Бут_акуш_лаб9

Лабораторна робота №9

Тема: “Оцінка якості сперми за виживанням сперміїв. Вивчення впливу фізичних та хімічних факторів на життєздатність сперміїв”.

Хід роботи:

1. Як на спермії впливає висока температура?

Якщо це у межах 38-41 С, то це підвищує їх рухливість, але досить швидко виснажує їх. За температури 42-45 С термін життя сперміїв скорочується, вони стають нерухомими досить швидко і втрачають запліднювальну здатність внаслідок виникнення глибоких порушень.

2. Як на спермії впливає температура 0○С?

При зниженні температури рухливість сперміїв сповільнюється, біля 0 °С у них на­ступає стан анабіозу, при якому зупиняється рухливість, загальмовуються обмінні про­цеси, внаслідок чого збільшується виживання сперміїв. За температури -0.6 С сперма починає замерзати і спермії гинуть. Якщо ввести у середовище жовток курячого яйця і гліцерин – то це знижує точку замерзання сперми і вона стає придатною до замерзання без утворення кристалів (вітрифікація) за різкого зниження температури аж до -196 С (температура рідкого азоту).

3. За якої температури наступає денатурація білка у сперміях?

За температури +46,5 С білки переходять у стан близький до незворотньої денатурації.

4. За якої температури наступає коагуляція білка у сперміях?

За температури 47-48 С, спермії гинуть.

5. Що таке температурний шок або холодовий удар сперміїв?

Якщо ж спермії раптово охоло­джувати від 20 °С до 0° або навіть від 38° до 20 °С, то у них наступає "холодовий удар" (температурний шок), внаслідок якого гине більша частина чи навіть усі спермії.

Механізм пошкоджуючої дії холодового шоку остаточно не з'ясований. Вважають, що під впливом холодового удару у сперміїв пошкоджується акрозома, цитоплазматичні мембрани, про що свідчить вихід електролітів та ферментів у навколишнє середовище. Акрозома втрачає свої специфічні фосфоліпіди.

Щоб уникнути холодового удару слід суворо дотримуватися рекомендованого температурного режи­му у приміщеннях, де працюють зі спермою; застосовувані інструменти, розчини, середовища повинні бути теплими; одержана сперма не повинна піддаватися різкому охолодженню. У середовища для розрідження сперми вводять жовток курячого яйця, ліпідні компоненти якого (ліпопротеїн, лецитин, фосфоліпіди) нашаровуються захис­ним шаром на поверхні сперміїв і захищають їх від температурного шоку.

6. Яка величина осмотичного тиску в сперміях?

Цю величину виражають поняттям «депресія» (температура замерзання розчину). Для сперми точка депресії – 0.57-0,64 (тиск 7,7-8,1 атмосфер).

7. Як діють на спермії гіпертонічні розчини?

Молекули води виходять із сперміїв, внаслідок чого їх оболонка зморщується.

8. Як діють на спермії гіпотонічні розчини?

Молекули рідини проникають у спермії, внаслідок чого вони набухають, їх хвостики закручуються у кільце.

9. Як діють на спермії ізотонічні розчини?

Це прийнятний розбавник для сперми, адже спермії ніяк не змінюються при додаванні ізотонічних розчинів.

10. Як впливає на спермії зміна осмотичного тиску?

Швидка зміна осмотичного тиску дуже згубно впливає на спермії. При цьому спермії менше реагують на відхилення осмотичного тиску у бік гіпертонії, аніж гіпотонії.

11. Як впливає на спермії зміна рН середовища?

Неорганічні кислоти та луги у значних концентраціях згубно діють на спермії. Слабколужне середовище посилює рухливість сперміїв, а при слабокислому середовищі спермії переходять у стан анабіозу. Це пов’язане із тим, що у придатку сім’яника реакція кисла і при еякуляції спермії змішуються із плазмою, при цьому реакція стає слабкокислою, чи лужною – що активізує їх.

12. Який вплив на спермії чинять дезінфікуючі, хімічні, лікарські речовини?

Спирт навіть у 0,5% концентрації дуже швидко вбиває спермії. Неочищений від сивушних масел спирт непридатний для роботи зі штучного осіменіння тварин. Навіть фітонциди часнику та цибулі згубно діють на спермії. А якщо застосовують препарати – то без запаху, а якщо є запах, то приміщення провітрюють.

13. Що таке абсолютний показник виживання сперміїв?

Абсолютний показник виживання – показник, що показує тривалість збереження рухливості сперміїв за різних ступенів розрідження в умовах температури 37 С та 2-4 С до повного відмирання усіх сперміїв.

14. Яку з методик використовують у практичних умовах для визначення виживаємості сперміїв?

Визначають за проміжком часу (год.) протягом якого спермії зберігають прямолінійно-поступальний рух при інкубації їх за температури 38 С. При цьому рухливіть визначають щогодини.

Придатною вважають сперму (бугая), що після розморожування має не менше 4 балів, а після 5-годинного інкубування не нижче 0,5 балів.

Висновок: на даному лабораторному занятті ми детально ознайомились із можливими факторами, що можуть згубно впливати на сперміїв, вияснили як запобігати загибелі сперміїв та дізнались що таке абсолютний показник виживання сперміїв і як його визначають.