
- •1. Определение активности препарата биологическими методами
- •2. Общие принципы расчетов
- •Объединение результатов двух и более биологических испытаний одного и того же препарата проводят согласно разделу 5 «Объединение результатов независимых определений биологической активности».
- •3. Биологические испытания, основанные на количественном ответе
- •3.1. Обработка результатов двухдозовой рандомизированной постановки (биологическая активность гонадотропина хорионического)
- •3.2. Обработка результатов трехдозовой рандомизированной постановки (биологическая активность гонадотропина хорионического)
- •3.3. Обработка результатов двухдозовой постановки методом случайных блоков (биологическая активность окситоцина на петушке)
- •3.4. Обработка результатов двухдозовой постановки методом латинского квадрата (биологическая активность окситоцина на изолированном органе)
- •3.5. Обработка результатов трехдозовой постановки методом латинского квадрата (биологическая активность антибиотиков методом диффузии в агар в чашках Петри)
- •3.6. Обработка результатов двойного перекреста (биологическая активность инсулина методом а и в)
- •Таким образом, биологическая активность испытуемого препарата равна 40,1 ед/мл. Ее доверительные границы составляют 101,5240–101,6830, т. Е. 33,4–48,2 ед/мл.
- •3.7. Статистическая обработка результатов испытания на гистамин
- •Испытуемый препарат u
- •4. Биологические испытания, основанные на альтернативном ответе
- •4.1. Оценка и сравнение пороговых доз при их прямом определении
- •4.1.1. Обработка результатов оценки активности испытуемого препарата по сравнению со стандартным образцом на кошках
- •Определение биологической активности сердечных гликозидов на кошках по сравнению со стандартным образцом (пример 5)
- •4.2. Оценка биологической активности испытуемого препарата при косвенном определении эффективных доз (оценка еd50)
- •4.2.1. Определение средней смертельной дозы (лд50)
- •Учет результатов опыта (яд гюрзы)
- •4.3. Сравнение лд50 двух испытуемых препаратов
- •Перевод процентов в пробиты и перевод пробитов в весовые коэффициенты w см. Таблицу V и VIII в приложениях.
- •Таким образом, биологическая активность испытуемого препарата равна 40,2 ед/мл. Ее доверительные границы составляют 101,4716–101,7377, т. Е. 29,6–54,7 ед/мл.
- •4.5. Качественное сравнение испытуемых препаратов
- •5. Объединение результатов независимых определений биологической активности
- •Приложения
- •Критические значения контрольного критерия q (р, n)
- •Критические значения критерия Фишера
Критические значения критерия Фишера
f2 – число степеней свободы для меньшей дисперсии |
f1 – число степеней свободы для большей дисперсии |
|||||||||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
20 |
∞ |
|
3 |
10,13 34,12 |
9,55 30,81 |
9,28 29,46 |
9,12 28,71 |
9,01 28,24 |
8,94 27,91 |
8,88 27,67 |
8,84 27,49 |
8,66 26,69 |
8,53 26,12 |
6 |
5,99 13,74 |
5,14 10,92 |
4,76 9,78 |
4,53 9,15 |
4,39 8,75 |
4,28 8,47 |
4,21 8,26 |
4,15 8,10 |
3,87 7,39 |
3,67 6,88 |
9 |
5,12 10,56 |
4,26 8,02 |
3,86 6,99 |
3,63 6,42 |
3,48 6,06 |
3,87 5,80 |
3,29 5,62 |
3,23 5,47 |
2,93 4,80 |
2,71 4,31 |
12 |
4,75 9,33 |
3,89 6,93 |
3,49 5,95 |
3,26 5,41 |
3,11 5,06 |
3,00 4,82 |
2,91 4,64 |
2,85 4,50 |
2,54 3,86 |
2,30 3,36 |
15 |
4,54 8,68 |
3,68 6,36 |
3,29 5,42 |
3,06 4,89 |
2,90 4,56 |
2,79 4,32 |
2,71 4,14 |
2,64 4,00 |
2,33 3,37 |
2,07 2,87 |
20 |
4,35 8,10 |
3,49 5,85 |
3,10 4,94 |
2,87 4,43 |
2,71 4,10 |
2,60 3,87 |
2,51 3,70 |
2,45 3,56 |
2,12 2,94 |
1,84 2,42 |
30 |
4,17 7,56 |
3,32 5,39 |
2,92 4,51 |
2,69 4,02 |
2,53 3,70 |
2,42 3,47 |
2,33 3,30 |
2,27 3,17 |
1,93 2,55 |
1,62 2,01 |
60 |
4,00 7,08 |
3,15 4,98 |
2,76 4,13 |
2,53 3,65 |
2,37 3,34 |
2,25 3,12 |
2,17 2,95 |
2,10 2,82 |
1,75 2,20 |
1,39 1,60 |
∞ |
3,84 6,63 |
3,00 4,61 |
2,60 3,78 |
2,37 3,32 |
2,21 3,02 |
2,10 2,80 |
2,01 2,64 |
1,94 2,51 |
1,57 1,88 |
1,00 1,00 |
F для P = 95 % напечатаны жирным шрифтом, а F для P = 99 % – обычным.
Таблица IV
Критические значения критерия Пирсона (χ2)
f |
P = 95 % |
P = 99 % |
f |
P = 95 % |
P = 99 % |
f |
P = 95 % |
P = 99 % |
1 |
3,84 |
6,63 |
18 |
28,9 |
34,8 |
35 |
49,8 |
57,3 |
2 |
5,99 |
9,21 |
19 |
30,1 |
36,2 |
36 |
51,0 |
58,6 |
3 |
7,81 |
11,3 |
20 |
31,4 |
37,6 |
37 |
52,2 |
59,9 |
4 |
9,49 |
13,3 |
21 |
32,7 |
38,9 |
38 |
53,4 |
61,2 |
5 |
11,1 |
15,1 |
22 |
33,9 |
40,3 |
39 |
54,6 |
62,4 |
0 |
12,6 |
16,8 |
23 |
35,2 |
41,6 |
40 |
55,8 |
63,7 |
7 |
14,1 |
18,5 |
24 |
36,4 |
43,0 |
41 |
56,9 |
65,0 |
8 |
15,5 |
20,1 |
25 |
37,7 |
44,3 |
42 |
58,1 |
66,2 |
9 |
16,9 |
21,7 |
26 |
38,9 |
45,6 |
43 |
59,3 |
67,5 |
10 |
18,3 |
23,2 |
27 |
40,1 |
47,0 |
44 |
60,5 |
68,7 |
11 |
19,7 |
24,7 |
28 |
41,3 |
48,3 |
45 |
61,7 |
70,0 |
12 |
21,0 |
26,2 |
29 |
42,6 |
49,6 |
46 |
62,8 |
71,2 |
13 |
22,4 |
27,7 |
30 |
43,8 |
50,9 |
47 |
64,0 |
72,4 |
14 |
23,7 |
29,1 |
31 |
45,0 |
52,2 |
48 |
65,2 |
73,7 |
15 |
25,0 |
30,6 |
32 |
46,2 |
53,5 |
49 |
66,3 |
74,9 |
16 |
26,3 |
32,0 |
33 |
47,4 |
54,8 |
50 |
67,5 |
76,2 |
17 |
27,6 |
33,4 |
34 |
48,6 |
56,1 |
|
|
|
при 1 <
f < 30
и P = 95
%;
при 1 <
f < 30
и P = 99
%.
Для f>30
справедливы следующие приближения:
при P = 95 %;
при P
= 99 %.
Таблица V
Перевод процентов в пробиты
|
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
0 |
— |
2,67 |
2,95 |
3,12 |
3,25 |
3,36 |
3,45 |
3,52 |
3,59 |
3,66 |
10 |
3,72 |
3,77 |
3,82 |
3,87 |
3,92 |
3,96 |
4,01 |
4,05 |
4,08 |
4,12 |
20 |
4,16 |
4,19 |
4,23 |
4,26 |
4,29 |
4,33 |
4,36 |
4,39 |
4,42 |
4,45 |
30 |
4,48 |
4,50 |
4,53 |
4,56 |
4,59 |
4,61 |
4,64 |
4,67 |
4,69 |
4,72 |
40 |
4,75 |
4,77 |
4,80 |
4,82 |
4,85 |
4,87 |
4,90 |
4,92 |
4,95 |
4,97 |
50 |
5,00 |
5,03 |
5,05 |
5,08 |
5,10 |
5,13 |
5,15 |
5,18 |
5,20 |
5,23 |
60 |
5,25 |
5,28 |
5,31 |
5,33 |
5,36 |
5,39 |
5,41 |
5,44 |
5,47 |
5,50 |
70 |
5,52 |
5,55 |
5,58 |
5,61 |
5,64 |
5,67 |
5,71 |
5,74 |
5,77 |
5,81 |
80 |
5,84 |
5,88 |
5,92 |
5,95 |
5,99 |
6,04 |
6,08 |
6,13 |
6,18 |
6,23 |
90 |
6,28 |
6,34 |
6,41 |
6,48 |
6,55 |
6,64 |
6,75 |
6,88 |
7,05 |
7,33 |
|
0,0 |
0,1 |
0,2 |
0,3 |
0,4 |
0,5 |
0,6 |
0,7 |
0,8 |
0,9 |
99 |
7,33 |
7,37 |
7,41 |
7,46 |
7,51 |
7,58 |
7,65 |
7,75 |
7,88 |
8,09 |
Таблица VI
Перевод пробитов в весовые коэффициенты
Пробиты |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,3 |
0,4 |
0,5 |
0,6 |
0,7 |
0,8 |
0,9 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
3 |
1,0 |
1,2 |
1,4 |
1,6 |
1,8 |
2,0 |
2,3 |
2,6 |
2,9 |
3,2 |
4 |
3,5 |
3,7 |
3,9 |
4,1 |
4,3 |
4,5 |
4,6 |
4,7 |
4,8 |
4,9 |
5 |
5,0 |
4,9 |
4,8 |
4,7 |
4,6 |
4,5 |
4,3 |
4,1 |
3,9 |
3,7 |
6 |
3,5 |
3,2 |
2,9 |
2,6 |
2,3 |
2,0 |
1,8 |
1,6 |
1,4 |
1,2 |
Таблица VII
«Рабочие» пробиты для эффектов, равных 0 и 100%
Число животных в группе (n) |
0% |
100% |
2 |
3,85 |
6,15 |
3 |
3,62 |
6,38 |
4 |
3,47 |
6,53 |
5 |
3,36 |
6,64 |
6 |
3,27 |
6,73 |
7 |
3,20 |
6,80 |
8 |
3,13 |
6,87 |
9 |
3,09 |
6,91 |
10 |
3,04 |
6,96 |
11 |
3,00 |
7,00 |
12 |
2,97 |
7,03 |
13 |
2,93 |
7,07 |
14 |
2,90 |
7,10 |
15 |
2,87 |
7,13 |
16 |
2,85 |
7,15 |
17 |
2,82 |
7,18 |
18 |
2,80 |
7,20 |
19 |
2,78 |
7,22 |
20 |
2,76 |
7,24 |
Таблица VIII
Перевод пробитов в весовые коэффициенты W (биологическая активность инсулина методом С)
Пробиты |
|
||||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
|
0,0 |
0,001 |
0,015 |
0,131 |
0,439 |
— |
0,1 |
0,001 |
0,019 |
0,154 |
0,471 |
0,9 |
0,2 |
0,001 |
0,025 |
0,180 |
0,503 |
0,8 |
0,3 |
0,002 |
0,031 |
0,208 |
0,532 |
0,7 |
0,4 |
0,002 |
0,040 |
0,238 |
0,558 |
0,6 |
0,5 |
0,003 |
0,050 |
0,269 |
0,581 |
0,5 |
0,6 |
0,005 |
0,062 |
0,302 |
0,601 |
0,4 |
0,7 |
0,006 |
0,076 |
0,336 |
0,616 |
0,3 |
0,8 |
0,008 |
0,092 |
0,370 |
0,627 |
0,2 |
0,9 |
0,011 |
0,110 |
0,405 |
0,634 |
0,1 |
— |
0,015 |
0,131 |
0,439 |
0,637 |
0,0 |
|
8 |
7 |
6 |
5 |
|
|
Пробиты |
|
1) В разделе 4.5 a, b, c, и d – число положительных и отрицательных ответов на два сравниваемых испытуемых препарата, применяемых для вычисления значения критерия Пирсона
2) В разделе 4.2.1 P – значение пробита, а в разделе 4.5 P – статистика, вычисляемая по формуле Фишера
3) В дальнейшем, для удобства, лекарственное средство с неизвестной биологической активностью будет называться «испытуемый препарат»
4) При этом, за счет разницы в точности вычислений, полученные результаты могут незначительно отличаться от приведенных в разделе
5) Равное число животных в группах и равный интервал доз желателен, но не обязателен