4 курс / Общая токсикология (доп.) / Toxikologicheskaya_khimia_Ekzamen

16Особ-ти интерпретации рез-тов при анализе биологических объектов на содержание веществ, вызывающих одурманивание(ОС). Испол. полученные результаты, аналитик-токсиколог должен не только подтвердить или опровергнуть предположение о присутствии О,С в анализируемом образце, но и различать случаи хронического и разового использования наркотических веществ. Последнего можно достичь, если сопоставить конц-ции обнаруженного в-ва и его метаболитов. Как правило, более высокие концентрации метаболитов свидетельствуют о хроническом применении, а значительное превышение концентрации вещества над концентрацией метаболита – об остром отравлении (разовом употреблении). Для правильной интерпретации рез-тов анализа важно знание формы и способа введения. Внутривенное введение или ингаляция в начальный момент дают более высокие конц-ции в-ва в крови, чем внутримышечное, оральное, подкожное.

В случае анализа трупного материала равные концентрации, обнаруженные в печени и крови, свидетельствуют о хроническом использовании высоких доз наркотических веществ. В случае острого отравления концентрация анализируемого вещества в печени значительно превышает концентрацию его в крови. Высокие концентрации одурманивающих средств в крови на раннем этапе после внутривенного или орального введения будут соответствовать более высоким концентрациям в легких и печени, в то время как в период выведения концентрация в желчи и моче будет выше, чем в крови. О,С, основного хар-ра дают сравнительно низкие конц-ции в крови, а отношение концентраций в печени и в крови часто выше 10. Соединения кислого характера дают умеренно высокие концентрации в крови, и это отношение находится в пределах от 2 до 5. Для веществ нейтрального характера наблюдаются высокие кон-ции в крови и почти одинаковое содержание в других тканях. Для корректной интерпретации полученных данных такого биообъекта, как моча, необходимо также знание дозы, времени, способа и периодичности введения вещества, кинетики распределения, однако в случае наркотиков подобная информация редко доступна и не всегда полна. Однако можно отметить некоторые закономерности: 1. Чем выше введенная доза, тем больше вероятность их обнаружения. Высокие дозы обычно дают более высокие концентрации в плазме и моче. 2. Концентрация вещества в плазме зависит от его распределения в организме, метаболизма и выведения. Для каждого вещества его фармакокинетика индивидуальна. Концентрация наркотических веществ в моче варьируется по сравнению с плазмой и зависит от объема и рН мочи.

3. Каждое вещество сохраняется в организме в разное время и зависит от химического строения и частоты употребления.4. Поскольку конц-ция бол-ва в-в в моче (за исключением этанола) не коррелируется с их конц-цией в крови и степенью наркотического воздействия, время употребления нар-кого в-ва по концентрации в моче не может быть установлено.

18Токсикокинетика чужеродных соед-й. Общ. зак-ти распред-я в-в в орг-ме и фак-ры,влияющ. на процесс распред-я.бъем распред-я. синт-кие хим-кие соед-я вместе со многими естественными непищевыми в-вами явл. чужеродными для нормальных метаболических путей в организме и известны под общим названием чужеродных соед-ний, или ксенобиотиков.Трудности обнаружения и опр-ния чужеродных соед-ний в объектах исслед-ния, особенно в биологическом материале, в значительной степени обусловлены поведением этих в-в в живом орг-ме и трупе, т.е. их токсикокинетикой. Введенное в орг-зм в-во абсорбируется (всасывается) в жкт и поступает в кровь, которая разносит его по органам и тканям, распред-ние веществ в орг-ме происходит по-разному. Выводятся ток-кие в-ва из орг-ма частично в неизменном виде (через легкие, почки, кишечник), другая же часть подвергается различным хим-ким превращениям в печени, т.е. процессам метаболизма,или биотрансформации. В отдельных случаях только по нахождению продуктов метаболизма хим-ких в-в в исследуемых объектах можно установить наличие их предшественников, т.е. нативных в-в. Так, например, производные 1,4-бензодиазепина практически полностью превращаются в метаболиты и в виде нативных соед-ний в крови не обнаруживаются. Расширению возможностей хта немало способствует знакомство с вопросами токсикокинетики и фармакокинетики, т.е. кинетики прохождения токсического или лв через организм, включая процессы всасывания, распределения, метаболизма и выведения.Распред-ние токсич в-в в орг завис от 3 основн фактров:1пространственного 2,временного 3.концентрационого. 1.Опред. пути поступ-ния и распростран-я яда. Это связано с кровообращ. органов и тканй, поступив. к органу, зав-т от обьемного кровотока, отнесенного к ед. массы

23М-м орг. сед. Р-ции гидролиза и конъюгир-ния.

Во 2 фазе биотрансфор-ции происх. р-ции конъюгации.Эти процессы обусловл. либо предварите. образ. активн. формы метаболита в 1фазе,либо обр-нием активной формы в-в эндогенного хар-ра. Д\обр-ния акт. форм затрачив. энергия за счет разлож.АТФ. Пример:Р-ции конъюгации с глюкуроновой к-той подвергаются спирты,фенолы, алиф. иароматич. к-ты, аром. амины,тиолы,карбаматы, нек-рые герероцикл. соед-я.Схема протек-ня:

19Транспорт чужерод. соед. через мембрану орг-ма. Типы м-н.Мех-мы транспорта через мембрану. Ск-ть диффузии и з-н Фика. Посту-е чуже. в-в в орг-м, их распред-е между тканями и органами, метаболизм и выделение предполагают их проникновение через ряд биолог. мембран. Мемб. сист-мы орг-ма предств. собой подвижн. стр-ры. обр. белково-фосфолипидными комплексами, обл. полупроницаемостью.Выделяют 4 основ. типа мембран:1.М-н первого типа препят. прохожд. ионов и свободно пропускает нейтральные мол-лы. Быстрее проникают мол-лы в-в с высок. коэффиц. распред-я масло-вода(липофил. св-ва) Т.о. раствор. в липидах в-ва свободно без затраты энергии проходят через эти мембр. на основе з-нов диффузии.Крупные мол-лы белков проникают пиноцитозом. При этом м-на обр. впячивания и как бы полностью обволакивает белковую мол-лу,к-рая оказывается внутри клетки в виде пузыртка.2. Мембраны второго типа. осущес. активный транспорт и содержат опред-ные носители,к-рые обеспеч. более интенсивную диффузию.Транспорт. мол-ла обратимо соед-тся с носителем,к-рый свободно передвиг. между внутр. и наружн. повр-тями мембран.(пример, осуществ. транспорт глюкозы в эритроцитах).3. В м-нах третьего типа осущ. активн танспорт в-в против градиента конц-ции. Это связано с необх. потребл. энергии,к-рая образ. в рез-те метаболизма АТФ в самой м-не.Предполагается,что активный транспорт осуществ. через связь в-ва с носителем,к-рый претерпевает опред-ные хим-кие превращ-ния. 4. четвертого типа происходит преимущественная диффузия через поры. Транспорт веществ через биологические мембраны осуществляется путем:обычной диффузии (пассивный транспорт), энергетически активированного переноса (активный транспорт) ,фильтрацией через водные поры в мембране. Всасывание (абсорбция) чужеродных соед-ний, а также и их выделение, осуществляется, в основном, посредством простой диффузии в направлении градиента концентрации (пассивный транспорт). Диффузия – это самопроизвольный процесс выравнивания концен-ции в-ва путем перемещения из области с большей концентрацией в область с меньшей концентрацией. Через биологические мем-ны, представляющие собой липопротеиновый барьер, диффундируют молекулы в-в с высоким коэффициентом распределения масло/вода (Кр = м/в), т.е. облад. липофильными св-вами. Это относится к большинству лекарственных и наркотических средств. Скорость диффузии (СД), согласно закону Фика, прямо пропорциональна площади поверхности, через которую переносится вещество, и градиенту концентрации этого вещества: q= A\d*D(C1-C2),где К – коэф-нт диффузии (зав-т от природы вещества: молекулярной массы, пространственной конфигурации, степени ионизации и растворимости в липидах),А – площадь мембраны,D-коэ-т диффузионного в-ва,(С₁- С₂) – градиент кон-ции по обе стороны мем-ны,d – толщина мем-ны. Активный транспорт, т.е. перенос вещества против градиента концентрации (из области с меньшей концентрацией в область с большей концентрацией) не может идти самопроизвольно и характерен, гл обр, для прир соед-й (глюкозы, аминок-т и др) и чужеродн соед-й, близк по структ к прир субстратам.

20Биотранс-ция ксенобиотиков(к.) в орг-ме. Этапы биотрансф-ции. Осн.пути.Инактивация.Мет-зм и токсич-ть. Бол-во чужеродных соед-ний органической природы подвергается в орг-ме животных и человека метаболизму ( от греческого слова metabole – превращение, переход из одного состояния в другое, перемена). Мет-м чужеродных соед-ний направлен на введение в их молекулы группировок, обуслав. увеличение полярности (гидрофильности или водорастворимости молекул) д\ ускорения выведения в-в почками и уменьшения токсичности. Эти превращения осущ-ся системой энзимов, главным образом, печени. Различают микросомальные реакции, в которых участвуют ферменты микросомальной фракции печени, и немикросомальные, которые катализируются ферментами, локализованными в других местах. Основываясь на химической природе этих реакций, их более детально можно классифицировать следующим образом: Основные пути биотрансформации чужеродных соединений:Окисление: а) микросомальное – алифатическое и ароматическое гидроксилирование;- эпоксидирование,N-гидроксилирование, N,S - окисление; дезалкилирование, дезаминирование, десульфирование,б) немикросомальное – окислительное дезаминирование;-окисление спиртов, альдегидов,-ароматизация алициклических соединений. 2. Восстановление: а) вос-ние нитросоед-ний, азосоед-ний микросо- мальными ферм-тами; б) микросомальное вос-ное галогенирование; в) немикросомальное вос-ние 3. Гидролиз с участием микросомальных и немикросомальных ферментов. 4. Синтез (реакции конъюгирования):а) обр-ние конъюгатов с глюкуроновой кислотой, б) обр-ние сложных эфиров с серной и фосфорной к-тами;в) метилирование;г) ацетилирование;д) пептидная конъюгация. У бол-ва в-в мет-м протекает в два этапа. На первом этапе идут несинтетические р-ции (окисления, восстановления, гидролиза), на втором – реакции синтеза. Для того, чтобы вступить в реакции синтеза, вещество должно иметь в своей структуре соответствующие функциональные группы – NH₂, -OH, -COOH и др. Если таких групп нет, то соед-ние может их получить с помощью одной из несинтетических р-ций. Обр-щиеся в рез-те синтеза конъюгаты (парные соединения) не обладают токсичностью и легко выводятся из организма почками с мочой. Однако, конъюгаты с белковыми молекулами могут выступать в роли антигенов и приводить к выработке антител на исходное вещество. В рез-те при повторном приёме возникают аллергические реакции, вплоть до анафилактического шока.

21М-м орг-ких соед. Р-ции микросо-мального и немикросомального ок-я. Протекание зав-т от обр-я в орг-ме «активного кислорода» с участием опред. энзимов. В состав неспециф-ких энзимов,сод. в микросомах печени входит цитохром Р-450 с негемосвязанном железом и восстановл никотинамидадениндинуклеотидфосфатом (НАДФ). Энзимы явл посредниками в исполь-нии молекулярного кислорода для обр-ния активного кислорода».

Р-ция оксил-я протекают в различных направл-ях в зав-ти от строения ксенобиотиков. Чем больше углерод.атомов в радикале,тем легче идет р-ция алифатического гидроксирования и тем больше будет обр. метаболитов.

22М-м орг-ких соед. Р-ци микросомал. и немикросом. восстано-я.

24Экскреция чужер. сое-ний и их мет-тов. Выведение токс. в-в через почки.Реабсорб. и вывед. Чужеродн соед-ния и их метаболиты выд-ся с мочой и желчью, м вывод-ся и с выдых возд, слюной, слезами, молоком, потом, секрецией в жел и др разделы ЖКТ. Выд-ние почками сост из 3 различ процессов: клубочковой фил-ции, активн и пассивн канальцевого трансп.Фильтрация через клубочковую мембрану нефрона. В рез обр ультрафильтрат плазмы крови, к-рый сод чужеродн в-ва и их метаболиты приблиз в той же конц-и, как в кр. Белок плазмы и комплексы «белок –соед-е» в эт случ не фил-ся и ост в кр т.о соед-ния, прочно связанные с белками, практич не выд-ся с мочой. Активное выд-е ионизированных мол-л клетками проксимальных канальцев. Соед-ния, выд-мые путём активн трансп, высокоионизированы и м выводится в канальцевую мочу против выс конц-ных градиентов (орг к-ты и осн-я). При вывед-и лв преимущ канальцевой секрецией величина его связ-я с белками не игр сущест роли, т.к. канальцы секретируют не только своб, но и связанные с белками соед-ния. Выд-мые по мех-му активного трансп в-ва конкурируют др с др, и ск-ть выд-я одного изм при появл др. Этот феномен исп-ся в фармакологич практике для замедл выд-я лек-тв и поддержания их конц-и в кр на терапевтич ур. 3.Пассивный канальцевый транспорт. Подобно другим биологическим мембранам канальцевый эпителий, в частности, в дистальных канальцах, ведёт себя как липопротеиновый барьер, пропуская липидорастворимые, неионизированные молекулы. Поэтому липидорастворимые соединения подвергаются обратному всасыванию (реабсорбции) в кровь посредством простой диффузии в дистальных канальцах нефрона. Соединения, плохо растворимые в жирах, реабсорбируются лишь частично (например, веронал). Более того, соединения, которые в моче ионизированы в большей степени, чем в плазме крови, имеют тенденцию к диффундированию через канальцевый эпителий из крови в клубочковый фильтрат. Величина рН мочи колеблется в норме между 4,8 и 7,5 (в среднем значение рН 5,8).Когда канальцевая моча более щелочная, чем плазма, в мочу легко проникают слабые кислоты с рКа = 3-7,5 (барбитураты, салицилаты, сульфаниламиды) и, наоборот, если канальцевая моча более кислая, в неё переходят слабые основания с рКа = 7-11. При рН мочи равной рН плазмы (7,4) экскреция не будет зависеть от величины рКа. Выделение с выдыхаемым воздухом. Многие летучие соед-я, индекс липорастворимости к-рых мал, выделяются неизменёнными с выдыхаемым воздухом путём процесса, аналогичного перегонке с водяным паром. Бензол, фторбензол, хлорбензол выделяются по этому пути интенсивно, а бромбензол, нитробензол, анилин – менее интенсивно. Как правило, с воздухом выделяется нативное вещество и его ближайшие метаболиты (например, этанол и ацетальдегид). Очень редки случаи, когда в процессе метаболизма из нелетучих соединений образуются летучие. Тогда выделение также идёт через лёгкие. Выделение через желудочно-кишечный тракт играет значительно меньшую роль. Практическое значение этот путь имеет только для солей тяжёлых металлов и некоторых лекарственных и наркотических веществ (каннабиноиды на 65% выделяются с желчью, производное фенотиазина – тиоридазин – на 9%) Выделение чужеродных соед-ний в незначительной степени происходит также путём пассивного транспорта неионизированных молекул в секреты различных желёз. Нередко чужеродные в-ва и их метаболиты выделяются сразу нес-кими путями, например, этиловый спирт на 90% метаболизирует, и лишь 10% его выделяется в неизмененном виде, причём с выдыхаемым воздухом – 7%, 3% выделяется с мочой и в небольших количествах со слюной, потом и др.

25 25Г-па в-в,изол. дистил. с вод.паром.Теорет. обоснов. дистиляц. Изолир-ниев-в дистил. с вод.паром. Какие св-ва дистиллята могут ориенти-ровать химик-эксперта в составлен. плана исслед-я. С помощью перегонкой с вод.паром производится изолир-ние больш.группы ядов. и сильнодейст. в-в из биолог-кого матер-ла.К этой группы в-в относ. представ. различных групп61.Синильная кислота HCN имеет собственную низкую температуру кипения + 26,5С и занимает первое место по своей летучести с водяным паром.2.Алкилгалогениды.CHCI3 (хлороформ), CI3C-CH(OH)2 (хлоралгидрат), CCI4 (четыреххлористый углерод), C2H4CI2 (дихлорэтан) 3. Альдегиды и кетоны алифатического ряд: СН2О (формальдегид), (ацетон) 4. Алканолы CH3OH (метанол), С2Н5ОН (этанол), С3Н 7ОН (пропанол), С4Н 9ОН (бутанол ); диолы (этиленгликоль) 5. Сложные эфиры алифатического ряда:амилнитрит.амилацетат 6.Карбоновые кислоты алифатического ряда: СН3СООН (кислота уксусная) 7. Сероуглерод CS2 8. Аром-кие углеводороды: С6Н6 (бензол), Н3С-С6Н5 (толуол) 9. Нитро- и аминопроизводные ароматического рядаС6Н5NО2 (нитробензол),С6Н5NН2 (анилин). 11.Оксипроизводные ароматического ряда С6Н5ОН (фенол), крезолы, кислота салициловая (о-оксибензойная) 12. Фосфор и первые продукты его окисления и вос- ния Н3РО2 ( кислота фосфорноватистая), Н3РО3 (кислота фосфористая) 13. Жидкие алкалоидыконин, никотин.

26.27Синильная к-та и её соли. Син к-та (цианистовод-ная к-та) — газ или б/цв ж-ть, им запах горьк миндаля, легко смеш-ся с водой и с рядом орг р-лей. При — 13,3 °С затвердевает, образуя волокнистую кристаллич массу. Син к-та явл слаб к-той. В своб сост-и в прирне встр-ся. Она встр-ся в виде хим соед-й, к числу кот относ гликозиды (амигдалин, пруназин, дур-рин и др.). Соли син к-ты (цианиды) легко гидролизуются в воде. При хр-и водн р-ров цианидов при доступе диоксида углерода они разлаг-ся: KCN + H2O + СО2 → HCN + КНСО3KCN + 2H2O → NH3 + НСООК. В водных р-рах разлаг-ся не только цианиды, но и сама син к-та: HCN + 2Н2О → HCOONH4. Син к-та угнетает внутриклет железосод-щие дых ферменты. При угнет-и цитохромоксидазы синй к-той клетки орг-ма не усваивают кислород, поступающий с кровью. В рез эт наступ клеточн кислородн голодание, несмотря на то, что кровь насыщенна кислородом. Цианиды также м блокировать гемоглобин кр, нарушая его ф-ции. Метаболизм. Метаболитом син к-ты явл тиоцианат (роданид), кот обр-ся в орг-ме при конъюгации цианидов с серой под влиянием фермента роданазы. Изолир-ие син к-ты и цианидов из биол мат производ перегонкой с вод паром. Для этой цели собир 3—5 мл первого дистиллята в пробирку, содержащую 2 мл 2 %-го р-ра гидроксида натрия. Поск-ку син к-та быстро разлагается в орг-ме, исслед-е биол мат на наличие этой к-ты и ее солей жел-но провод сразу же после вскрытия трупов. При отравлении син к-той и цианидами на хим-токс-кое исслед-е берут желудок с содержимым, печень и почки. Ввиду быстрого разложения син к-ты и цианидов в тканях орг-ма эти яды можно обнаружить в содержимом желудка и не обнаружить в паренхиматозных органах. Для обнаруж-я син к-ты в дистиллятах примен неск-ко р-й, из кот наиб доказательной явл р образ-я берлинской лазури. Р обр-я берлинской лазури. От прибавления сульфата железа (II) к щел р-ру цианидов, обр-ся цианид железа (II), кот при взаимод-и с изб цианидов, а затем с сульфатом или хлоридом железа (III) обр берлинскую лазурь: HCN + NaOH → NaCN; 2NaCN + FeSO4 →Fe(CN)2 + Na2SO4; Fe(CN)2 + 4NaCN → Na4[Fe(CN)6]; 3Na4[Fe(CN)6] + 4FeCl3 → Fe4[Fe(CN)6]3 + 12NaCl. При обр-и берлинской лазури происх и побочн р-и между солями железа и щелочью (обр-ся гидроксиды железа). Для р-рения гидроксидов железа и нейтрализации изб щелочи приб к-ту до кислой р-и. Большой изб прибавленной к-ты м замедлить процесс обр-я берлинской лазури. Выполнение р-и. К неск мл дистиллята, собранного в р-р щелочи, приб 1—4 капли разб р-ра сульфата железа (II) и такой же объем разб р-ра хлорида железа (III). Смесь хорошо взбалт и нагр-ют на пламени горелки почти до кип, а затем охлажд до комн темп и приб 10 %-й р-р соляной к-ты до слабокисл р-и на лакмус. Появ-е синего осадка или син окраски указ на наличие син к-ты (цианидов) в дистилляте. Р обр-я роданида железа. Р основана на том, что при нагр-и цианидов с р-ром полисульфида аммония обр-ся роданид, от приб-я к кот р-ра хлорида железа (Ш) появл кр-красная окраска: KCN + (NH4)2S2 → KSCN + (NH4)2S; 3KSCN + FeCl3 →Fe(SCN)3 + 3KCl. Вып-е р-и. К 2—3 мл исслед-го р-ра приб 3—5 кап 10—20% р-ра полисульфида аммония и смесь упаривают на вод бане до небольш объема. К упаренной жид-ти по кап приб 8% р-р соляной к-ты до кисл р-и (по лакмусу), а затем приб 1 кап 10% р-ра хлорида железа (III). Появл-е кр-красной окраски указ на наличие цианидов в р-ре. При взбалт окраш-го р-ра с диэтиловым эфиром окраска переход в эфирный слой. Р обр-я бензидиновой сини. Соли меди (II) с цианидами обр-ют дициан (CN)2, при взаимод-и кот с водой выд-ся кислород, окисляющий бензидин. Продуктом ок-я бензидина явл бензидиновая синь: 2HCN + Cu(CH3COO)2 → Cu(CN)2 + 2CH3COOH; 2Cu(CN)2 → (CN)2 + 2CuCN; (CN)2 + H2O →2HCN.

Вып-е р-и. Для вып-я эт р-и пользуются индикаторной бумагой, смоченной смесью р-ров ацетата меди и бензидина. В колбу внос 2—3 мл исслед р-ра, к кот приб 1мл 10% р-ра винной к-ты. Колбу сразу же закрыв пробкой, к кот прикреплена влажная индикаторная бумага. Затем колбу нагрев неск мин на вод бане. При наличии син к-ты или ее солей в пробе бумага синеет. Р с пикриновой к-той. От приб-я пикриновой к-ты и щелочи к цианидам обр-ся соль изопурпуровой к-ты, имеющая красн окраску: Вып-е р-и. К 1 мл щел дистиллята приб 1мл 0,5% р-ра пикриновой к-ты и слегка нагрев на вод бане. При наличии цианидов р-р приобр красн окраску. Подобн окраску с пикриновой к-той дают и некот др в-ва (альдегиды, ацетон, сульфиты и др.). Поэт р-я с пикриновой к-той на цианиды им знач только при отсут-и цианидов в дистилляте. Обнаружение цианидов методом микродиффузии. Метод основан на р-и с пиридином и барбитуровой к-той.

28Ядовитые ГП Хлороформ (трихлорметан) СНCl3 — б/цв прозр летуч ж-ть с хар-ным зап. Смеш-ся с диэтил эфиром, этил сп и др орг р-лями, слабо Р в воде. Под влиян св, возд, влаги и темп-ры постеп разлаг. Прим. Д-е на орг. Хлороформ шир исп-ся в хим пром-ти и в хим лаб-ях как р-ль. В наст вр хлороформ в смеси с др ЛП исп для растир. Пары хлороформа легко проник в орг с вдых возд. Хлороформ д-ет на цнс, вызывая наркоз. Он накапл в тканях, богатых жирами. Метаболизм. Хлороформ, поступивший в орг, быстро исчез из кр. В теч часа через легкие выд-ся до 90 % хлороформа. Часть хлороформа подверг биотрансформации. При этом в кач метаболитов обр-ся оксид углерода (IV) и хлороводород. Обнаруж. Р отщепл хлора. При нагр хлороформа со сп р-ром щелочи происх отщепл атомов хлора, кот м обнаруж при пом р-и с нитратом серебра: CH3Cl3 + 4NaOH → 3NaCl + HCOONa + 2H2O; NaCl + AgNO3 → AgCl + NaNO3. Перед вып-ем эт р-и необх убедиться в том, что в исслед р-ре (дистилляте) и в р-вах отсут ионы хлора. Вып р-и. В проб внос исслед р-ра и 10% сп р-ра гидроксида натр. Проб остор нагр на пламени газ горелки в теч 3—5мин. После охлажд р-ра его подкисл 10% р-ром азотной к-ты до кисл р-и на лакмус и приб 1% р-р нитрата серебра. Появл бел р-й в аммиаке ос. Эт р-я не специф. Ее дают хлоралгидрат, четыреххлористый углерод, дихлорэтан и др. Р Фудживара. Р основ на взаимод-и с пиридином в присут щелочи. Обр полиметиновый краситель. При этой р-и внач обр соль пиридиния: Под влиян щелочи соль пиридиния превр в пр-е глутаконового альдегида (I), при гидролизе кот обр глутаконовый альдегид (II), имеющ окр: Эт р-я не специф. Кр хлороформа ее дают хлоралгидрат, четыреххлористый углерод, дихлорэтан, трихлорукс к-та, трихлорэтилен и др. Р с резорцином. При нагр хлороформа с резорцином в присут щелочи появл роз или малиново-кр окр. Вып р-и. В пр внос исслед р-р и 10% свежеприг р-ра резорцина в 10% р-ре гидроксида натр. После нагр проб на кипящ вод бане в теч 5—10мин появл роз или малин окр. Параллельно вып контр опыт. Эт р-ю кр хлороформа дают четыреххлористый углерод, хлоралгидрат и др. Не дает этой р-и дихлорэтан. Р обр-я изонитрила. При нагр хлороформа с первич аминами и щелочью обр изонитрил (карбиламин), имеющ неприятн запах: CHCl3 + RNH2 + 3KOH → RN=C + 3KCl + 3H2O. Эт р-ю дают четыреххлористый углерод, хлоралгидрат и др. Дихлорэтан не дает эт р-и. Р с р-вом Фелинга. При взаимод-и хлороформа со щелочью обр соль мур (формиатной) к-ты: CHCl3 + 4NaOH → HCOONa + 3NaCl + 2H2O. Р-в Фелинга, сод-щий внутрикомпл соед-е K2Na2[Cu(С4Н3O6)2], кот обр-ся при взаимод-и ионов меди (II) с сегнетовой солью, при нагр ок-ет мур к-ту и ее соли. В рез р-и выпад кр цв ос оксида меди (I): K2Na2[C4H3O6)2] + 2H2O → 2KNaC4O6 + Cu(OH)2; 2Cu(OH)2 + HCOONa → Cu2O + CO2 + 2H2O + NaOH. Кр хлороформа эт р-ю дают хлоралгидрат, формальдегид, укс альдегид. Не дают эт р-и 1, 2-дихлорэтан, дихлорэтил, четыреххлористый углерод и др. Предвар проба на хлороформ и дре хлорпроизводн в моче. Прим предвар пробу, основанную на р-и Фудживара. В пр внос 1мл мочи, приб 1мл 10% р-ра гидроксида натр и 1мл свеже-перегнан пиридина. Сод-мое проб взбалт и нагр на кипящ вод бане в теч 2мин. Появл роз или кр окр.

29ДихлорэтанClCH2—СН2Cl - тяжелая бесцветная жидкость с запахом, напоминающим хлороформ. Дихлорэтан малорастворим в воде, хорошо в большинстве органических растворителей. Стоек к действию кислот и щелочей. В организм дихлорэтан может попасть ингаляционным путем, через кожные покровы и ЖКТ. Оказывает на организм наркотическое действие. Накапливается в тканях, богатых жиром, что приводит к дистрофическим и некротическим изменениям.Признаки отравления сердечно-сосудистая недостаточность, токсический гепатит и печеночно-почечная недостаточность. Исследование объекта на дихлорэтан проводится по специальным запросам судебно-следственных органов, судебно-медицинских экспертов или врачей на основании обстоятельств отравления или смертельного исхода. Для обнаружения дихлорэтана используется метод газожидкостной хроматографии (основной) и характерные химические реакции (подтверждающее исследование). Хим метод обнаружения дихлорэтана. Дистиллят в процессе перегонки с водяным паром собирают 300 мл. Затем, используя колбу Вюрца, его повторно перегоняют и собирают 200 мл дистиллята, который дважды дефлегмируют, собирая 50, а затем 10 мл дистиллята, и исследуют реакциями.Реакция отщепления хлора. А.В.Степановым предложено проводить реакцию в присутствии четырехкратного объема этилового спирта и металлического натрия.

Хлорид-ион обнаруживают по реакции с нитратом серебра (в среде азотной кислоты). NaCI + AgN03 ► AgCli + NaN03 белый осадок. При добавлении раствора аммиака осадок растворяется. AgCI + 2NH„OH-► Ag(NH3) 2CI + 2Н20. Реакция чувствительна, неспецифична, имеет судебно-химическое значение при отрицательном результате.Дистиллят, содержащий дихлорэтан, не дает реакций, которые являются характерными дляхлороформа, хлоралгидрата, четыреххлористого углерода (не образует изонитрил, не обладает способностью восстанавливать гидроксид меди(П) в гидроксид меди(1), не образует окрашенного соединения при нагревании с резорцином в щелочной среде). Для количественного определения дихлорэтана в исследуемом объекте используется метод газожидкостной хроматографии и метод аргентометрическоготитрования.В качестве внутреннего стандарта используют н-пропиловый спирт. Расчет количества дихлорэтана проводят, используя калибровочный коэффициент, который определяют при калибровке газового хроматографа на растворах дихлорэтана разной концентрации. Аргентометрическое титрование проводят после отщепления органически связанного хлора с металлическим натрием в присутствии 4-кратного избытка этилового спирта в специальном приборе.

30Газовый хроматограф состоит из газового баллона, содержащего подвижную иннертную фазу (газ-носитель).С помощью редуктора, уменьшающего давление газа до необходимого, газ-носитель поступает в колонку, представляющую собой трубку, заполненную сорбентом или другим материалом, играющим роль неподвижной фазы. Скорость потока в зависимости от размера колонки составляет 20—50 мл/мин. Для непрерывного измерения концентрации разделяемых веществ в газе-носителе в комплекс газового хроматографа входит несколько различных детекторов.Детектор по теплопроводности (катарометр). В полость металлического блока помещена спираль из металла с высоким термическим сопротивлением (платина, вольфрам, их сплавы, никель).Детектор электронного захвата представляет собой ячейку с двумя электродами (ионизационная камера), в которую поступает газ-носитель, прошедший через хроматографическую колонку. Пользуются индексами удерживания Ковача, которые являются относительными параметрами удерживания. Стандартами служат алканы, введенные в колонку, а искомые вещества «привязывают» к ним по относительным временам удерживания. Для расчета берут два соседних алкана, один из которых элюируется до, а второй —после исследуемого соединения.Время удерживания зависит от вероятности попадания молекул вещества в подвижную фазу. При этом компоненты с высоким давлением паров и соответственно низкой растворимостью в неподвижной фазе удерживаются слабее. Напротив, вещества с низким давлением пара и высокой растворимостью элюируются медленнее.При количественной оценке результатов разделения методом газовой хроматографии большое значение имеет форма пика. Симметричность пика зависит от растворимости анализируемых веществ в жидкой (неподвижной) фазе. В свою очередь растворимость определяется зависимостью давления паров растворенного вещества от его концентрации в жидкой фазе.

31Применение ГЖХ для обнаруж-я алифатических спиртов в крови и моче. Колич определ спиртов В химико-токсикологическом анализе методом определения спиртов является метод ГЖХ-анализа, основанный на дериватизации путем перевода их в более летучие соединения - алкилнитриты. Спирты в исследуемом объекте (крови, моче) обрабатывают нитритом натрия в среде трихлоруксусной кислоты. Трихлоруксусная кислота осаждает белки крови, создает условия для образования эфиров (алкилнитритов). Химические реакцииможно представить на примере этанола: СС13СООН + NaNO3> HN02+ CH3COONa С,Н5ОН + HONO C2H5ONO + Н20 этилнитрит. В процессе хроматографирования отмечают время выхода отдельных пиков. Идентификацию вышедших из колонки веществ проводят по времени удерживания, которое рассчитывают от момента введения пробы в дозатор до момента появления максимума пика на хроматограмме.Количественное определение этилового спирта. Содержание этилового спирта в крови определяют с помощью газожидкостной хроматографии. Во флакон содержащий 50% раствора трихлоруксусной кислоты, вносят растворизопропилового спирта 4% (внутренний стандарт) икровь или мочу. Флакон закрывают резиновой пробкой, которую фиксируют. Содержимое флакона перемешивают и шприцем вводят 30% раствор нитрита натрия, встряхивают и оставляют на 1 мин. Затем отбирают 0,5 мл парогазовой фазы и вводят в прибор. По полученнойхроматограмме измеряют высотупиков «стандарта» и этилового спирта.

32Изолирование обнаружение Метиловый спирт. Мет спирт (метанол) — б/цв ж-ть, смешивающаяся во всех соотнош с водой и многими орг р-лями. Мет сп ядовит, он горит бледно-голубым некоптящим пламенем, с хлоридом кальция дает соед-е СаС12·4СН3ОН, а с оксидом бария образ кристаллы ВаО·2СН3ОН. Мет сп по запаху и вкусу почти не отл от этилового. Мет сп м поступ в орг-зм через пищевой канал, а также с вдыхаемым воздухом, сод-щим пары этого спирта. В незначит кол-вах мет сп м проник в орг и через кожу. Токс-ть мет сп завис от обстоятельств отравл-я и индивид восприимчивости. Под влиянием мет сп происх пораж-е сетчатки глаза и зрительного нерва, а иногда наступ неизлечимая слепота. Мет сп наруш ок-ные процессы и к-тно-щел равновесие в кл и тканях. В рез эт наступ ацидоз. Смерт доза принятого внутрь мет сп состт 30—100мл. Смерть наступ в рез остановки дых, отека гол мозга и легких, коллапса или уремии. Метаболизм. Наиб кол-во его накапл в печ, а затем в почках. Меньше - в мышцах, жире и гол мозге. Обнар-е мет сп. Учитывая летучесть мет сп при изолир-и его из биол мат путем перегонки с вод паром, приемник для дистиллята необх охлаждать хол водой или льдом. Дистиллят подверг двух- или трехкратной перегонке с дефлегматором. Только после дефлегмации в дистилляте опр-ют наличие мет сп. Р образ-я метилового эфира салициловой к-ты. В пробирку внос 1мл дистиллята или др исслед-го р-ра, приб 0,03—0,05 г салиц к-ты и 2 мл конц серной к-ты, а затем смесь осторож нагрев на пламени горелки. При наличии мет сп в исслед-мом р-ре ощущается хар-ный запах метилового эфира салиц к-ты: Эта р-я не специфична, т.к этиловый спирт с салиц к-той образ этиловый эфир, запах кот напомин запах мет эфира салиц к-ты. Ок-е мет сп. Прежде чем приступить к ок-ю мет сп до формальдегида, необх провер наличие этого альдегида в исслед-мом р-ре. Для ок-я мет сп в формальдегид примен перманганат калия или др ок-ли: 5СН3ОН + 2КMnО4 + 3H2SО4 → 5НСНО + 2MnSO4 + K2SO4 + 8Н2О. При взаимод-и ионов марганца с изб перманганата калия м обр-ся оксид марганца (IV): 3Mn2+ + 2MnO4- + 2Н2О → 5MnO2 + 4Н+. Для связывания изб перманганата калия и оксида марганца (IV) приб сульфит натрия или др вос-ли (гидросульфит натрия, щавелевую к-ту и др). 1. К 2мл исслед-го р-ра или дистиллята приб 1мл р-ра перманганата калия, содержащего фосфорную к-ту (смесь 100мл 3% р-ра перманганата калия и 15мл 87% р-ра фосфорной к-ты). Жид-ть нагрев при 50^оС на вод бане в теч 10мин, затем для удаления изб ок-ля приб 1мл 5% р-ра щавелевой к-ты в разб (1:1) серной к-те. 2. В микропробирку внос каплю исслед р-ра, приб каплю 5% р-ра фосфорной к-ты и кап 5% р-ра перманганата калия. Жид-ть тщат перемеш в теч 1мин, приб небольш кол-во твердого гидросульфита натрия, а затем содержимое пробирки взбалт до обесцвеч-я. Если в пробирке появится нер-мый бурый осадок оксида марганца (IV), то еще приб кап р-ра фосфорной к-ты и немного гидросульфита натрия. Обнаруж-е мет сп после его ок-я. Р-я с хромотроповой к-той. Хромотроповая к-та (1,8-диоксинафталин-3,6-дисульфокислота) с формальдегидом в присут серной к-ты дает фиол окраску. При взаимод-и формальдегида с хромотроповой к-той конц серная к-та одновр явл водоотнимающим средством и ок-лем. Внач серн к-та выз конденсацию формальдегида с хромотроповой к-той, а затем ок-ет образовавшийся продукт конденсации:

Не дают этой р-и этиловый, пропиловый, бутиловый, амиловый и изоамиловый спирты. Метод микродиффузии. Метод основан на ок-и мет сп до формальдегида. При взаимод-и формальдегида с хромотроповой к-той появл фиол окраска. В наружную камеру прибора для микродиффузии внос 1мл кр или мочи либо 1г гомогената ткани. Затем в наружную камеру внос 1мл насыщ р-ра карбоната калия. Во внутр камеру прибора внос 3мл 10% р-ра серной к-ты. Прибор закрыв крышкой и оставл на 3ч. К 1мл р-ра, взятого из внутр камеры, приб кап 5% р-ра перманганата калия и оставл на 10мин, а затем приб 1-2 кап насыщ р-ра гидросульфита или сульфита натрия. После исчезновения окраски перманганата калия к жид-ти приб 0,2мл 0,5% р-ра хромотроповой к-ты в конц серной к-те. Ж-ть в пробирке охлажд в ледяной воде, а затем приб 4мл конц серной к-ты и нагрев пробирку на кипящей вод бане в теч 15мин. Появ-е красной или фиол окраски жид-ти указ на налич мет сп в исслед пробе.