2) Ферментативное присоединение

Бактерии могут вырабатывать ферменты, способные угнетать активность антибиотиков путем присоединения к последним различных химических групп. Например, устойчивость к действию аминогликозидов возникает в результате присоединения ацетилового, аминового или аденозинового радикала к молекуле препарата. Присутствие ферментов, обусловливающих устойчивость к действию аминогликозидов, характерно как для грамположительных (Staphylococcus aureus), так и для грамотрицательных (микроорганизмы рода Pseudomonas) возбудителей.

3) Непроницаемость клеточной стенки и устойчивость к антибиотику

Устойчивость некоторых бактерий к действию антимикробных средств связана с непроницаемостью их клеточной стенки для молекул препарата. Например, клеточная стенка грамотрицательных микроорганизмов (особенно рода Pseudomonas) непроницаема для некоторых бета-лактамов.

В то же время аминогликозиды проникают внутрь бактерии посредством кислородозависимой транспортной системы (а потому анаэробы к ним невосприимчивы), в связи с этим анаэробы обладают небольшой чувствительностью к аминогликозидам.

МЕХАНИЗМЫ ВЫВЕДЕНИЯ ВЕЩЕСТВ ИЗ БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ И УСТОЙЧИВОСТЬ К АНТИБИОТИКАМ

Некоторые бактерии, например Е. coli, становятся невосприимчивыми к действию тетрациклинов, когда приобретают внутримембранный белок, активно выводящий антибиотик из клетки. Устойчивость стрептококков к действию макролидов обусловлена подобным механизмом.

Альтернативные пути метаболизма и устойчивость к антибиотикам

Один из наиболее распространенных механизмов возникновения устойчивости к действию антибактериальных препаратов – развитие альтернативных путей метаболизма, помогающих обходить метаболический блок, вызываемый антибиотиком. Так, Staphylococcus aureus становится невосприимчивым к метициллину или флуклоксациллину, когда у него появляется ген тесА, кодирующий альтернативный пенициллинсвязывающий белок (РВР2), не чувствительный к метициллину. Несмотря на то, что состав бактериальной клеточной стенки изменяется, микроорганизм сохраняет способность к делению. Снижение восприимчивости к бензилпенициллину у Streptococcus pneumoniae также вызвано наличием пенициллинсвязывающих белков.

191919. Стерилизация, сущность, варианты, применение. Контроль качества стерилизации.

Основным противомикробным мероприятием, оказывающим прямое губительное действие на нежелательные микроорганизмы, является стерилизация.

Стерилизация – это совокупность физических и химических способов полного освобождения объектов внешней среды от вегетативных и покоящихся (споровых) форм патогенных, условно-патогенных и непатогенных микроорганизмов.

Цель стерилизации: предупреждение заноса микроорганизмов в организм человека при медицинских вмешательствах; создание и поддержание асептической и безмикробной (гнотобиотической) среды; исключение микробного обсеменения питательных сред, культур клеток, реагентов при микробиологических исследованиях; предупреждение микробиологической биодеградации (разрушения) лекарственных, диагностических, продовольственных и других материалов.

Стерилизации подвергают медицинский инструментарий и аппаратуру, лекарственные и диагностические препараты, перевязочный и шовный материал, белье, предметы ухода за больными, питательные среды, лабораторную посуду.

Процесс стерилизации объектов состоит из следующих этапов: дезинфекция; очистка; сборка, группировка и размещение в стерилизаторе; собственно стерилизация; сушка; контроль качества стерилизации; хранение стерилизованных материалов.

Виды стерилизации:

1) Автоклавирование

Стерилизующее действие автоклава обусловлено контактом насыщенного пара под давлением с более холодными объектами, что приводит к конденсации пара в воду и сопровождается выделением тепла, повышающего температуру стерилизуемого объекта. Но обезвоживания при этом не происходит.

В зависимости от стерилизуемых материалов температура насыщенного пара устанавливается от 110 до 138 градусов, давление от 0,4 до 2,5 атмосфер, экспозиция от 30 до 60 минут. Простые питательные среды, физиологический раствор, дистиллированную воду, текстильные изделия в свертках стерилизуют при режиме 1 атмосфера (121 град.) 15-30 минут.

2) Сухой жар, сухожар

Сухой жар в 170 градусов и экспозиции в 60 минут высокоэффективен как стерилизующий агент, но обладает разрушающим действием на объект. Этим способом стерилизуют предметы, плохо проницаемые для пара и не изменяющие свойств под действием высокой температуры (стекло, инструменты, смазки, гидрофобные вещества). При температуре 180 градусов происходит возгонка жирных кислот и смолистых веществ из ваты и обугливание бумаги, поэтому более 180 градусов температуру повышать нельзя.

Термолабильные материалы (главным образом жидкие) стерилизуют 3-4 кратным (дробным) прогреванием текучим паром при 100 градусах по 1 часу с перерывом 1 сутки, в течение которых материал находится в термостате (37 градусов) для прорастания спор.

3) Дробная стерилизация, тиндализация

При 56-70 градусов по 1 часу в течение 5 дней используется для сред или лекарственных форм с белками, витаминами. При невозможности температурной стерилизации используют фильтрование через антибактериальные фильтры.

4) Кипячение

Является наиболее простым и легкодоступным методом стерилизации, пригодным для устранения вегетативной формы микробов. Для уничтожения спороносной микрофлоры оно не пригодно.

5) Стерилизация прокаливанием

Бактериологические петли, сделанные из платиновой или нихромной проволоки, стерилизуют в пламени спиртовой или газовой горелки. Такой способ получил название прокаливания или фламбирования.

Контроль качества стерилизации является одним из наиболее важных мероприятий. Существуют физические и химические методы контроля качества стерилизации. Физический метод контроля работы стерилизаторов заключается в измерении таких параметров, как температура, давление и время стерилизации. Любое отклонение от стандартных режимов стерилизации является сигналом о вероятном сбое аппаратуры. Химический метод контроля заключается в регистрации изменения цвета или физических свойств индикаторов, использующихся для контроля времени экспозиции и условий стерилизации.

Методы	Аппаратура	Время	Температура	Объекты стерилизации
Кипячение	Стерилизатор	20-30 минут	100 град.	Инструменты: шприцы, иглы, шелк
Прокаливание	Газовая горелка, спиртовка	Не лимитировано	До покраснения	Бактериальные петли, препаровательная игла, инструменты
Автоклавирование	Автоклав	30-60 минут	110-138 град. 0,4-2,5 атм.	МПА, МПБ, пептонная вода, физ. р-р
Текучим паром	Аппарат Коха	30-60 минут, ежедневно 3 дня подряд	80-100 град.	Среды с углеводами
Сухим паром	Печь Пастера	60 минут	180 град.	Стеклянная посуда, гидрофобные вещества, смазки, инструменты
Пастеризация	Аппарат Коха, водная баня	60 минут, 5-10 минут	65-70 град. 70-80 град.	Молоко, заготовки и т.д.
Тиндализация (дробная стерилизация)	Аппарат Коха	По 1 часу 5 дней	56-58 град. 70-80 град.	Сыворотки, витамины, питательные среды или лекарства с белками
Фильтрование	Фильтры Зейтца	Не регламентировано	22-25 град.	Сыворотки, лекарственные вещества, все, что боится температуры
УФ-облучение	Бактерицидные лампы	Зависит от площади помещения	Комнатная температура	Очистка воздуха от бактерий

202020. Нормальная микрофлора человека, ее значение в жизнедеятельности организма.

На теле человека обитают как временно, так и постоянно, различные микробы, поступающие из внешней среды. В целом количественный и качественный состав нормальной микрофлоры постоянный и представлен кишечной палочкой, протеем, кокками, бифидобактериями, бактероидами, молочнокислыми бактериями. Случайные (факультативные, транзиторные) микроорганизмы погибают, а постоянные (резидентные) заселяют весь организм. Если баланс между ними не нарушен, то нормальная флора не приносит вреда. Ребенок развивается в полости матки в стерильных условиях и рождается стерильным. Но уже с первых минут после рождения он вступает в контакт с микрофлорой окружающей среды. Обмен микрофлорой происходит при контакте друг с другом (в детских коллективах, школах, больницах). Нормальная микрофлора становится устойчивой, сходной с микрофлорой взрослого, к концу 3 месяца жизни. Количество микробов у взрослого человека составляет около 10¹⁴ особей, причем преобладают облигатные анаэробы.

МИКРОФЛОРА КОЖИ

Микрофлора кожи имеет большое значение в распространении в воздухе. Место обитания микробов – роговой слой кожи, протоки сальных желез, волосяные фолликулы.

Кожу колонизируют: пропионибактерии, коринеформные бактерии; Staphylococcus epidermidis, S. saprophyticus; стрептококки; дрожжи, грибы рода Candida; микрококки.

На 1 см² кожи приходится менее 80000 микробов. В норме это количество не увеличивается в результате действия бактерицидных стерилизующих факторов кожи (альфа-глобулина, IgA, IgG, трансферрина, лизоцима). Снижение бактерицидности кожи свидетельствует о патологии в организме. Это отмечается у онкологических больных, больных, подвергнутых радиоактивному облучению, долго лечившихся глюкокортикоидными гормонами, антибиотиками, цитостатиками. Сдвиг микрофлоры кожи в сторону увеличения грамотрицательных бактерий служит указанием на нарушение ее нормального состава.

НЕКОТОРЫЕ ПРЕДСТАВИТЕЛИ МИКРОФЛОРЫ РОТОВОЙ ПОЛОСТИ

1) Различные виды стрептококков: Streptococcus mutans, Streptococcus mitis, Streptococcus sanguis, Streptococcus salivarius. Они отличаются по способности ферментировать углеводы и образовывать перекись. При сдвиге рН в кислую сторону происходит декальцинация зубной эмали. Стрептококки синтезируют из сахарозы полисахариды, при нарушении этого процесса образуются зубные бляшки;

2) Род Peptococcus – грамположительные кокки, анаэробы. Они активно разлагают пептон и аминокислоты, помогают самоочищению полости рта;

3) Род Veillonella – грамотрицательные кокки, диплококки бобовидной формы, строгие анаэробы. Они не разлагают моно- и дисахариды, но хорошо разлагают лактат, пируват, ацетат до углекислого газа и воды. Эти вещества подавляют рост других микробов, способствуют повышению рН среды, что имеет значение в защите против кариеса;

4) Род Leptotrichia – грамположительные длинные нитевидные палочки. Они не образуют индол и сероводород, ферментируют глюкозу с образованием большего количества молочной кислоты и приводят к снижению рН до 4,5. Помогают самоочищению полости рта, препятствуют адгезии других микробов;

5) Род Fusobacterium – грамотрицательные веретенообразные палочки, образуют из пептона или глюкозы молочную кислоту, помогают самоочищению полости рта.

МИКРОФЛОРА СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ГОРТАНИ, АЛЬВЕОЛ, ТРАХЕИ И БРОНХОВ В НОРМЕ СТЕРИЛЬНА!!!

МИКРОФЛОРА ЖЕЛУДКА

В кислой среде обитают ацидофильные палочки, Sarcina ventriculi, дрожжи. При щелочной реакции появляются стафилококки, стрептококки, энтерококки, грибы. При язвенной болезни желудка и 12-ти-перстной кишки, гастритах обнаруживают Helicobacter pylori.

МИКРОФЛОРА ТОНКОГО КИШЕЧНИКА

Обитают лактобатерии (отличаются по адгезивным свойствам от тех, что обитают в полости рта и желудке), бифидобактерии, энтерококки.

МИКРОФЛОРА ТОЛСТОГО КИШЕЧНИКА

Разнообразна и велика, численно превалируют анаэробы (95%). Это бифидобактерии, бактероиды, лактобактерии, вейлонеллы, клостридии, пептококки. Анаэробы и факультативные анаэробы (их 1-4%) представлены энтеробактериями, стафилококками, стептококками, энтерококками.

МИКРОФЛОРА МОЧЕПОЛОВОЙ СИСТЕМЫ

Почки, мочеточники, мочевой пузырь в норме стерильны. В нижней части уретры встречаются неспорообразующие анаэробы родов Peptococcus, Bacteroides. На наружных половых органах обитает Mycobacterium smegmatis, морфологически сходная с возбудителем туберкулеза, и сапрофитические трепонемы, по морфологии сходные с возбудителем сифилиса. Кроме того, встречаются стафилококки и микоплазмы.

МИКРОФЛОРА ВЛАГАЛИЩА

Микрофлора влагалища у девочек после рождения состоит из молочнокислых бактерий, а затем появляются энтерококки, стрептококки, стафилококки. С наступлением половой зрелости появляются бактерии рода Lactobacillus (палочки Додерлейна). Различают 4 категории чистоты влагалища: I – преобладают палочки Додерлейна, рН кислый, других микроорганизмов нет; II и III – рН кислый или слабощелочной, палочек Додерлейна мало, обнаруживаются кокки, имеет место лейкоцитоз; IV – рН щелочной, единичные палочки Додерлейна, много стафилококков, стрептококков, энтерококков, бактероидов, лейкоцитоз выражен. Благоприятное влияние на состояние микрофлоры влагалища оказывает беременность. Гормональная перестройка благоприятствует развитию молочнокислой флоры. Прерывание беременности влечет за собой изменение микрофлоры влагалища в неблагоприятную сторону. После абортов отмечается воспалительный процесс, вызванный эндогенной инфекцией.