Определение общего содержания белка, казеина и сывороточных белков в молоке

методом формольного титрования

Метод формольного титрования применяется для массового контроля при оценке качества молока-сырья, так как он легок в выполнении и не требует значительных затрат времени на одно определение.

Метод основан на взаимодействии аминогрупп белков молока с нейтральным формалином, что приводит к повышению кислотности образованием соединений, в которых оба атома аминогруппы замешаются метильной группой. При этом образуется метиламинокислота и свободная ее карбоксильная группа, которая оттитровывается щелочью.

При анализе консервированного молока и молока, имеющего повышенную кислотность (более 22 ^оТ), данный метод дает не точные результаты. Погрешность определения значительно возрастает при фальсификации молока. Метод не используется для определения белка в восстановленном или подвергнутом термической обработке молоке.

Необходимые приборы, оборудование и реактивы: две кол- бы на 50 или 100 мл, пипетка Мора на 10 мл, 0,1 N раствор щелочи NaOH или KOH, бюретка с зажимом, 1 % спиртовой раствор фенолфталеина в капельнице Шустера, 30–40 % раствор нейтрализованного формалина в дозаторе на 1 мл.

Приготовление нейтрализованного формалина

Нейтрализованный формалина необходим для определения белка в молоке формольным методом. Для приготовления нейтрализованного формалина к 50 мл свежего 30-40%-го формалина необходимо добавить 0,5 мл 1%-го спиртового раствора фенолфталеина и при перемешивании оттитровать однонормальным (1Н) раствором NаОН до слабо-розового окрашивания.

Техника определения

1. В колбу на 50–100 мл отмерить 10 мл молока, добавить 10 капель 1%-го спиртового раствора фенолфталеина и оттитровать 0,1 N раствором щелочи до слабо-розового окрашивания, не исчезающего при взбалтывании.

2. В колбу с помощью дозатора добавить 2 мл нейтрализованного формалина и размешать, при этом слабо-розовое окрашивание исчезает.

3. Содержимое колбы вновь оттитровать до слабо-розового окрашивания. Интенсивность окраски при титровании до добавления формалина и после должна быть одинаковой.

4. Рассчитать содержание белков в молоке. Для этого количество миллилитров 0,1 Н раствора щелочи, пошедшее на титрование молока после добавления формалина, умножают на коэффициент 1,94 и находят содержание общего белка в молоке, выраженное в процентах, а при умножении на коэффициент 1,51 – находят процентное содержание казеина. Количество сывороточных белков (альбумин + глобулин) находят по разнице между содержанием общего белка и казеина. Расхождения между повторными определениями не должно превышать более 0,1 мл или 0,19 % общего белка.

Факторы, влияющие на точность анализа

1. Неодинаковая интенсивность окраски при титровании до добавления формалина и после его добавления.

2. Необходимо использовать только нейтрализованный и свежеприготовленный формалин.

Определение общего содержания белков в молоке рефрактометрическим методом

Метод основан на установлении разности показателя пре- ломления луча света, проходящего через молоко и выделенную из него безбелковую сыворотку. Анализировать можно молоко сырое и пастеризованное.