книги2 / монография 50

рой нарастали постепенно и достигали максимума через 24 часа после воздействиястресс-­фактора.

Считаем,чтовыявленныеособенностиявляютсяследствиемнестоль- коразличийвгенотипептицы,скольконаличияванамнезеимпортных цыплят транспортировки в 1 суточном возрасте, которая, несомненно, инициировалавихорганизмеразвитиетранспортногостресса.Поэтому особи, которые впоследствии адаптировались к условиям российской птицефабрики,всеравнообладалинизкимиадаптационнымивозмож- ностямиорганизма.

Однимизнаиболееинтересныхаспектовизучениястрессаявляется анализпроцессареагированияорганизманаэкстремальноевоздействие. Физиологическая «плата» за адаптацию очень сильно зависит от адап- тационного потенциала организма животных и птиц (А. В. Дерюгина, 2012; М. А. Дерхо, Т. И. Середа, О. А. Хижнева, 2014). Установлено, что входеприспособленияквоздействиюантропогенных,климатических, технологических факторов расширяются физиологические границы отклонений(Н. А. Агаджанян,1983;Е. Н. Летягина,2004;Ф. А. Бичкаева, Л. П. Жилина,О. С. Власова,2009;Е. А. Ткаченко,М. А. Дерхо,2014).При этом уровень сдвигов свидетельствует как о силе воздействия стресс-­ фактора,так и об адаптационных возможностях организма.Очевидно, чторасширениелимитовограниченопределамивидовыхнорм,«выход» за их пределы ведет к снижению резервных возможностей обменных процессоворганизма(Ф. А. Бичкаева,Л. П. Жилина,О. С. Власова,2009).

Была проведена оценка информативности лейкоцитарных индек- сов, рассчитанных по параметрам лейкограммы, в оценке стрессового воздействия шуттелирования и адаптационных ресурсов организма цыплятвпервойивторойсерияхэксперимента.Приэтомисходилииз того,чтоколичественныйикачественныйсоставпериферическойкрови поддерживаетсянаопределенномуровневопределенныхсоотношениях

иотражаетфизиологическоесостояниеорганизма,степеньегореактив- ностииустойчивостикдействиювнешнихфакторов.

Ранеебылоотмечено,чтодвух-ичетырехлинейныецыплятав40 су- точном возрасте имели различия по уровню защитных сил организма, определяемых лейкоцитами крови. Так, в кровеносном русле птиц, за- везенных на птицефабрику из Германии, по сравнению с курочками, полученныминаптицефабрике,циркулировалов1,17разаменьшелейко- цитов,атакжев1,21разабылонижесоотношениемеждугранулоцитами

иагранулоцитам(таблица1,рис.3).Еслиисходитьизтого,чтолейкоци-

61

тарныеклеткиявляются«диффузнойэндокриннойсистемой»,програм- мирующейстрессорнуюреакциювответнаразнообразныеизменения гомеостаза (Л. Г. Мухамедьярова, 2010), то организм двух- и четырехли- нейных курочек перед началом эксперимента обладал разным адапта- ционнымпотенциалом.Приэтомстресс-­реакцияворганизмецыплят, ввезенных из-за рубежа, протекала менее активно и более длительно.

Дляподтвержденияданноговывода,атакжеоценкинапряженности системыестественнойзащитыорганизмаптиц,какиндикатораадапта- ционныхресурсовбылирассчитанылейкоцитарныеиндексы.

Индекс Кребса (ИК) характеризует отношение сегментоядерных нейтрофилов (гетерофилов) и лимфоцитов (Е. А. Ткаченко, М. А. Дерхо, 2014).Данныйиндекс,во первых,позволилустановитьстрессорноевоз- действиешуттелированиянаорганизмцыплят,во вторых,охарактери- зоватьдлительностьстресс-­реакции.

В организме цыплят,полученных на птицефабрике (II серия),вели- чина ИК возрастала сразу после воздействия стресс-­фактора в 1,46 раза (р <0,001)исохраняласьнаэтомуровневтечение1часа,чтосвидетель- ствовалоострессированииптициразвитиивихорганизместресс-реак- ции.Ужечерез4часапослешуттелированиябылоотмеченоуменьшение значения индекса Кребса. Значит, продолжительность стресс-реакции составиламенее4часов.

У курочек, завезенных на птицефабрику из Германии (I серия), ве- личинаиндексаКребсадостигламаксимальногозначениятолькочерез 24 часа после моделирования стресса (таблица 2), что свидетельствует одостаточнонизкомуровнеобщейреактивностиорганизмаптиц.

Аналогичный характер изменений имел лейкоцитарный индекс (ЛИ),представляющийсобойотношениеколичествалимфоцитовкней- трофилам(таблица2).

Лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ) характеризует соотношение нейтрофилов (гетерофилов) и суммы лимфоцитов, мо- ноцитов, эозинофилов и базофилов (В. К. Островский, А. В. Мащенко, Д. В. Янголенко, 2006; М. А. Дерхо, Е. С. Самойлова, 2011) и позволяет определить наличие в организме птиц интоксикационных процессов, азначит,инапряженностьпротеканиястресс-­реакции(Л. К. Бусловская, А. Ю. Ковтуненко,2009).

ВIсерииэкспериментальнойработызначениеЛИИ,рассчитанноепо параметрамлейкограммы,нарасталопостепенно,достигаянаивысшей величинычерез24часапослешуттелирования(табл.2).Следовательно,

62

интоксикационные процессы, инициированные в организме цыплят моделированием производственного стресса, прогрессировали посте- пенно,отражаяуровеньзащитныхсилорганизма.

ВоIIсерииэкспериментауцыплятвеличинаЛИИимеламаксималь- ноезначениечерез1часпослешуттелирования.Онасоставила0,63±0,01 усл.ед.,чтов1,43раза(р<0,001)большефоновогозначения.Показатель и через 24 часа после воздействия стресс-­фактора не восстанавливался, хотядостовернонеотличалсяотфоновойвеличины.Значит,клеткикро- виптицоченьбыстрореагировалинаизменениеэндокринногостатуса организма,определяявысокуюнапряженностьадаптационныхреакций.

Результаты исследований согласуются с данными М. С. Галицкая (2003), Л. К. Бусловская, А. Ю. Ковтуненко (2009), в которых тоже уста- новленовозрастаниезначенияЛИИподвоздействиемстресс-­факторакак результатразвитияворганизмеживотныхинтоксикационныхпроцессов.

Лимфоцитарно-­гранулоцитарныйиндекс(ИЛГ)представляетсо-

бойотношениеуровнялимфоцитовкобщемуколичествугранулоцитов

(Е. А. Ткаченко,М. А. Дерхо,2014).

Величина ИЛГ у цыплят, полученных на птицефабрике (II серия), максимальноуменьшалась(в1,34раза,р≤0,001)через1часэксперимен- та,чтобылоследствиемувеличениявлейкограммедолигранулоцитов. Следовательно,шуттелированиеспецифическистимулировалолейкопоэ- тическуюфункциюкроветворныхоргановивызываловыбросвкровоток гранулоцитовнафонеуменьшениялимфоцитов.

Ворганизмекурочек,ввезенныхнаптицефабрикувсуточномвозрас- те из-за рубежа (I серия),реакция со стороны органов лейкопоэза была замедленной, так как величина ИЛГ планомерно уменьшалась после воздействиястресс-­фактораидостигаламинимальнойвеличинытолько через24часапослешуттелирования(таблица2).

ЯдерныйиндексГ. Д. Даштаянца(ЯИ)отражаетсоотношение( %)

моноцитов и палочкоядерных нейтрофилов к уровню сегментоядер- ных нейтрофилов, характеризует скорость их регенерации и продол- жительностьциркуляциивкровяномрусле(Т. В. Кобец,В. Н. Некрасов, А. К. Мотрич, 2003; В. К. Гринь, Э. Я. Фисталь, И. И. Сперанский, 2006; Е. А. Ткаченко,М. А. Дерхо,2014).

Впервойсерииисследованийзначениеядерногоиндексаимеломини- мальноезначениечерез24часапослемоделированияпроизводственного стресса, что характеризовало пролиферацию гетерофилов и моноцитов, атакжескоростиихэлиминацииизкровеносногорусла(таблица3).

63

ВеличинаЯИуптицвторойсерииэкспериментауменьшаласьсразу после шуттелирования, достигая минимальной величины через 1 час, что было следствием уменьшения в общем кровотоке палочкоядерных иповышениясегментоядерныхнейтрофилов(гетерофилов).

Индекссоотношениянейтрофиловимоноцитов(ИСНМ),пока-

зывающийравновесие( %)междуколичествомнейтрофилов(гетерофи- лов)имоноцитов.ИСНМпозволяетсудитьосоотношениикомпонентов микрофагально-­макрофагальной системы (Т. В. Кобец, В. Н. Некрасов, А. К. Мотрич, 2003; В. К. Гринь, Э. Я. Фисталь, И. И. Сперанский, 2006; Е. А. Ткаченко,М. А. Дерхо,2014).ВеличинаИСНМдостовернонеизменя- ласькаквI,такивоIIсеряхработы,чтосвидетельствовалооботсутствии прогностическойзначимостиданногоиндексаввыявленииактивности стресс-­реакцииворганизмецыплят(таблица3).

Индекс соотношения лимфоцитов и моноцитов (ИСЛМ) отра-

жает баланс между лимфоцитами и моноцитами крови (М. А. Дерхо, Е. С. Самойлова,2011;Е. А. Ткаченко,М. А. Дерхо,2014).ВеличинаИСЛМ во второй серии достоверно уменьшалась в 1,38 (р > 0,05) по сравнению с фоновой величиной через 1 час после шуттелирования, что было ре- зультатомсниженияколичествалимфоцитовиувеличениямоноцитов.

Аналогичныесдвигинаблюдалисьчерез24часапослемоделирован- ногострессауцыплятвIсерииэксперимента.

Установлено,чтомоноцитыкровивтканяхорганизмадифференци- руютсявмакрофаги,азатемсовместнослимфоцитамиучаствуютвим- мунологическихреакциях.Значит,вусловияхразвитиястресс-­реакции недостаток лимфоцитов компенсировался моноцитами, но скорость данногопроцессаопределяласьадаптационнымивозможностямидвухичетырехлинейныхптиц(таблица3).

Кровно-­клеточный показатель (ККП) представляет собой отно-

шение (%) числа гранулоцитов к сумме одноядерных клеток (лимфоци- ты + моноциты) (Е. А. Ткаченко, М. А. Дерхо, 2014). У птиц, ввезенных из Германии (I серия), индекс повышался планомерно и наивысшего значениядостигалчерез24часапослешуттелирования.ВеличинаККП укурочек,полученныхнаптицефабрике(IIсерия),возрасталасразупо- слевоздействиястресс-­фактораисохраняласьнаэтомуровневтечение часа(таблица3).

Таким образом, изменения величин лейкоцитарных индексов, воз- никающие в организме птиц после моделированного производствен-

66

ногостресса,независимоотколичествалинийвихгенотипепозволяют установить:

1.Стрессовое воздействие шуттелирования на цыплят и скорость развитиятиповыхзащитныхикомпенсаторно-приспособитель- ных реакций организма, характеризующих его адаптационные возможности.При этом сдвиги в морфологическом составе кро- ви типичны для действия любого стресс-­фактора (В. К. Гринь, Э. Я. Фисталь,И. И. Сперанский,2006; Л. К. Бусловская,А. Ю. Ко- втуненко,Е. Ю. Беляева,2010;М. А. Дерхо,Т. И. Середа,О. А. Хиж- нева,2014;Т. В. Кобец,В. Н. Некрасов,А. К. Мотрич,2003;В. В. По- номаренко,А. В. Мифтахутдинов,2015).

2.Иммунныесдвигиворганизмецыплятявляютсярезультатомре- акцииоргановлейкопоэзанастрессированиеиотражаютуровень реактивности организма. У четырехлинейных курочек (II серия) изменения лейкоцитарного состава крови развиваются сразу после воздействия шуттелирования и максимально выражены через 1 час эксперимента. У двухлинейных птиц сдвиги в соста- ве лейкоцитов крови формируются постепенно и максимально проявляютсятолькочерез24часа.Следовательно,количестволи- ний в генотипе гибридной птицы, а также наличие/отсутствие транспортногострессав1 суточномвозрастеопределяетуровень иммунологическойреактивностиорганизма.

3.Для оценки адаптационных резервов организма курочек неза- висимо от линейности и страны-­производителя можно исполь- зовать лейкоцитарные индексы: индекс Кребса, ядерный индекс Даштаянца, лейкоцитарный индекс интоксикации, лимфоци- тарно-гранулоцитарный индекс, кровно-­клеточный показатель, величина которых сопряжена с активностью и длительностью стресс-реакции.

67

2.3.Характеристика гематологическихпоказателей

Морфофизиологический статус как совокупность морфологических

игематологических показателей объективно отражает физиологиче- ское состояние организма животных.Поэтому влияние стресса на кле- точныйсоставкровинеограничиваетсятолькоизменениемколичества лейкоцитарныхклеток,аотражаетсяинауровнеэритроцитов.Этосвя- зано с тем,что эритроциты не только определяют реологические свой­ ства крови и выполняют дыхательную функцию, но и транспортируют на своей поверхности аминокислоты, холестерин, глюкозу, витамины (Е. А. Черницкий, А. В. Воробей, 1981; И. Ю. Смирнов, О. А. Чирикова, 2005;Р. А. Горев,З. Ш. Смагулова,С. Г. Макарушко,2005),участвуютвосу- ществлении гуморальной регуляции адаптационных процессов в нор- ме и при патологии (О. К. Гаврилов, Г. И. Козинец, Н. Б. Черняк, 1985; Н. А. Трошкина,В. И. Циркин,С. А. Дворянский,2007).Данныефункции реализуютсязасчеттого,чтонамембранеэритроцитовимеютсярецеп- торыинсулина,соматотропногогормона,ацетилхолина,катехоламинов

ит. д., что и определяет их участие в стресс-­реакции и формировании адаптационногопотенциалаорганизмаживотных.

Проведена оценка особенности дыхательной функции крови в ор- ганизме цыплят в ходе развития стресс-­реакции при выполнении IиIIсерийэксперимента.

Былоустановлено,чтодостресса(фон)вкровидвухлинейныхкурочек (I серия) количество эритроцитов составило 3,25 ±0,06 1012/л, гемогло- бина– 67,61 ±2,49 г/л,среднее содержание гемоглобина в эритроците– 19,56 ±0,52 пг. Повышение степени гибридности птицы отражалось на интенсивности дыхательной функции крови. Так, у четырехлинейных курочек (II серия) количество эритроцитов в периферической крови былоравно3,80±0,06 1012/л,гемоглобина– 83,91±1,86г/л,чтоопределяло величинуМСН,характеризующуюинтенсивностьсинтезагемоглобина

иразмерыэритроцитов.

Оценка фоновых показателей крови цыплят в I и II сериях экспери- ментасвидетельствовала,чтоониимелиразнуюинтенсивностьгазооб- мена,чтоотражалосьнакислороднойобеспеченностиорганизма.

Действиестресс-­фактораввидешуттелированияинициировалосни- жениеконцентрацииэритроцитоввкровеносномруслецыплятнезави- симо от серии исследований. Уровень клеток у гибридных птиц, полу-

68

ченныхнаптицефабрике,уменьшалсяпосравнениюсфономна12,36 % (р <0,01),аввезенныхизГермании– на15,38 %.

СогласноданнымО. В. Гавриловой(2007),потеряклетокизкровенос- ного русла происходит за счет кровоизлияний и их внутриклеточного гемолиза.Приэтомуменьшаетсяконцентрацияэритроцитоввселезенке нафонеограниченияскоростиихутилизации.Основнойпричинойрас- пада клеток является снижение резистентности мембран эритроцитов (М. Г. Пшенникова, 2001). Изменения структуры мембранного скелета эритроцитовбылоотмеченоиприокислительномстрессе,чтоотража- лосьнаспособностиклетоккбыстромуответунавнешнеемеханическое воздействиеиинициировалонарушениетранспортныхфункцийкрови (М. Н. Стародубцева,2009).

АналогичныеданныеполученыО. Л. Ковалевой(2008)прихрониче- скомстрессекуриВ. А. Лукичевой(2009)пришуттелированиицыплят.

Ограничение подвижности крыс при иммобилизационном стрессе

втечение 1, 3, и 6 часов также приводило к уменьшению количества эритроцитоввсреднемна15–26 %посравнениюсисходнымицифрами (И. И. Дигурова,А. Г. Гущин,Ю. В. Карева,2007),чтоулучшалотекучесть крови и было проявлением приспособительных реакций в организме животных.

Снижениеколичестваэритроцитоввпериферическойкровицыплят сразупослевоздействиястресс-­фактораотражалосьнауровнегемогло- бина (таблица 4). В I серии эксперимента у двухлинейных курочек ко- личество Hb снижалось на 17,51 % (р < 0,001) по сравнению с исходным значением на фоне сохранения средней концентрации гемоглобина

вэритроцитеи,какследствие,егообъема.Уптиц,полученныхнаптице- фабрике(IIсерия),концентрациядыхательногопигментауменьшалась на15,52 %(р<0,001)посравнениюсвеличиной«достресса»,авеличина МСНтожесохранялась.Следовательно,реакцияэритроцитовиорганов эритропоэзанадействиестрессорабылаоднотипнойудвух-ичетырех- линейныхкурочек:двухчасовоешуттелированиеинициировалогемолиз эритроцитов,нонесказывалосьнапролиферативнойактивностиорганов кроветворения,чтосогласуетсясданнымиО. В. Гавриловой(2007).

69