Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

6 курс / Медицинская реабилитация, ЛФК, Спортивная медицина / Физиотерапия, лазерная терапия / Регенерация_скелетных_мышц_и_реакция_иммунной_системы_млекопитающих

.pdf
Скачиваний:
1
Добавлен:
24.03.2024
Размер:
7.26 Mб
Скачать

Рис. 23. Морфометрический анализ мышечных регенератов в условиях трехкратно-

го снижения дозы излучения He-Ne лазера в ранние сроки после травмы.

Примечание. Ось абсцисс – сроки регенерации мышцы, сут. Ось ординат – процент

средних значений исследуемых параметров к соответствующим показателям в

контроле (без лазерного воздействия). Достоверные различия по сравнению с

контрольными регенератами.

ми животными, у которых травмированные мышцы не подвергались лазер-

ному воздействию (рис. 24). Различия в величине митотического индекса

тимоцитов на 7-е сут (в контроле 24.0±3.4‰, в опыте 16.7±1.1‰, достоверно

при p<0.05) постепенно нивилировались. Изменения функционального со-

стояния тимуса через 7 и 14 сут были выражены в меньшей степени по срав-

нению с серией опытов, где доза лазерного воздействия была в 3 раза выше.

Масса тимуса и величина коркового слоя в течение 14 сут после травмы ос-

тавались на более высоком уровне (сравнить с рис. 18).

Эффект излучения импульсного ИК лазера в течение месяца

после травмы мышц

Условия воздействия импульсного инфракрасного лазера на икроножные

мышцы: аппарат «Орион» (фирма «Жива», Россия), длина волны 0.89 мкм,

несущая частота 1500 Гц, длительность импульса 7х10-8 с, мощность в им-

пульсе 4.8 Вт, модулирующая частота 10 Гц, длительность модулирующего

импульса 2х10-2 с, средняя мощность в импульсе 0.002 Вт, площадь облуче-

40

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Рис. 24. Показатели активности тимуса в условиях трехкратного снижения дозы

излучения He-Ne лазера в ранние сроки после травмы мышц.

Примечание. Ось абсцисс – сроки регенерации мышцы, сут. Ось ординат – процент

средних значений исследуемых параметров к соответствующим показателям в

контроле (без лазерного воздействия). Достоверные различия по сравнению с

контрольными регенератами.

íèÿ 1.5 ñì2, плотность энергии за время одной процедуры 0.36 Дж/см2. В течение 30 сут было проведено 10 процедур по 3 мин каждая (еженедельно по 2–3 экспозиции), общая доза на курс при лечении каждой конечности составляла 3.6 Дж/см2. В целом полученная животным доза воздействия ИК лазера равнялась 7.2 Дж/см2.

МЫШЦЫ. Гистологическая структура регенератов. В условиях воздействия ИК лазера на травмированные мышцы в течение первых 30 сут после операции к концу наблюдаемого срока (60 сут) обе половины мышцы срастались прочно. Пространство между проксимальной и дистальной культями мышцы частично заполнялось регенерирующими мышечными волокнами (рис. 25). Мышечные волокна имели четкую поперечную исчерченность, спокойные ядра (веретеновидной формы) и некрупные ядрышки, что указывало на более дифференцированное состояние мышечной ткани в регенератах у подопытных крыс (рис. 26). Среди мышечных волокон, имеющих нормальное строение, встречались погибающие и узкие мышечные волокна с небольшим количеством миофибрилл. Соединительная ткань в области травмы также была более дифференцированной, состояла из широких

41

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Рис. 25. Область травмы в

икроножной мышце при

воздействии ИК-лазерного

излучения в течение 30 сут

после поперечной перерез-

ки: плотная соединитель-

ная ткань и небольшие уча-

стки регенерирующей мы-

шечной ткани. Срок реге-

нерации 60 сут. Ув. Ч 25.

Рис. 26. Область травмы необлученной икроножной мышцы при воздействии ИК-

лазерного излучения в течение 30 сут после поперечной перерезки: дифференциро-

ванные мышечные волокна, более широкие прослойки соединительной ткани меж-

ду пучками мышечных волокон. Срок регенерации 60 сут. Ув. Ч 400.

42

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Рис. 27. Морфометричес-

кие показатели мышеч-

ных регенератов при воз-

действии ИК-лазерного

излучения на оперирован-

ные конечности крыс в те-

чение первых 30 сут пос-

ле травмы. Срок наблюде-

ния 60 сут после опера-

öèè.

Примечание. Ось ординат

– процент средних

значений исследуе-

мых показателей к со-

ответствующим пока-

зателям в контроле

(без лазерного воздей-

ствия).

пучков коллагеновых волокон и фиброцитов. Участки рыхлой неоформленной соединительной ткани с небольшими включениями жировых клеток и разветвленной сетью капилляров занимали сравнительно небольшое пространство. Основное вещество приобретало способность окрашиваться метахроматично, что может свидетельствовать о некоторых изменениях его свойств. В области регенерации наблюдалась популяция мелких и средних по величине дегранулирующих тучных клеток и значительно реже крупных тучных клеток с ярко оранжево-коричневыми вакуолями и гранулами. К этому сроку снижалась пролиферативная активность тканей, что, по-видимому, указывает на завершение репродуктивных процессов в мышце. По сравнению с контролем, отмечалось некоторое усиление склеротизации мышечной ткани в регенератах. По всей мышце происходило расширение и уплотнение септ, увеличение соединительнотканных прослоек между пучками мышеч- ных волокон, уплотнение стенок кровеносных сосудов.

Морфометрические показатели регенератов в опыте и контроле (без лазерного воздействия) не различались достоверно, хотя у подопытных крыс в 60-суточных регенератах количество соединительной ткани повышалось на 23% (рис. 27). Об увеличении соединительнотканных структур в травмированной мышце говорят данные по соотношению площадей, занимаемых мышечной и соединительной тканями на гистологических срезах регенератов. Так, количество мышечной ткани было больше, чем соединительной в опыте в 2.2 раза (69.2±6.3% и 30.8±6.3%, соответственно), в контроле – в 3 раза (75.0±2.6% и 25.0±2.6%, соответственно).

43

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Биохимические показатели мышечных регенератов. В 60-суточных регенератах после лазеротерапии уровень биосинтетических и биоэнергети- ческих процессов в тканях (содержание ДНК, РНК и неорганического фосфата) практически не отличался от соответствующих показателей в регенератах контрольных животных (рис. 28) и только содержание белка было низким (51% от контроля, р<0.05). В мышечной ткани регенератов отмечался достоверно высокий уровень перекисного окисления липидов (ПОЛ), что, возможно, отражает нестабильность мембранных структур в тканях регенерата и состояние воспаления в ходе структурно-функциональной перестройки. Уровень антипротеиназной активности в тканях регенератов и сыворот-

ке крови, определяемая по активности α -ПИ и α -МГ, не отличался досто-

1 2

верно от контроля (регенерация без лазеротерапии). Можно отметить тенденцию к снижению активности эластазы в мышцах до 91.3% от контроля и

повышению активности ее ингибитора (α -ПИ) до 138%. В результате дест-

1

руктивные процессы в мышечной ткани регенератов поддерживались на более низком уровне. Тенденция к уменьшению активности антипротеиназно-

го ингибитора α -МГ на 7% в мышечной ткани регенератов и на 21% в сыво-

2

ротке крови свидетельствует о некотором снижении процессов микроциркуляции и проницаемости сосудов по сравнению с контрольными животными.

Рис. 28. Метаболические показатели мышечных регенератов и сыворотки крови при

воздействии ИК-лазерного излучения на перерезанные икроножные мышцы в тече-

ние первых 30 сут после травмы. Срок наблюдения 60 сут после операции.

Примечание. Ось ординат – процент средних значений исследуемых показателей к

соответствующим показателям в контроле (без лазерного воздействия). Досто-

верные различия по равнению с контрольными регенератами.

44

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

ТИМУС. На 60-е сут после воздействия ИК-лазерного излучения на обе травмированные икроножные мышцы крыс в течение месяца (рис. 29) функциональная активность тимуса полностью не восстанавливалась. Наблюдались тенденция к снижению массы тимуса (на 15%), увеличение числа ядер тимоцитов (на 25%) по сравнению с соответствующим показателем у животных без лазеротерапии регенерирующих мышц. Однако лимфоидные клетки тимуса были менее активны, что, по-видимому, отражает уровень их пролиферации. Способность к связыванию красителя АО в ядрах тимоцитов снижалась в 2.5 раза (р<0.01), удельная активность генома тимоцитов – в 2 раза (р<0.02).

КОСТНЫЙ МОЗГ. Воздействие лучей импульсного ИК лазера на травмированные икроножные мышцы в течение месяца после операции (табл. 5) способствовало снижению количества клеток с хромосомными нарушениями на 20% (31.3±2.8% в контроле и 25.1±1.4% в опыте, 0.05<р<0.1). При этом качественный состав аберрантных митозов практически не изменился. Отмечалась лишь некоторая тенденция к увеличению количества аберрантных митозов с мостами и небольшое снижение их со смешанной патологией и «прочими» нарушениями.

Рис. 29. Показатели активности клеток тимуса при воздействии ИК-лазерного из-

лучения на оперированные конечности крыс в течение первых 30 сут после травмы

мышц. Срок наблюдения 60 сут после операции.

Примечание. Ось ординат – процент средних значений исследуемых показателей к

соответствующим показателям в контроле (без лазерного воздействия). Дос-

товерные различия по сравнению с контролем.

45

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Таблица 5. Цитогенетические изменения в клетках костного мозга

âусловиях воздействия ИК лазера на оперированные конечности крыс

âтечение первых 30 сут после травмы мышц. Срок наблюдения 60 сут

после операции

Исследуемый показатель

Контроль

Воздействие лазера в

 

(травма мышц)

течение 30 сут после

 

 

травмы мышц

 

n=5

n=5

 

 

 

Клетки с аберрантными

31.3±2.8

25.1 ±1.4*

митозами (анафазный метод), %

 

0.05<p<0.1

 

 

 

Из них в процентном

 

 

соотношении:

 

 

мосты

60

63

фрагменты

10

10

смешанная патология

 

 

(мосты+фрагменты)

3

2

«прочие» аберрации

27

25

 

 

 

46

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Глава 3

Воздействие лазерного излучения на локально облученные

âдозе 20 Гр травмированные скелетные мышцы крысы

èреакция центральных органов иммунной системы

Условия локального воздействия рентгеновского облучения на икроножные мышцы: аппарат РУП-200 (Россия), напряжение 190 кВ, сила тока 15 mA, мощность дозы 0.75 Гр/мин., фильтры 0.5 мм Си + 1 мм Аl. Время облу- чения 26 мин. 40 с. Доза рентгеновского облучения составила 20 Гр. На 80 белых беспородных крысах весом 250–300 г проведен сравнительный анализ эффекта излучения He-Ne и ИК лазеров при одной и той же дозе и одинаковых режимах экспозиции на регенерацию локально облученных скелетных мышц крысы и реактивные изменения органов иммунной системы: тимуса и костного мозга (Булякова и др., 1998, 1999, 2002; Зубкова и др., 1998а, б, 1999, 2002).

Регенерация облученных мышц без лазерного воздействия

Схема эксперимента представлена на рисунке 30.

МЫШЦЫ.Гистологическаяструктура регенератов. Регенерационный

процесс в мышцах замедлялся. Проксимальная и дистальная культи были соединены между собой слабо. В некоторых регенератах наблюдался очень сильный экссудативный отек тканей. Резорбция фибрина и продуктов тканевого распада протекала вяло (рис. 31). Нарушено формирование грануляционной ткани (рис. 32). Среди беспорядочно лежащих волокнистых структур

видны немногочисленные лейкоциты, многоотростчатые фибробласты

20 Ãð 20 Ãð

с крупными ядрами и 1–2 ядрышка-

 

 

ми. Кровеносные сосуды увеличены

 

в диаметре, гиперемированы. На кон-

 

цах перерезанных мышечных воло-

 

кон регенерационные изменения

 

были выражены крайне слабо. Подав-

 

лена пролиферативная активность

 

мышечных элементов. Мышечные

 

ядра различались по величине, име-

 

ли неровные края и крупные ядрыш-

 

ки, не скапливались на концах трав-

Рис. 30. Схема эксперимента с попе-

мированных мышечных волокон (рис.

 

речной перерезкой локально облучен-

33). Слабый рост мышечной ткани на-

 

ных икроножных мышц без лазерного

 

 

блюдался и в расширенных септах от

воздействия.

 

 

47

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Рис. 31. Гистологический срез перерезан-

ной икроножной мышцы, локально облу-

ченной в дозе 20 Гр: в области травмы

лежит фибрин. Срок регенерации 7 сут.

Óâ. × 7.5.

концов неповрежденных мышечных волокон. В обеих мышечных культях встречались участки мышечной ткани, где мышечные волокна подвергались ценкеровскому некрозу, вакуольной дегенерации и склеротизации. Через 60 сут заживление области мышечной травмы завершалось (рис. 34). Расстояние между проксимальной и дистальной культями сравнительно широкое. Область травмы была заполнена или обширными участками рыхлой соединительной ткани, содержащей отдельные волокнистые структуры, неширокие пучки коллагеновых волокон, полибласты и группы макрофагов с бурым пигментом, или представляла собой узкий соединительнотканный тяж. Встречались гематомы. В результате подавленной регенерационной способности собственно мышечной ткани единичные миотубы, образовавшиеся по краю культей и в септах, содержали неболь-

шое количество ядер и миофибрилл, не прорастали в область повреждения мышцы и, по-видимому, были нежизнеспособны. Среди них видны скопления макрофагов с бурым пигментом. В обеих мышечных культях далеко от места травмы расширялись септы, депонировался жир. Встречались волокна, находившиеся в состоянии ишемии (не различались миофибриллы, волокна окрашивались в темный цвет). Отмечались гиперемия и облитерация стенок крупных кровеносных сосудов.

Данные морфометрического анализа мышечных регенератов подтверждают, что локальное воздействие ионизирующей радиации в высокой дозе (20 Гр) на скелетную мышцу в значительной степени подавляло в ней процесс посттравматической регенерации и снижало способность макрофагов к

48

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Рис. 32. Область травмы облученной в дозе 20 Гр перерезанной икроножной мышцы:

подавлено формирование грануляционной ткани, коллагеновых волокон, видны мно-

гоотростчатые фибробласты и клетки крови. Срок регенерации 7 сут. Ув. Ч 200.

Рис. 33. Край проксимальной культи в облученной (20 Гр) перерезанной икронож-

ной мышце: снижение регенерационной способности мышечной ткани, отсутствие

скопления ядер на концах травмированных мышечных волокон, подавление их про-

лиферативной активности. Срок регенерации 7 сут. Ув. Ч 600.

49

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/