3 курс / Фармакология / Миронов_А_Н_,_Бунатян_Н_Д_и_др_Руководство_по_проведению_доклинических

— выявление возможного негативного влияния перспективного ФВПФР на ори- ентировочно-исследовательскую и условно-рефлекторную деятельность лабораторных животных (модель умственной работоспособности человека).

Для проведения экспериментальных исследований методом случайной выборки формируют необходимое количество получающих исследуемое вещество животных (оценивают не менее трех доз фармакологического вещества — по одной группе животных на каждую дозу), 1 контрольную группу животных-самцов и такое же количество групп самок (для крыс число животных в группе не менее 10, для собак — не менее 4).

2.1. Определение количественных характеристик активности ФВПФР по эффекту повышения физической работоспособности лабораторных животных

2.1.1. Процедура тестирования лабораторных животных и обработки экспериментальных данных

ФВПФР вводят способом, который предполагается для клинического применения. На основании данных скринингового исследования препарат вводят однократно или курсом. При однократном введении препарата контрольное тестирование животных проводят через 0,5–2 ч после введения (в зависимости от аппликации и фармакокинетики вещества), а затем через 6, 24, и 48 ч после введения оцениваемого вещества. При курсовом введении препарата (длительность курса до семи дней) контрольное тестирование животных проводят ежедневно через 0,5–2 ч после первого введения препарата в этот день, а затем через 1, 3, 7 и 14 суток после окончания курса введения оцениваемого вещества. При курсовом введении препарата (длительность курса более семи дней) контрольное тестирование животных в течение курса проводят не реже двух раз в неделю через 0,5–2 ч после первого введения препарата в этот день, а также через 1, 3, 7 и 14 суток после окончания курса введения оцениваемого вещества.

Выбор диапазона доз исследуемого вещества должен основываться на данных скринингового исследования специфической активности вещества, при этом количество исследуемых доз должно быть достаточно для последующего расчета средней эффективной дозы препарата методом пробит-анализа по Финни.

Сравнение среднегрупповых показателей проводят с использованием непараметрических критериев. Для последующего расчета средних эффективных доз ФВПФП данные представляют в альтернативной форме. Наличие эффекта увеличения работоспособности отмечают у тех животных, индивидуальный показатель которых при контрольном тестировании превышает значение максимума (верхнего предела размаха как меры рассеяния признака) для этой экспериментальной группы, зарегистрированное при оценке исходного уровня работоспособности. Расчет средней эффективной дозы ФВПФР проводят методом пробит-анализа по Финни на пике активности вещества (для срока тестирования с максимальным увеличением работоспособности животных).

2.1.2.Определение количественных характеристик активности ФВПФР при нагрузках аэробной мощности в исследованиях на крысах

Эксперименты на крысах во всем исследуемом диапазоне доз, как при однократном, так и при курсовом введении ФВПФР, проводят по методике «Бег до отказа» и методике «МПК».

Методика «Бег до отказа». Для экспериментов на мелких лабораторных животных используют модель бега крыс на тредмиле до отказа. Подготовительный период постановки эксперимента аналогичен скрининговому исследованию. Исходным показателем работоспособности животных является время бега на тредмиле до отказа при скорости движения ленты 20 м/мин, которая увеличивается на 1 м/мин каждую последующую минуту теста, с углом наклона по отношению к горизонтали, равным 15°, регистрируемое в

791

ходе тестирования на следующий день после трехдневной тренировки. Оцениваемым показателем является время бега на тредмиле до отказа, регистрируемое в ходе контрольных тестирований в динамике наблюдения после введения ФВПФР.

Методика «МПК». Для оценки влияния ФВПФР на состояние физической работоспособности крыс используют индекс максимального потребления кислорода (МПК). Установка для проведения экспериментальных исследований («Oxymax») представляет собой комплекс оборудования, состоящий из герметичного тредмила и подсоединенного к нему газоанализатора. Расчет индекса МПК проводят прямым методом по результатам измерения содержания кислорода в выдыхаемом воздухе газоанализатором после выполнения животным ступенчато увеличивающейся физической нагрузки. Для дозирования физической работы, выполняемой животными, используют тредмил. За МПК принимают максимальное значение объема потребляемого кислорода (Vо2), регистрируемое в процессе теста (Vо2 считается максимальным, если его значение после прироста изменяется не более чем на 5% при выполнении трех увеличивающихся по интенсивности нагрузок подряд). После достижения максимального значения Vо2 тест прекращается. Оцениваемым показателем является индекс МПК, регистрируемый в ходе контрольных тестирований в динамике наблюдения после введения ФВПФР.

2.1.3.Определение количественных характеристик активности ФВПФР при нагрузках аэробной мощности в исследованиях на собаках

Физическую работоспособность на собаках оценивают по двум основным методикам: методике «Бег на тредмиле до отказа» и методике «PWC200». В подготовительный период проведения экспериментов в течение пяти дней у собак вырабатывают навык бега на тредмиле.

Методика «Бег на тредмиле до отказа» Бег на тредмиле со скоростью 5 км/час до отказа, количественный критерий оценки работоспособности — время бега до отказа, регистрируемое в ходе контрольных тестирований в динамике наблюдения после введения ФВПФР.

Методика «PWC200». Двухступенчатая нагрузка на тредмиле разной мощности с отдыхом между нагрузками (модель велоэргометрии по критерию «physical work capacity» (PWC170) для человека), количественный критерий оценки работоспособности — расчетная величина «PWC200».

2.1.4. Определение количественных характеристик активности ФВПФР при нагрузках смешанной (анаэробно–аэробной) мощности

Для экспериментов на мелких лабораторных животных используется модель плавания крыс с грузом до отказа. В подготовительный период постановки эксперимента крыс взвешивают и маркируют. Для оценки времени плавания используют емкость из органического стекла размером 20×20×80 см, наполненную водой, расстояние от поверхности воды до края емкости не менее 10 см.

Исходным показателем работоспособности животных является максимальное время плавания с грузом, масса которого равна 7% от массы тела животного при температуре воды в емкости от +29°С до +30°С. Исходный уровень работоспособности оценивают в день, предшествующий исследованию.

Оцениваемым показателем является время плавания до отказа, регистрируемое в ходе контрольных тестирований в динамике наблюдения после введения ФВПФР.

2.1.5. Оценка влияния перспективного ФВПФР на координацию движений мелких лабораторных животных

Для экспериментов используют модель удерживания крыс на «вращающемся стержне». Установка для оценки координации движений крыс («Rota-Rod») представляет собой прибор, состоящий из вращающегося валика, разделенного на отсеки для размеще-

792

ния животных и двигателя, вращающего валик. Прибор может быть доукомплектован различными дополнительными устройствами и приспособлениями, которые позволяют в ручном или автоматическом режиме задавать параметры (скорость и ускорение) вращения валика и регистрировать время нахождения животных на стержне, а также АЦП и программным обеспечением для обеспечения совместимости прибора с ЭВМ.

Исходным показателем координации движений животных является максимальное время удержания на вращающемся стержне, которое измеряют в день, предшествующий исследованию.

Оцениваемым показателем является максимальное время удержания на вращающемся стержне, регистрируемое в ходе контрольных тестирований в динамике наблюдения после введения ФВПФР.

2.2. Оценка влияния перспективного ФВПФР на функциональное состояние сердечно-сосудистой системы

(артериальное давление, частота сердечных сокращений)

Эксперименты проводят на крысах и собаках. Для измерения артериального давления предпочтительно использовать неинвазивные методы, поскольку это позволит избежать необходимости формирования отдельных экспериментальных групп животных и проводить обследование биообъектов, тестируемых на состояние работоспособности. Частота сердечных сокращений измеряется с использованием электрокардиографа. Показатели артериального давления и частоту сердечных сокращений регистрируют до введения препарата (оценка исходного уровня) и в динамике наблюдения за животными через 1, 3, 6 ч после окончания введения препарата, а затем один раз в день на протяжении 14 суток.

Влияние ФВПФР на оцениваемые показатели выявляют по наличию достоверных отклонений среднегрупповых значений от исходного уровня и/или от показателей группы контроля в динамике наблюдения после введения ФВПФР.

2.3. Оценка влияния перспективного ФВПФР на функциональное состояние системы органов дыхания

(показатели частоты дыхательных движений, минутного объема дыхания)

Эксперименты проводят на крысах и собаках. Для измерения частоты дыхания и минутного объема дыхания предпочтительно использовать неинвазивные методы, поскольку это позволит избежать необходимости формирования отдельных экспериментальных групп животных и проводить обследование биообъектов, тестируемых на состояние работоспособности. Показатели регистрируют до введения препарата (оценка исходного уровня) и в динамике наблюдения за животными через 1, 3, 6 ч после окончания введения препарата, а затем один раз в день на протяжении 14 суток.

Влияние ФВПФР на оцениваемые показатели выявляют по наличию достоверных отклонений среднегрупповых значений от исходного уровня и/или от показателей группы контроля в динамике наблюдения после введения ФВПФР.

2.4. Выявление возможного негативного влияния перспективного ФВПФР на ориентировочно-исследовательскую и условно-рефлекторную деятельность лабораторных животных (модель умственной работоспособности человека)

Эксперименты проводят на крысах и собаках.

Для оценки влияния ФВПФР на ориентировочно-исследовательское поведение крыс используют методику «открытое поле». Регистрация показателей поведения крыс проводится в ручном режиме или с использованием специальных приборов (актографов), которые позволяют в автоматическом режиме с помощью регистрации показателей датчиков движения фиксировать элементы спонтанного поведения животных. Оцениваемыми показателями являются: латентный период выхода в центр поля, количество выходов в центр

793

поля, пройденное расстояние по горизонтали (количество пересеченных квадратов или расстояние в метрах), количество и продолжительность актов груминга, количество болюсов.

Показатели регистрируют до введения препарата (оценка исходного уровня) и в динамике наблюдения за животными после окончания введения вещества не чаще двух раз в неделю. Влияние ФВПФР на оцениваемые показатели выявляют по наличию достоверных отклонений среднегрупповых значений от исходного уровня и/или от показателей группы контроля в динамике наблюдения после введения ФВПФР.

Для оценки влияния ФВПФР на условно-рефлекторную деятельность крыс используют методику условной реакции активного (УРАИ) и пассивного (УРПИ) избегания. Методика УРАИ основана на оценке формирования и воспроизведения условного рефлекса активного избегания на отрицательном (болевом) подкреплении. Экспериментальная установка для методики УРАИ представляет собой челночную камеру, состоящую из двух отсеков. Пол камеры должен быть приспособлен для подачи на него электрического тока. С торцов камера должна быть оборудована блоком световых и звуковых сигналов.

Суть методики состоит в оценке влияния ФВПФР на воспроизведение предварительно выработанного условного рефлекса. Для этого животных из получающих исследуемое вещество и контрольных групп в течение пяти дней обучают переходу из одного отсека камеры в другой после подачи условного сигнала с одной стороны и обратному переходу после подачи сигнала с противоположной стороны камеры. На начальном этапе формирования рефлекса переход стимулируется подачей электрического тока через специальный пол. Латентный период реакции избегания с точностью до одной секунды измеряется с помощью секундомера вручную или с помощью автоматического приспособления.

Оцениваемым показателем является среднее значение латентного периода реакции избегания из десяти предъявлений условного раздражителя. За день до введения ФВПФР регистрируют исходный показатель УРАИ для каждого животного.

Влияние ФВПФР на оцениваемые показатели выявляют по наличию достоверных отклонений среднегрупповых значений от исходного уровня и/или от показателей группы контроля по результатам контрольных тестирований в динамике наблюдения после введения ФВПФР.

Методика «УРПИ» основана на оценке формирования и воспроизведения условного рефлекса пассивного избегания на отрицательном (болевом) подкреплении. Экспериментальная установка для методики УРПИ представляет собой челночную камеру, состоящую из двух отсеков с дверцей между ними. Стенки одного отсека непрозрачные (темный отсек). Пол темного отсека должен быть приспособлен для подачи на него электрического тока. Суть методики состоит в оценке влияния ФВПФР на воспроизведение предварительно выработанного условного рефлекса. Рефлекс УРПИ вырабатывается в одной пробе. Для этого животное помещают в светлый отсек и при его переходе в темный отсек закрывают дверцу и в течение 10 с на пол темного отсека подают ток. Затем дверцу открывают и дают животному возможность перейти в светлый отсек. Рефлекс считается воспроизведенным, если при контрольном тестировании крыса, помещенная в светлый отсек камеры в течение пяти минут не переходит в темный отсек.

Регистрируемым показателем является латентный период перехода в темный отсек установки, который с точностью до одной секунды измеряется с помощью секундомера вручную или с помощью автоматического приспособления.

Влияние ФВПФР на оцениваемые показатели выявляют по наличию достоверных отклонений среднегрупповых значений латентного периода от исходного уровня и/или от показателей группы контроля в динамике наблюдения после введения ФВПФР.

Для оценки влияния ФВПФР на условно-рефлекторную деятельность собак используют методику «краткосрочная память» (КП), основанную на формировании и воспроизведении собаками условного рефлекса на положительном (пищевом) подкреплении. Эксперименты проводят в отдельном помещении, оборудованном специальным стендом, представляющим собой перегородку из непрозрачного материала, на которой

794

укреплены три кормушки и три блока условных (световых и звуковых) раздражителей. Каждый блок условных раздражителей расположен над определенной кормушкой, пространство перед кормушкой отделено от соседней кормушки непрозрачной ширмой. Напротив стенда с кормушками на удалении не менее десяти метров расположена непрозрачная ширма, предназначенная для скрытия их от визуального контроля собаки на время отсрочки реакции. В подготовительный период проведения эксперимента у собак вырабатывают условный рефлекс побежки к кормушке, обозначающейся условным раздражителем. Затем собак тренируют с отсрочкой между предъявлением условного раздражителя и возможностью осуществить побежку. В течение времени отсрочки собаку заводят за непрозрачную ширму, расположенную напротив кормушек (для каждой собаки время отсрочки подбирается индивидуально).

Регистрируемым параметром тестирования является количество правильных выборов кормушки из десяти предъявлений. Исходный показатель регистрируют накануне исследования.

Рисунок 1. Алгоритм формирования вывода относительно исследуемого ФВПФР

795

Влияние ФВПФР на оцениваемые показатели выявляют по наличию достоверных отклонений среднегрупповых значений от исходного уровня и/или от показателей группы контроля в динамике наблюдения после введения ФВПФР.

Заключение

Рекомендованный комплекс методов для проведения экспериментальных исследований позволит выявить ФВПФР, которые по показателям эффективности могут быть предложены для КИ. В ходе доклинического изучения ФВПФР может возникнуть необходимость проведения дополнительных исследований, в таком случае перечень методов для углубленного изучения конкретного препарата может быть расширен.

Алгоритм формирования вывода относительно исследуемого ФВПФР представлен на рисунке 1.

Материалы оформляются в виде научного отчета в соответствии с ГОСТ 7.32-2001 и Приказом Минздравсоцразвития России от 23 августа 2010 г. № 708н «Об утверждении правил лабораторной практики» с предоставлением в таблицах как первичных данных по каждому веществу, так и статистически обработанных результатов. К отчету необходимо приложить аналитические паспорта или нормативные документы на референтные и тестируемые вещества.

Литература

1.Айрапетянц М.Г. Коррекция поведенческих и физиологических показателей неврозоподобного состояния белых крыс введением янтарной кислоты / М.Г. Айрапетянц // Журн. высш. нерв. деятельности, 2001. — № 3. — С. 360–366.

2.Арушанян Э.Б. Влияние фенамина на реакцию избегания у интактных и стриатэктомированных крыс / Э.Б. Арушанян, В.А. Батурин // Журн. высш. нерв. деятельности, 1975. — № 3. —

С.535–540.

3.Аулик И.В. Определение физической работоспособности в клинике и спорте [Текст] / И.В. Аулик 2-е изд., перераб. и доп. — М.: Медицина, 1990. — 192 с.

4.Беритов И.С. Структура и функция коры большого мозга [Текст] / И.С. Беритов М.: Наука, 1969. — 476 с.

5.Бобков Ю.Г. Фармакологическая коррекция утомления / Ю.Г. Бобков [и др]; под общ. ред. Ю.Г. Бобкова. — М.: Медицина, 1984. — 208 с.

6.Борилкевич В.Е. К вопросу о понятии феномена «Физическая работоспособность» [Текст] / В.Е. Борилкевич // Теория и практика физ. культуры, 1983. — № 9–10. — С. 18–19.

7.Бородкин Ю.С. Фармакологический анализ участия гиппокампо-ретикулярного комплекса в процессах памяти [Текст] / Ю.С. Бородкин, В.А. Крауз // Журн. высш. нервн. деят. — 1973. — № 1. — С.166–173.

8.Бурчик М.В. Физическая работоспособность в условиях 120-суточной антиортостатической гипокинезии и факторы, ее обусловливающие [Текст] / М.В. Бурчик, В.В. Зайцева, В.Д. Сонькин // Физиология человека, 2000. — Т. 26, № 4. — С. 88–93.

9.Вайнбаум Я.С. Степ-тест с субмаксимальной нагрузкой для оценки физической работоспособности [Текст] / Я.С. Вайнбаум, А.А. Аскеров // Теория и практика физ. культуры, 1970. — № 2,

С.26–28.

10.Громова Е.А. Влияние острой и хронической депривации активности катехоламинергических систем, вызванной 6-оксидофамином, на поведение крыс / Е.А. Громова, Т.П. Семенова, Н.И. Грищенко // Журн. высш. нерв. деятельности, 1985. — № 6. — С. 1133–1141.

11.Жукова Е.М. Двигательная активность и эмоциональная реактивность в тесте «открытого поля» у крыс после фармакологической стимуляции или блокады нейропептидов в терминалях первичных чувствительных нейронов / Е.М. Жукова // Журн. высш. нерв. деятельности, 2001. — № 1. — С. 114–117.

12.Купалов П.С. Ситуационные условные рефлексы у собак в норме и патологии. [Текст] / П.С. Купалов, О.Н. Воеводина, М.М. Хананашвили. — Л.: Медицина, 1964. — 386 с.

13.Крауз В.А. Влияние этимизола на краткосрочную память и умственную работоспособность [Текст] / В.А. Крауз, В.А. Сорокоумов, А.А. Скоромец // Журн. высш. нервн. деят., 1972. — № 5. — С. 907–911.

796

ГЛАВА 53

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ДОКЛИНИЧЕСКОМУ ИЗУЧЕНИЮ ЭФФЕКТИВНОСТИ

ИБЕЗОПАСНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

ИИХ КОМБИНАЦИЙ,

ОБЛАДАЮЩИХ СВОЙСТВАМИ АНТИДОТОВ

Составители: д. м. н., проф. Н.Н. Плужников; д. м. н., проф. С.В. Чепур;

д.м. н., проф. С.П. Нечипоренко; д. м. н., проф. А.Н. Петров; д. м. н. Е.А. Шибанов;

д.м. н., доц. В.Н. Быков; д. м. н. О.Л. Верстакова; к. м. н. Р.Д. Сюбаев

Введение

Антидоты (противоядия, от греч. antidoton — против данного) — биологически активные вещества, проявляющие химический или физиологический антагонизм к определенному химическому соединению или группе соединений, вызывающих при введении в токсических дозах проявления интоксикации. Первоначально разработка антидотов была сопряжена с созданием противоядий к отравляющим веществам смертельного действия (яды растений и животных, фосфорорганические вещества, цианиды и т.д.). Вместе с тем современное развитие лекарственной токсикологии определяет необходимость выявления отрицательного взаимодействия ЛС для купирования побочных эффектов и симптомов передозировки лекарств при проведении терапии хронических заболеваний.

ЛС, применяемые в качестве антидотов, способны обезвреживать яд в организме в процессе физических или химических превращений или предупреждать и устранять токсические эффекты за счет антагонизма с ядом в действии на рецепторы, ферменты и физиологические системы, что зачастую и представляет собой основу наиболее эффективных способов профилактики и терапии интоксикаций.

По сравнению с другими ЛС оценка эффективности антидотов имеет ряд особенностей. Это связано с тем, что в большинстве случаев антидоты применяются однократно и по жизненным показаниям. Из-за ограниченной возможности КИ большое значение имеют экспериментальные доказательства эффективности и безопасности этих препаратов, тщательное изучение их побочных эффектов, оценка острой и подострой токсичности. Учитывая особенности применения антидотов, особое значение придается их эффективности по предотвращению смертельных исходов интоксикации и/или снижению риска нанесения существенного ущерба здоровью отравленных.

Данные методические рекомендации регламентируют порядок и объем исследований антидотов (в том числе вид и количество лабораторных животных), методы моделирования отравлений и критерии эффективности профилактических и лечебных препаратов. В них также приведены основные термины и понятия, используемые для количественной оценки антидотного эффекта, определен перечень материалов, представляемых для получения разрешения на проведение I-ой фазы КИ. Применительно к интоксикациям конкретными веществами исследователь может уточнять порядок оценки антидотов.

1. Общие положения

На препараты, предлагаемые для КИ в качестве средств, обладающих свойствами антидотов, должны быть представлены материалы доклинических исследований, характеризующие их эффективность и безопасность.

798

Эффективность антидотов анализируют по их защитным свойствам, проявлениям специфического или группового антагонизма по отношению к различным токсическим агентам, времени наступления защитного эффекта и его продолжительности, а также по способности предупреждать структурно-функциональные изменения, возникающие во время интоксикации (полнота защитного действия).

Безопасность применения антидотов оценивают исходя из необходимости их однократного применения по жизненным показаниям, что разрешает исследования подострой токсичности соединений на протяжении 5–7 сут при ежедневном однократном введении исследуемого антидота.

Продолжительность наблюдения за животными в исследованиях по изучению эффективности и безопасности ЛС должна составлять не менее 28 сут, что позволяет оценивать полноту защитного действия противоядий и выявляет отдаленные эффекты их применения. Применение противоядий повторно или в течение нескольких дней определяет необходимость увеличения продолжительности оценки их подострой токсичности в соответствии с общими требованиями к доклиническому изучению фармакологических препаратов.

При исследовании эффективности антидотов обязательно использование групп негативного и позитивного контроля. В качестве позитивного контроля используют интактных животных, а в качестве негативного контроля — группу животных, получавших препарат сравнения. В числе препаратов сравнения применяют известные противоядия, если таковые описаны. Показатели эффективности заявляемого нового антидота должны превышать показатели эффективности препарата сравнения, а показатели жизненно важных функций животных получающей исследуемое вещество группы должны приближаться к уровню интактных животных. При отсутствии препарата сравнения регистрируемые показатели в получающей исследуемое вещество группе животных должны достоверно отличаться от таковых для группы особей, не получавших антидотной профилактики/лечения.

При предоставлении материалов доклинических исследований о специфической активности антидотов обязательным является доказательство наличия антагонистического взаимодействия предполагаемого антидота с токсическим агентом. Отсутствие специфического антагонизма не позволяет относить фармакологический препарат к антидотам, а его оценку проводят в соответствии с требованиями к средствам патогенетической терапии с определенной фармакологической активностью (противосудорожной, антиаритмической, противорвотной и т.д.).

2. Характеристика эффективности антидотов

2.1. Показатели эффективности антидотов

Эффективность антидотов оценивают по четырем показателям, определение которых обязательно для любого оцениваемого антидота.

2.1.1. Защитная эффективность — наиболее важная характеристика для оценки специфической активности антидотов. Исследования по описанию защитной эффективности антидотов проводят in vivo и in vitro.

В исследованиях in vivo защитная эффективность предлагаемых средств характеризуется следующими величинами:

—выживаемость получающих исследуемое вещество животных при отравлении ядом

всмертельных (ЛД50 и ЛД99) дозах, динамика проявления симптомов интоксикации у животных с применением антидотов и особей контрольных групп. Степень выраженности симптомов интоксикации у животных при применении антидотов и у животных контрольных групп оценивают с использованием лабораторно-инструментальных методов, набор которых определяют исходя из специфической активности яда и антидота;

—коэффициент (индекс) защиты — частное от деления среднесмертельной/среднеэффективной по определяющему эффекту дозы/токсодозы яда на фоне применения

799

антидота к аналогичному показателю в группе без использования защитного средства. Коэффициент (индекс) защиты характеризует кратность изменения дозы яда для достижения эквивалентного (50% по частоте) эффекта под влиянием антидота. Выбор среднесмертельных/среднеэффективных доз для расчета коэффициента основан на простоте, информативности и наименьшей ошибке их определения;

—антидотная мощность — количество абсолютно смертельных/абсолютно эффективных по определяющему эффекту доз/токсодоз яда, при введении которых на фоне профилактического или лечебного применения антидота регистрируют гибель 50% животных. Антидотную мощность рассчитывают как частное от деления абсолютно смертельной/абсолютно эффективной (воспроизводящейся с 99% частотой) дозы/токсодозы яда без применения антидота к среднесмертельной/среднеэффективной по определяющему эффекту дозе/токсодозе яда на фоне применения антидота. Рассматриваемый относительный показатель характеризует способность антидота переводить абсолютный эффект яда в 50% по частоте проявления. Применение этого показателя оправдано в случае, когда при применении антидота происходит не только смещение кривой летальности, но и существенно изменяется ее наклон. Антидотную мощность часто применяют для описания эффективности антидотов в исследованиях на крупных животных, а также в исследованиях на мелких лабораторных животных в случае малого тангенса угла наклона кривой летальности;

—коэффициент (индекс) гарантированной защиты — количество абсолютно смертельных/абсолютно эффективных по определяющему эффекту доз/токсодоз яда, при введении которых на фоне профилактического или лечебного применения антидота наблюдают гибель 10% животных. Индекс рассчитывают как частное от деления абсолютно смертельной/абсолютно эффективной (воспроизведение с 99% частотой) дозы/концен-

трации яда без применения антидота к ЛД10/ЭД10 по определяющему эффекту на фоне применения антидота. Коэффициент (индекс) гарантированной защиты характеризует способность антидота переводить абсолютный (воспроизводимый с 99% частотой) эффект яда в 10% по частоте проявления и отражает диапазон эффективности антидота. Допустимо рассчитывать индекс по отношению к дозам, вызывающим эффект в 16% случаев с указанием в описании методов определения.

Графическое изображение показателей эффективности антидотов приведено на рисунке 1.

Рисунок 1. Графическое изображение показателей эффективности антидотов На рисунке жирным выделена зависимость частоты проявления эффекта от дозы яда без при-

менения антидота, простой и двойной линией изображены зависимости «доза–эффект» при применении антидотов и обозначены значения, используемые для определения относительных характеристик антидота. ИЗ — индекс защиты, АМ — антидотная мощность, ИГЗ — индекс гарантированной защиты

800