2 курс / Нормальная физиология / VII_Сибирский_съезд_физиологов_Афтанас_Л_И_,_Труфакин_В_А_,_Манчук

ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ МАГНОЦЕЛЛЮЛЯРНЫХ И ПАРВОЦЕЛЛЮЛЯРНЫХ ЗРИТЕЛЬНЫХ КАНАЛОВ

ПРИ ШИЗОФРЕНИИ

1,2 И.И. Шошина, 1 Ю.Е. Шелепин, 3 Н.Б. Семенова, 1 С.В. Пронин 1Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН, Санкт-Петербург,

2Сибирский федеральный университет, 3НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН,

Красноярск, shoshinaii@mail.ru, yshelepin@yandex.ru

Шизофрения сопровождается характерными нарушениями сенсорнокогнитивной сферы (Turetsky et al., 2003). В настоящее время отмечается всплеск интереса к изучению природы этих нарушений (Keri et al., 2005; Butler et al., 2008; Kantrowitz et al., 2009). По данным подавляющего боль-

шинства исследований нарушение сенсорно-перцептивных процессов у больных шизофренией связано с дисфункцией магноцеллюлярных зрительных каналов. Однако отдельные работы и наши исследования свидетельствуют о нарушении функций как магноцеллюлярных, так и парвоцел-

люлярных каналов (Doniger et al., 2002; Kantrowitz et al., 2009; Shoshina et al., 2011). Известно, что нейроны магноцеллюлярной ретино-стриарной системы более чувствительны к низким пространственным частотам. Далее на пути от затылочной к фронтальной коре эту информацию преимущественно используют нейроны дорзального пути. Парвоцеллюлярные каналы более чувствительны к высоким пространственным частотам, а информацию далее используют преимущественно нейроны вентрального пути высших отделов (Kaplan,1986; Merigan, Maunsell, 1993). Наши измерения способности больных наблюдателей к оценке относительных размеров изображений парных фигур Мюллера-Лайера, подвергнутых вейвлетной фильтрации, содержащих узкий спектр либо высоких, либо низких пространственных частот, свидетельствуют, что на начальной стадии клинических проявлений шизофрении имеет место нарушение работы механизмов, связанных с парвоцеллюлярными зрительными каналами, с сохранением функций магноцеллюлярных каналов. Тогда как у пациентов с хронической стадией шизофрении имеет место нарушение работы высших зрительных механизмов, связанных как с парвоцеллюлярными, так и магноцеллюлярными первичными зрительными каналами (Shoshina et al., 2011). Настоящее исследование предпринято с целью получить дополнительные данные о функциональном состоянии первичных магно- и парвоцеллюлярных зрительных каналов у больных шизофренией. Использовали метод визоконтрастометрии (Шелепин и др., 1985), позволяющий измерять методом «лестницы» (Бардин, 1976) пороги контрастной чувствительности при различной пространственной частоте тестовых изображений. В исследовании участвовали 20 психически здоровых наблюдателей и 38 больных шизофренией с диагнозом F20.0 по классификации МКБ–10. Среди больных: 20 пациентов с начальной стадией клинических проявлений и 18 человек с хронической стадией шизофрении. На экране монитора 17’ на рас-

620

стоянии 4 м до испытуемого предъявляли элементы Габора с пространственной частотой 0,45; 3,6 и 17,9 цикл/градус. Испытуемому сообщали, что на экране будут появляться решетки разной частоты. Задача – нажать на кнопку мыши, когда решетка появится и держать до тех пор, пока она не исчезнет, затем отпустить кнопку и дождаться, когда решетка вновь появится. Установлено, что у больных шизофренией с начальной стадией клинических проявлений снижена контрастная чувствительность в области высоких пространственных частот, тогда как у хронически больных – в области и высоких, и низких частот. Таким образом, получено подтверждение нарушения у больных шизофренией работы механизмов, связанных как с парвоцеллюлярной, так и с магноцеллюлярной зрительной системами. При этом на стадии ранних клинических проявлений имеет место нарушение работы механизмов, связанных только с парвоцеллюлярными зрительными каналами. Более того, мы предполагаем о вовлечении в патологический процесс самих магно- и парвоцеллюлярных каналов первичных (ретино-стриарных) каскадов зрительной системы.

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ МАГНИТНО-РЕЗОНАНСНАЯ ТОМОГРАФИЯ И НЕЙРОНАУКИ

М.Б. Штарк НИИ молекулярной биологии и биофизики СО РАМН,

НПФ Компьютерные системы биоуправления,

Международный томографический центр СО РАН, Новосибирск, mark@soramn.ru

1.Результаты в области исследований механизмов реального мозга, как известно, базируются на а) экспериментальных животных моделях, б) интраскопическом (статическом) и, чаще всего, инвазивном изучении мозга человека (КТ, ПЭТ и т.п.), в) психофизиологических исследованиях, построенных на дедуктивном и индуктивном тестировании, г) оценке электрической активности «открытого» (при нейрохирургических вмешательствах) или интактного мозга человека и д) анализе принципов деятельности мозга при поражении определенных его участков (проекций функций, центров). Сумма полученного таким образом фактического материала экстраполируется в область активной деятельности мозга здорового (или больного) человека.

2.фМРТ, обладая исключительным пространственным разрешением, неинвазивностью и качественно иными физическими принципами, позволяет вплотную подойти к прямому изучению работы мозга в режиме online. Направления исследований с использованием фМРТ для анализа мозговой деятельности распределены следующим образом.

2.1.Локализация (проекции) сенсомоторных, речевых, зрительных функций. Работы эти носят характер динамической морфологии и ценны обнаружением новых «мозговых функциональных территорий».

2.2.Нейроонтогенез.

621

2.3.Экспериментальные модели патологии нервной системы.

2.4.Сравнительный анализ данных, полученных средствами фМРТ и параллельной или последовательной ЭЭГ, совмещая исключительное пространственное разрешение фМРТ с хорошими временными характеристиками современной компьютерной ЭЭГ.

2.5.Фармакологическая фМРТ.

2.6.Т.н. «навигационные» исследования, т.е. определение границ речевых и двигательных центров на предоперационном этапе.

3. Сегодня центр исследований, в которых альтернативным инструментом является фМРТ, смещается в сторону а) когнитологии, т.е. нейродинамики когнитивно-мнестических функций и б) «проектирования» принципиально новых средств нейрокоммуникаций с целью использования психофизиологического ресурса человека для управления «внешней средой», т.н. проблема brain computer interface - BCI.

3.1.В формуле BCI главным компонентом является биоуправление, т.е. технология произвольной саморегуляции деятельности головного мозга, ключевым механизмом которого является адаптивная обратная связь, сформированная в компьютерном контуре. Управление обычно неосознаваемыми физиологическими параметрами носит ярко выраженный центральный характер. Сформировавшийся вновь мозговой механизм в виде т.н. «ментальной матрицы», проявляемой средствами фМРТ, и является предметом нашего исследования и практического использования для управления внешними инструментами.

Анализируя существующие публикации, приходишь к однозначному выводу о том, что сегодня нет и пока не может быть канонического представления о работе реального человеческого мозга on-line при выполнении им сложных когнитивных и мнестических операций, т.е. того, чем этот мозг привык заниматься большую часть времени.

СПЕКТРАЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ВНУТРИМОЗГОВОЙ ЭЭГ ВО ВРЕМЯ ЭПИЛЕПТИЧЕСКОГО СТАТУСА У МОРСКИХ СВИНОК

Л.В. Шубина, А.Т. Бондарь Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино,

shubina.lu@gmai.com

Височная эпилепсия является одной из распространенных форм эпилепсии, механизмы которой до конца не известны, особенно опасными остаются генерализованные конвульсии (эпилептический статус), ассоциируемые с тяжелым состоянием и смертностью. На сегодняшний день эпилептический статус (ЭС), вызываемый введением каиновой кислоты (КК), является широко используемой и адекватной моделью височной эпилепсии. Целью данной работы был анализ патологической активности в структурах мозга во время ЭС.

622

Работа была выполнена на бодрствующих морских свинках. (n=9). Во время предварительной хирургической операции над боковым желудочком мозга устанавливали канюлю для микроинъекций КК, в гиппокамп, медиальную септальную область, миндалину и энторинальную кору вживляли регистрирующие монополярные электроды. Регистрация внутримозговой ЭЭГ проводилась до (в течение 3-4 дней) и во время (4-6ч) ЭС, вызванного введением КК (0.4мгр/0.7мкл).

Спектральный анализ полученных ЭЭГ показал, что патологическая активность во время ЭС может развиваться по трем различным последовательным сценариям. Для первого сценария характерна удвоенная по сравнению с фоном частота (около 4 Гц), а также наличие активности на 3032Гц, модулированной 4Гц. Второй сценарий представляет собой промежуточную фазу развития ЭС. Для него характерны скачкообразные переходы между тремя состояниями: 1) фоновым, почти периодическим с частотой 4-5Гц и наличием одной гармоники в спектре; 2) скачкообразным снижением частоты в два раза с одновременным изменением формы сигнала и появлением значительного количества гармоник в спектре; 3) скачкообразным удвоением частоты (до 4-5Гц) и также значительным количеством гармоник в спектре. И, наконец, третий сценарий отражает наибольшую выраженность электрографических судорог. В нем наблюдаются так называемые быстрые рипплз-осцилляции частотой 120-240Гц, возникающие на фоне 30Гц ритма.

Полученные данные расширяют понимание процессов формирования патологической активности при эпилепсии, а также могут способствовать развитию представлений о механизмах генерации ритмической активности в структурах мозга.

Работа подержана грантами МК-3796.2012.4, ВШ 850.2012.4.

ОБЪЕМ-ЗАВИСИМАЯ РЕГУЛЯЦИЯ Са2+-АКТИВИРУЕМЫХ КАЛИЕВЫХ КАНАЛОВ МЕМБРАНЫ ЭРИТРОЦИТОВ

В ПРИСУТСТВИИ ПЕРЕКИСИ ВОДОРОДА

О.Г. Шукшина, И.В. Петрова

Сибирский государственный медицинский университет, Томск, Olya.lya@mail.ru

Цель исследования: изучить влияние перекиси водорода на активность Са2+-активируемых калиевых каналов мембраны эритроцитов в условиях сжатия клеток.

Задачи исследования:

1.Изучить влияние гиперосмотической среды на активность Са2+-активируемых калиевых каналов эритроцитов человека;

2.Исследовать влияние перекиси водорода на активность Са2+-активируемых калиевых каналов эритроцитов человека;

623

3.Изучить совместное действие гиперосмотической среды

иперекиси водорода на активность Са2+-активируемых калиевых каналов эритроцитов человека;

Исследования проводили на венозной крови практически здоровых доноров-добровольцев в возрасте 20-25лет. Кровь забиралась из локтевой вены утром натощак в пробирки с гепарином (25 ед/мл крови). После центрифугирования (1000g, 5 мин, 40С) плазму и клетки белой крови удаляли, а эритроциты дважды промывали 3 частями изоосмотического раствора NaCl (150 мМ), содержащего 5 мМ Na-фосфатный буфер (рН 7,4) при тех же условиях центрифугирования. Упакованные эритроциты переносили в среду N (150 мМ NaCl, 1 мМ KCl, 1 мM MgCl2, 10 мM

глюкоза) содержащую 80 мкМ СаCl2, и использовали для измерения мембранного потенциала. Для исследования Са2+-активируемых калиевых каналов использовали метод регистрации мембранного потенциала в суспензии эритроцитов по изменениям рН среды инкубации в присутствии протонофора. Метод основан на том, что в этих условиях распределение протонов зависит от мембранного потенциала. Са2-активируемую калиевую проводимость мембраны эритроцитов оценивали по амплитуде гиперполяризационного ответа (ГО) эритроцитов, который получали в ответ на добавление 1 мкМ кальциевого ионофора А23187. Для сжатия клеток упакованные эритроциты помещали в среды, содержащие 100 или 200 мМ сахарозы.

Добавление микромолярных концентраций перекиси водорода (1, 2, 3, 4, 5, 8 мкМ) в среду инкубации эритроцитов не приводило к изменению амплитуды ГО. Сжатие эритроцитов вследствие помещения их в среды с повышенной осмолярностью (420 и 520 мосм) вызывало достоверное увеличение исследуемого параметра в среднем на 25% от исходного значения. Это указывает на повышение Са2+-зависимой калиевой проницаемости мембраны эритроцитов. Предположительно, обнаруженный эффект связан с регуляторным воздействием белков цитоскелета клеток, в частности, спектрина. Внесение перекиси водорода (1 мкМ) в среды инкубации с повышенной осмолярностью вызывало статистически значимое снижение амплитуды ГО на 30% по сравнению с результатами, полученными при сжатии клеток в отсутствие перекиси водорода. Приведенные результаты свидетельствуют, что в данных условиях Са2+-зависимая калиевая проницаемость мембраны эритроцитов снижалась.

Наиболее вероятной причиной обнаруженного эффекта является воздействие перекиси водорода на белки цитоскелета, что приводит к снижению Са2+-зависимой калиевой проницаемости мембраны эритроцитов.

Таким образом, в настоящем исследовании обнаружено регулирующее влияние перекиси водорода на Са2+-зависимую калиевую

624

проницаемость мембраны эритроцитов в условиях сжатия клеток.

ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ НЕЙРОФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ И СУБЪЕКТИВНЫХ ПРОЦЕССОВ В СИСТЕМНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ МОЗГА

Е.А. Юматов Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова,

Москва, eayumatov@mail.ru

Существует огромный «провал» между знаниями в области нейрофизиологии и представлениями о психических функциях мозга (П.К. Анохин, 1969; А.Н. Леонтьев, 1975; Н.П. Бехтерева, 1990; Т. Нагель, 2001; К. Поппер, 2008).

Происхождение субъективного состояния связано с фундаментальными свойствами живого мозга, который является особым видом материи, имеющим свои собственные физические законы и специфические поля. Этот тезис имеет принципиальное значение для понимания сути субъективного.

В наших исследованиях проведена прямая объективная регистрация субъективного состояния человека (Е.А. Юматов, 2010, 2011). Показано, что субъективное состояние можно выявить только с помощью и при участии живых структур. Обнаружено дистанционное влияние субъективного состояния человека на физико-химические показатели крови (Е.А. Юматов, Е.В. Быкова, Р. Джафаров, 2012). Установлено, что субъективные состояния человека можно дистанционно объективно регистрировать. Показано существование «психогенного поля», отражающего субъективное состояние головного мозга человека. Высказано представление о специфических физических явлениях в мозге, которые не могут быть в неживой природе. Описано взаимодействие нейрофизиологических и субъективных процессов в системной организации целенаправленного поведения. Предложена парадигма, рассматривающая возможность существования уникальных для живого мозга физических явлений и мозговых полей, и роль их в происхождении субъективного состояния. Проведена широкая научная экспертиза достоверности полученных результатов при участии известных специалистов в области физиологии и физики.

Исходя из системной организации деятельности мозга (П.К. Анохин, 1969; К.В. Судаков, 2011) и проведённых нами исследований прямой регистрации субъективного состояния человека, мы пришли к изложенным ниже основным постулатам, характеризующим взаимосвязь субъективных и нейрофизиологических процессов в головном мозге человека.

Основные постулаты:

Субъективное состояние мозга: мысль, сознание, эмоции проявляется не в корпускулярной организации живой структуры, а в её специфической полевой форме: «психогенное поле».

625

Субъективные состояния способны воспринимать только живые структуры.

Биологические поля, создаваемые в организме, могут оказывать обратно направленное влияние на структурно-функциональные процессы в нём («биологическая самоиндукция»).

Субъективное, духовное состояние мозга возникает при взаимодействии и взаимосвязи нейрофизиологических процессов и специфического для мозга (психогенного) биологического поля.

Психоневрологические заболевания могут первично возникать

всубъективных процессах и уже вторично проявляться в различных струк- турно-функциональных нарушениях.

Физика живого мозга - новое направление науки, рассматривающей уникальные физические явления, присущие только живому мозгу и отсутствующие в неживой природе.

РОЛЬ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ В РЕГУЛЯЦИИ АДАПТИВНЫХ И РЕПАРАТИВНЫХ ПРОЦЕССОВ

Б.Г. Юшков Институт иммунологии и физиологии УрО РАН, Уральский Федеральный университет

имени первого Президента Российской Федерации Б.Н. Ельцина, Екатеринбург, b.Yushkov@iip.uran.ru

Понятие «иммунофизиология» достаточно прочно вошло в физиологию. Вместе с тем встал вопрос об изучении роли отдельных элементов иммунной системы в адаптивных и компенсаторных процессов в условиях патологии.

Важную роль в адаптивных реакциях организма к действию экстремальных факторов играют макрофаги, прежде всего кроветворной ткани. Так при действии на организм гематотропных факторов – гипоксии и кровопотери в костном мозге резко возрастает содержание этих клеток. В случае блокады их фагоцитарной активности коррагенаном при кровопотере показатель увеличивается более значительно, в то время при гипоксической гипоксии реакция выражена слабее. При блокаде фагоцитарной активности макрофагов количество эритробластических островков при гипоксии не меняется, а при кровопотере даже снижается. При этом плотность макрофагов в костном мозге в ответ на гипоксию не изменяется, а при кровопотере резко увеличивается.

В условиях действия на организм экстремальных факторов, влияющих на гемопоэз, отмечаются значительные изменения количества и функциональной активности тучных клеток. Для большинства экстремальных факторов наиболее типичной реакцией со стороны тучных клеток костного мозга является различное по степени выраженности уменьшение количества всех типов клеток. Исключение составляет кровопотеря и воспаление, при котором показатель увеличивает

626

При сравнении данных морфофункциональной активности тучных клеток из различных органов: кожи, желудка, кишечника, печени, надпочечников, тимуса и костного мозга, установлено, что при иммобилизационном стрессе отмечается тотальная дегрануляция мастоцитов во всех тканях. При этом, количество тучных клеток в одних тканях (тимус, костный мозг) уменьшается, а в других (печень, кишечник, желудок, надпочечники) возрастает.

Перераспределение подвижных клеток между тканями при стрессе можно рассматривать в качестве важного компонента адаптационного синдрома. Так лимфоциты мигрируют в костный мозг, а, согласно данным наших исследований тучные клетки осуществляют миграционные процессы в противоположном направлении: из костного мозга и тимуса в периферические ткани и органы.

Действие многих экстремальных факторов часто сопровождается повреждением того или иного органа. Изучая морфогенетическую функцию иммунной системы на фоне применения различных иммуномодуляторов, мы пришли к выводу о макрофагзависимых и макрофагнезависимых механизмах регуляции репаративных процессов.

Воспаление, в развитии которого иммунная система играет ведущую роль, стимулирует восстановление характерных для поврежденного органа или ткани структур. Этот факт ставит вопрос о перспективах использования процессов, развивающихся в зоне воспаления для формирования протезов для аутопластики.

Отталкиваясь от этой идеи, предложен метод использования образующейся вокруг очага воспаления соединительнотканной капсулы для пластики различных тканей. Эффективность такого подхода показана при протезировании артериальных и венозных сосудов, костной ткани и мочевого пузыря.

РОЛЬ СИСТЕМЫ ОКСИДА АЗОТА В РЕГУЛЯЦИИ СЕКРЕЦИИ МЕДИАТОРА В УСЛОВИЯХ ВЫСОКОЧАСТОТНОЙ АКТИВНОСТИ СИНАПСА

О.В. Яковлева, М.У. Шафигуллин, Г.Ф. Ситдикова

Казанский приволжский федеральный университет, Казань, a-olay@yandex.ru

Вопытах на диафрагмальной мышце мыши с использованием электрофизиологических и флуоресцентных методов исследовали влияние до-

нора оксида азота (S-нитрозо-N-ацетил-DL-пеницилламин, SNAP) и блокатора синтеза оксида азота (NG-нитро-L-аргинин метилового эфира, LNAME) на динамику секреции медиатора и процессы экзоцитоза синаптических везикул в двигательном нервном окончании при длительном высокочастотном раздражении.

Вусловиях одиночной стимуляции нерва при внеклеточной регистрации ТКП добавление SNAP (100 мкМ) приводило к достоверному

627

уменьшению амплитуды ТКП (81.9 % ± 2.5 %) по сравнению с контролем (n=9, p<0.05), в то время как LNAME (100 мкМ) в тех же условиях не приводил к изменению вызванной секреции медиатора (n=10). Амплитуда

ичастота МПКП не изменялись не при действии донора оксида азота, ни при аппликации LNAME.

Вусловиях высокочастотной стимуляции (20 Гц, 3 мин) регистрировали ПКП с помощью внутриклеточных микроэлектродов. Затем анализировали динамику амплитуд ПКП во время высокочастотного раздражения. В контроле в течение первых 10-15 сигналов происходил быстрый спад амплитуды ПКП до 46±2% и затем наблюдалось более медленное снижение – до 33±3% к концу первой и до 20±2% - к концу третьей минуты стимуляции (n=13). В условиях предварительного выдерживания нервномышечного препарата в растворе, содержащем SNAP (100 мкМ) начинался более быстрый спад амплитуды ПКП и на 10-15 сигнале составил 40±3%, к концу первой минуты стимуляции – 21±4% и к концу третьей минуты - 10±2% (n=11, p<0.05) относительно амплитуды первого сигнала. Таким образом в присутствии донора оксида азота наблюдалась более выраженная депрессия амплитуд ПКП, чем в контроле. В присутствии LNAME (100 мкм) начальное изменение амплитуды ПКП в течение первых 10-15 сигналов не отличалось от контроля. Однако затем происходило замедление депрессии, и уже к концу первой минуты стимуляции амплитуда ПКП составила 43±3%, а к концу третьей минуты стимуляции - 29±3% (n=13, p<0.05) относительно амплитуды первого сигнала.

Для выявления динамики экзоцитоза синаптических везикул регистрировали уменьшение интенсивности свечения предварительно загруженных нервных терминалей. В контроле спад интенсивности свечения нервных окончаний к концу первой минуты стимуляции составил 60±4 %,

ик третьей минуте - 49±3 % по отношению к начальному уровню свечения (n=8). Выдерживание нервно-мышечного препарата до начала стимуляции в растворе, содержащем SNAP усилило спад интенсивности свечения терминалей к концу первой минуты стимуляции свечение составило 46±4 %, и к третьей минуте - 34±4 % по отношению к начальному уровню свечения (n=6, p<0.05). LNAME, не влиял на спад интенсивности свечения в течение первых 40 сек раздражения, после чего спад интенсивности свечения замедлялся: к первой минуте стимуляции интенсивность свечения составила

72±2 %, а к третьей минуте – 65±2 % (n=7, p<0.05).

На основании полученных данных можно предположить, что оксид азота участвует в регуляции высокочастотной депрессии освобождения медиатора, замедляя процесс рециклизации синаптических везикул.

Работа выполнена при поддержке № НШ-4670.2012.4.

628

ВЛИЯНИЕ ЭСТРАДИОЛА НА ВЕС ТЕЛА, ПОТРЕБЛЕНИЕ ПИЩИ И УГЛЕВОДНО-ЖИРОВОЙ ОБМЕН У МЫШЕЙ C57BL/6J

С МУТАЦИЕЙ YELLOW В ЛОКУСЕ АГУТИ

Т.В. Яковлева, Е.Н. Макарова, А.Ю. Казанцева, Н.М. Бажан Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск, jakov@bionet.nsc.ru

Для изучения механизмов развития диабета второго типа и возможных подходов купирования данного заболевания используют генетические модели лабораторных животных. Одной из таких моделей являются мыши C57Bl/6J, несущие мутацию yellow в локусе агути (Ay/a-мыши). Темпы развития метаболических нарушений у Ay/a-самок зависят от эндокринного статуса: в препубертатный период диабет 2 типа у Ay/a-мышей не развивается, тогда как после полового созревания, на фоне активации функции яичников и увеличения уровня эстрадиола в крови, у Ay/a-самок развивается диабет 2 типа. На основании ранее полученных данных мы предположили, что мутация yellow нарушает регуляторное влияние эстрадиола на углеводно-жировой обмен. Для исследования этой гипотезы мы изучали влияние овариэктомии и длительного введения эстрадиола на вес тела, потребление пищи, толерантность к глюкозе, а также на уровень в крови глюкозы, инсулина и этерифицированных жирных кислот (ЭЖК) у Ay/a- самок.

В работе использовали самок мышей линии C57Bl/6J двух генотипов: мышей с мутацией yellow в локусе агути (Ay/a-самки) и их сибсов с мутацией nonagouti в локусе агути (а/а-самки) как метаболический контроль. Было три экспериментальные группы: ложно оперированные и овариэктомированные, получавшие подкожно инъекцию растворителя (масло) и овариэктомированные, получавшие подкожно инъекцию эстрадиола (1 мкг/животное/100 мкл три раза в неделю) на протяжении трёх недель. Овариэктомию проводили используя интра-абдоминальный подход. Толерантность к глюкозе определяли у самок, голодавших 12 часов (ночь), после нагрузки глюкозой (1 мг/г веса тела).

Мы показали, что мутация yellow не оказывала влияния на эндокринную функцию яичников: уровень эстрадиола в крови у Ay/a-самок не отличался от контроля. У Ay/a-самок, как и у а/а-самок, эстрадиол участвовал в регуляции веса матки: вес матки уменьшался после овариэктомии (p<0.001) и увеличивался после длительного введения эстрадиола (p<0.001). У Ay/a-самок, как и у а/а-самок, овариэктомия повышала, тогда, как длительное введение эстрадиола не влияло на потребление пищи и вес тела. У Ay/a- и а/а-самок овариэктомия в равной степени повышала, а введение эстрадиола не влияло на уровень глюкозы в крови после ночного голодания (p<0.05), который определяется продукцией глюкозы печенью и чувствительностью печени к инсулину. Однако, у Ay/a-самок, в отличие от а/а самок, введение эстрадиола не влияло на уровень в крови инсулина, и показатели метаболизма глюкозы (толерантность к глюкозе и уровень

629