (I, II и III); 3 усиленных отведения от конечностей (AVR, AVL, AVF) и 6 грудных отведений (V1 – V6).

Стандартные отведения от конечностей: биполярные (двухполюсные) – оба электрода активные Оси этих отведений представляют собой стороны треугольника Эйнтховена: 1 станд.отв.: правая рука (-) и левая рука (+)

II станд.отв.: правая рука (-) и левая нога (+)

III станд.отв.: левая рука (-) и левая нога (+)

Усиленные отведения от конечностей: униполярные (однополюсные) – один электрод активный другой – пассивный (индифферентный, электрод сравнения, нулевой).

AVR: активный электрод на правой руке (+); электроды двух других конечностей соединены и через дополнгительное сопротивление подают сигнал (потенциал близок нулю) на отрицательный «вход» электрокардиографа.

AVL: активный электрод на левой руке (+); электроды двух других конечностей соединены и через дополнгительное сопротивление подают сигнал (потенциал близок нулю) на отрицательный «вход» электрокардиографа.

AVF: активный электрод на левой ноге (+); электроды двух других конечностей соединены и через дополнгительное сопротивление подают сигнал (потенциал близок нулю) на отрицательный «вход» электрокардиографа.

Оси всех отведений от конечностей расположены во фронтальной плоскости. Для анализа ЭКГ их можно объединить в общую шестиосевую систему координат.

Грудные отведения: униполярные (однополюсные) – один электрод активный, расположен в определенной точке на поверхности грудной клетки (+); другой –электрод сравнения (нулевой) получен путем соединения всех трех электродов конечностей. Сигнал от него через дополнгительное сопротивление подается на отрицательный «вход» электрокардиографа.

Нормограмма: RII > RI > RIII (положение оси 30*-70*)

Правограмма: RIII > RII > RI (положение оси 70*-90*) Левограмма: RI > RII > RIII (положение оси 0 -30*)

5. Минутный объем сердца, его определение

6. Методы оценки насосной функции сердца

Нагнетательная функция сердца оценивается: 1.Ударным (систолическим) объемом крови (60-70 мл).

2. Конечно-систолическим объемом (КСО) (резервный объем) (70-80). 3.Конечно-диастолическим объемом (КДО) (140 мл).

4. Фракцией выброса – доля от конечного диастолического объёма, выбрасываемая желудочков во время каждой систолы (55-70%).

Наилучший и пока единственный метод эходопплеркардиография (ЭХОКГ) - ультразвуковое исследование сердца.

При ЭХОКГ прежде всего оценивают форму и измеряют размеры полостей и структур сердца.

ЭХОКГ позволяет оценить насосную функцию сердца. Для этого через уравнение

, где V- объем в миллилитрах, D- переднезадний размер полости левого желудочка в момент систолы и диастолы рассчитывают: конечно-диастолический объем, конечно-систолический объем, ударный объем.

7. Сущность объективного и субъективного методов исследования звуковых явлений деятельности сердца

I тон – систолический – захлопывание атриовентрикулярных клапанов

II тон – диастолический – захлопывание полулунных клапанов (аортального и пульмонального)

III тон – диастолический – при быстром пассивном наполнении желудочков

IV тон – диастолический – при быстром активном наполнении желудочков (происходит во время систолы предсердий)

Эмпирически найдены четыре точки для наилучшего выслушивания отдельных клапанов:

(1) двустворчатый (митральный) клапан выслушивается в 5-ом межреберье слева чуть кнутри от среднеключичной линии; (2) трёх-створчатый клапан выслушивается у места прикрепления мечевидного отростка к грудине; (3) аортальный клапан выслушивается во втором межреберье справа у края грудины; (4) клапан лёгочной артерии выслушивается во

втором межреберье слева у края грудины. III тон и IV тон при аускультации, как правило, не слышны.

Фонокардиография (ФКГ) – запись тонов сердца с помощью микрофона, установленного на грудной клетке. Обычно записывается одновременно с ЭКГ, что позволяет точно определить, какой тон первый, а какой - второй.

8. Сопоставление кривых давления в левом желудочке, давления в аорте, объема левого желудочка, ЭКГ и фонокардиограммы.

9. Представление о сфигмографии

Сфигмография — медицинский инструментальный метод исследования артериального пульса, основанный на регистрации колебаний поверхностного участка артерии во время прохождения по нему пульсовой волны

10.Пульсовая волна, ее величина и факторы, влияющие на скорость распространения

При сокращении сердечной мышцы (систола) кровь выбрасывается из сердца в аорту и отходящие от нее артерии. Если бы стенки этих сосудов были жесткими, то давление, возникающее в крови на выходе из сердца, со скоростью звука передалось бы к периферии. Упругость стенок сосудов приводит к тому, что во время систолы кровь, выталкиваемая сердцем, растягивает аорту, артерии и артериолы, т. е. крупные сосуды воспринимают за время систолы больше крови, чем ее оттекает к периферии. Распространяющуюся по аорте и артериям волну повышенного давления, вызванную выбросом крови из левого желудочка в период систолы, называют пульсовой волной.

11.Определение артериального давления по методу Короткова и Рива-Роччи.

(а) метод Рива-Роччи – пальпаторный. Когда давление в манжетке становится выше артериального, пульс на лучевой артерии исчезает. Снижая давление в манжетке, определяют момент появления пульса. Давление в этот момкнт соответствует величине систолического АД.

(б) метод Короткова – аускультативный. Когда давление в манжетке становится выше артериального, кровоток в артериях ниже места наложения манжетки прекращается. В момент, когда при снижении давление в манжетке становится меньше систолического АД, в артериях ниже места наложения манжетки начинается прерывистый (только во время

систолического повышения давления) ток крови. Этот кровоток турбулентный, сопровождается появлением звуков, которые можно слышать с помощью фонендоскопа. Звуки (тоны Короткова) слышны все время, пока давление в манжетке ниже систолического АД, но выше диастолического АД. В момент, когда давление в манжетке становится ниже диастолического уровня, тоны Короткова исчезают, потому что кровоток в артериях становится непрерывным, ламинарным. Таким образом, этим методом можно определить и систолиеское, диастолическое давление.

12. Основные показатели насосной функции сердца: сердечный выброс (минутный объем крови) и сердечный индекс, конечно-диастолический, ударный и конечносистолический объемы сердца, их соотношение.

Минутный объём крови (сердечный выброс) – количество крови, выбрасываемое желудочком сердца за одну минуту. МОК = УО * ЧСС (в 1 минуту) = 3-5 л/мин

КСО - Конечный систолический объем - Количество крови, находящееся в желудочке к концу систолы.

КДО -Конечный диастолический объемКоличество крови, находящееся в желудочке к концу диастолы (после сокращения предсердий).

КДО - КСО = УО УО - Ударный объем - Это количество крови, выбрасываемое каждым желудочком во время систолы.

13. Оценка насосной функции сердца методом Фика + 14. Сущность метода эхокардиографии и его возможности

В классическом методе Фика в качестве индикатора, измеряемого в сосудистом русле, используется кислород, вдыхаемый легкими. Задача метода рассчитать, сколько литров крови за 1 минуту должно пройти через легкие, чтобы адсорбировать весь кислород, необходимый для обеспечения потребности человека.

Уравнение для расчета сердечного выброса таково: CB = VO2:C(a-v)O2, где

СВ - сердечный выброс, л/мин;

VO2 - потребление кислорода, мл/мин;

C(a-v)O2 - артериовенозная разница по кислороду, мл/л.

Эхокардиография – регистрация отраженных ультразвуковых сигналов от движущихся структур сердца. Принципиальная схема прибора: генератор ультразвука (УЗ направляется к сердцу) – датчик (улавливает отраженные сигналы) – регистрирующее устройство, позволяющее видеть изображение на экране дисплея (динамика) и получать изображение на бумаге (статика).

15. Сравнить ПД кардиомиоцитов с быстрым и медленным ответами.

16. Фазовые изменения возбудимости кардиомиоцита во время его возбуждения – ПД (график)

ПИЩЕВАРЕНИЕ 1. Сущность опыта мнимого кормления

Эксперимент Павлова заключался в следующем: он делал фистулу желудка, а также перерезал пищевод собаки. Пищевод затем вытаскивали наружу и подвешивали к коже. Далее собаку кормили. Корм, естественно, в желудок не попадал, а просто вываливался через пищевод. Тем не менее, через некоторое время, секреция желудочного сока возникала. При этом получен был чистый желудочный сок. Кроме того, был сделан важнейший вывод: на процесс выделения желудочного сока влияют рефлексы, идущие от ротовой полости.