2 курс / Нормальная физиология / VII_Сибирский_съезд_физиологов_Афтанас_Л_И_,_Труфакин_В_А_,_Манчук
.pdfОтведение электрической активности и ее анализ осуществлялся при использовании компьютерной программы Datapac (Run Technologies,
Mission Viejo, CA, USA).
При исследовательском поведении в контроле у животных наблюдался высоко синхронизованный тета ритм, затрагивающий как гиппокамп, так и септальную область. Наблюдалась высокая корреляция в тетадиапозоне между септумом и остальными исследуемыми структурами.
Во время развития эпилепсии показан сдвиг активности в области тета-диапозона в область более высоких частот по сравнению с контролем. В период судорожной активности показано увеличение корреляции между структурами. Эти данные вносят вклад в понимание механизмов развития эпилепсии.
Работа подержана грантами МК-3796.2012.4, РФФИ № 11-04- 01832-а, ВШ 850.2012.4
ВЛИЯНИЕ ГЛЮКОКОРТИКОИДОВ НА ЭКСПРЕССИЮ МОЗГОВОГО НЕЙРОТРОФИЧЕСКОГО ФАКТОРА (BDNF)
В ОТДЕЛАХ ГОЛОВНОГО МОЗГА НЕОНАТАЛЬНЫХ КРЫС
В.В. Музыка 1, П.Н. Меньшанов 2, Н.Н. Дыгало 1,2 Новосибирский государственный университет,1
Институт цитологии и Г СО РАН, Новосибирск2, vv1988m@gmail.com
Мозговой нейротрофический фактор (matBDNF) и его белокпредшественник (proBDNF) являются важными регуляторами формирования мозга в онтогенезе. Дефинитивная экспрессия BDNF зависит от стероидных гормонов стресса, действующих через минералокортикоидные (MR) и глюкокортикоидные (GR) рецепторы, уровень экспресии которых существенно различается в отделах формирующегося головного мозга. Кроме того, если matBDNF способствует выживанию клеток, то proBDNF индуцирует апоптоз.
Поэтому для установления возможных причин наблюдаемых периодов пиков пролиферации и гибели клеток, специфичных для формирования каждого из отделов мозга, представляется важным выяснить региональные особенности соотношения proBDNF и matBDNF в отделах мозга, а также определить влияние глюкокортикоидов на их экспрессию в ранние периоды жизни.
В работе методом иммуноблота исследовали уровни matBDNF и proBDNF в гиппокампе, коре, стволовой части мозга и мозжечке 3- и 8- дневных крысят в базальном состоянии, а также после введения природного глюкокортикоида гидрокортизона, взаимодействующего как с GR, так и с MR, и его синтетического аналога дексаметазона, селективно активирующего лишь GR. У 3-дневных животных не было отмечено достоверных различий по экспрессии proBDNF и matBDNF между отделами мозга. У 8- дневных крысят уровень matBDNF был достоверно ниже в коре, и досто-
370
верно выше в стволе мозга по сравнению со всеми другими отделами. Отношение matBDNF/proBDNF также было существенно сниженным в коре, по сравнению с другими структурами мозга. На 8 день жизни глюкокортикоиды через 6 ч после введения не оказывали заметного влияния на уровни matBDNF и proBDNF в коре и стволе головного мозга — отделах, богатых только GR рецепторами. В то же время в гиппокампе наблюдалось снижение экспрессии proBDNF после введения гидрокортизона, тогда как уровень matBDNF оставался неизменным. Поскольку введение селективного агониста GR дексаметазона не влияло на экспрессию форм BDNF, то обнаруженные в гиппокампе эффекты гидрокортизона, очевидно, опосредованы через MR, уровень которых высок в этом отделе начиная с первой недели жизни крысят.
Таким образом, в головном мозге неонатальных крысят выявляются межрегиональные различия по соотношению экспрессии proBDNF и matBDNF, и естественные глюкокортикоиды способны изменять это соотношение в гиппокампе, экспрессирующем MR на относительно высоком по сравнению с другими структурами развивающегося мозга уровне.
Работа поддержана грантом РФФИ 11-04-00375.
ИНДИВИДУАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ АЛЬФА-АКТИВНОСТИ ЭЛЕКТРОЭНЦЕФАЛЛОГРАММЫ ЖЕНЩИН В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ОВАРИОГОРМОНАЛЬНОГО СТАТУСА
К.Б. Муравлева, М.В. Скорая, С.Б. Петрова, О.М. Базанова НИИ молекулярной биологии и биофизики СО РАМН, Новосибирск,
bazanova@soramn.ru
Ни одному из других видов электрических осцилляций мозга не принадлежит такой функциональной значимости в процессах внимания, памяти, эмоций и мотивации как альфа-ритму. При этом индивидуальные показатели активности альфа ритма ЭЭГ могут служить маркерами психоэмоционального состояния и успешности выполнения когнитивной деятельности. В последнее время появились сведения относительно взаимосвязи между характеристиками альфа-волн ЭЭГ и уровнем активности половых стероидов. Однако, часто изучение гендерных различий, а также диагностика психосоматических нарушений женщин проводится без учета влияния фазы менструального цикла на показатели альфа-активности. Между тем установлено, что психометрические показатели женщин зависят от овариогормонального статуса и, таким образом, можно предположить, что показатели альфа активности мозга также будут не равнозначных на разных фазах менструального цикла. Выяснению зависимости индивидуальных характеристик альфа-активности ЭЭГ и их психометрических коррелят от фазы менструального цикла посвящено настоящее исследование
Методы. Индивидуальная частота максимального пика альфа волн (ИЧМПА), ширина диапазона, изменение спектральной мощности ЭЭГ в
371
ответ на открывание глаз исследовались в группе 49 женщин 18-25 лет лонгитюдно (6-8 раз в течение менструального цикла). В качестве оценки монотонной когнитивной работоспособности использовались тесты обратного отсчета и движения пальцами. Кроме того анализировалось изменение настроения по самооценкам и тесту Люшера. Фазы менструального цикла женщин устанавливались в соответствие с показателями уровня концентрации прогестерона в слюне.
Результаты. У женщин ИЧМПА, индивидуальная ширина альфадиапазона, супрессия мощности альфа-ритма в ответ на открывание глаз увеличивались на овуляторной и ранней лютеиновой фазах и снижались на фолликулярной и менструальной и предменструальной фазах цикла. При этом происходило соответственное увеличение и снижение эффективности обратного счета и самооценки настроения и самочувствия.
Выводы. Показатели альфа-активности мозга изменяются у женщин в течение менструального цикла, что необходимо учитывать при установлении гендерных различий, диагностике психоэмоционального состояния и терапии психосоматических нарушений женщин.
Работа поддержана грантами РГНФ 10-06-00265 а и BIAL 45/08
ВЛИЯНИЕ АЛЬФА - НЕЙРОБИОУПРАВЛЕНИЯ НА ПОКАЗАТЕЛИ ВАРИАБЕЛЬНОСТИ СЕРДЕЧНОГО РИТМА
К.Б. Муравлева, М.В. Скорая, С.Б. Петрова, О.М. Базанова НИИ молекулярной биологии и биофизики СО РАМН, Новосибирск,
bazanova@soramn.ru
Постановка задачи и цель исследования Установлено, что увеличение альфа-активности ЭЭГ является маркером достижения оптимума между состоянием напряжения и контролируемого расслабления, активации и торможения (Klimesh et al, 2011). На основании этого тренинг нейробиоуправления, направленный на увеличение индивидуальных показателей мощности в высокочастотном диапазоне альфа-ритма ЭЭГ, используется для улучшения психомоторной и когнитивной функций (Halnsmayr et al, 2005; Базанова и др. 2008; Алексеева и др.2011). Однако не ясно сопровождается ли приобретение навыков произвольной модификации альфаритма ЭЭГ изменением показателей автономной регуляции. Цель - изучение влияния альфа-стимулирующего нейробиоуправления (АНБ) на показатели вариабельности сердечного ритма
Методы. Перед испытуемыми (студентами и служащими мужского пола 18-24 лет) ставилась цель научиться произвольно «увеличивать амплитуду индивидуального высокочастотного альфа-ритма». 16 участников эксперимента увеличивали амплитуду альфа-волн в Р, получая звуковую обратную связь (группа АБН), а 15 человек слышали такие же звуковые сигналы во время тренинга произвольного увеличения амплитуды альфаволн, но эти сигналы не служили обратной связью об уровне амплитуды
372
(группа с ложным биоуправлением ЛБН). Группы были сбалансированы по возрасту и количеству испытуемых с высокой (ВЧ) и низкой (НЧ) частотой альфа-ритма. Психометрические показатели когнитивной деятельности и психоэмоционального напряжения вместе с ЭЭГ, ЭМГ и ЭКГ регистрировали до, во время и после каждой сессии тренинга трижды: до, после 10 сессий АБН или ЛБН и через 4-5 недель после окончания курса в состоянии покоя, при выполнении когнитивной и психомоторной нагрузок с закрытыми и открытыми глазами.
Результаты. Эффективность выполнения когнитивных и психомоторных заданий, увеличилась, а показатели психоэмоционального напряжения снижались в результате 10 сессии АБН, и не изменялись в группе с ЛБН. Эти изменения более выражены у НЧ, чем ВЧ испытуемых и сохраняются через месяц после испытаний. В результате АБН частота альфапика и параллельно вариабельность сердечного ритма по показателю pNN50 увеличивается у НЧ, но снижается у ВЧ испытуемых.
Выводы. Таким образом, влияние АБН на показатели центральной и автономной регуляции зависит от индивидуального альфа-частотного профиля ЭЭГ.
Работа поддержана грантами РГНФ 10-06-00265 а и BIAL 45/08
ВЛИЯНИЕ ОСТРОГО ЛОКАЛЬНОГО АСЕПТИЧЕСКОГО ВОСПАЛЕНИЯ НА СОСТОЯНИЕ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ РАЗЛИЧНЫХ ОРГАНОВ У КРЫС
Е.А. Мухлынина, Б.Г. Юшков Институт иммунологии и физиологии УрО РАН, Екатеринбург,
elena.mukhlynina@yandex.ru
Традиционно в патогенезе воспаления ключевая роль отводится местным реакциям микроциркуляторного русла, крови и стромы органа. В тоже время не вызывает сомнения, что реакция соединительной ткани, составляющая основу воспаления, не ограничивается лишь местом повреждения, а охватывает всю ткань в целом. При этом следует ожидать, что выраженность реакции должна изменяться по мере удаления от места травмы. При всей очевидности такого предположения оно оказалось недостаточно экспериментально обосновано, что и составило суть проведенного исследования.
Таким образом, целью данной работы является изучение реакции соединительной ткани различных органов при остром асептическом воспалении.
Материалы и методы исследования. Воспаление вызывали введением крысам-самцам 0,5 мл скипидара подкожно. Количество клеток соединительной ткани в органах (тимусе, надпочечниках, желудке, кишечнике, коже с брюшной стороны и с места воспаления) определяли через 6 часов и 2 суток. Для подсчета фибробластов применяли окрашивание гематокси-
373
лином-эозином, тучных клеток – основным коричневым. Количество макрофагов оценивали по экспрессии CD68 (Millipore), лейкоцитов – по экспрессии CD45 (BD Bioscience). Пролиферацию клеток соединительной ткани анализировали по экспрессии Ki-67 (BD Bioscience). Обмен коллагена в исследуемых органах оценивали по суммарному содержанию оксипролина по методу Bergman and Loxely. Оценку гематологических показателей периферической крови проводили при помощи геманализатора Celly70. Для оценки значимости различий между группами использовали критерий Манна-Уитни. При проверке статистических гипотез использован 5% уровень значимости.
Результаты и их обсуждение. В ответ на локальное воспаление в периферической крови развивается нейтрофильный лейкоцитоз. При этом отмечается повышение процентного содержания воды в месте воспаления, в коже на удаленном участке, в желудке, которое на 2 сутки сохраняется только в области воспаления. В ответ на воспаление растет количество фибробластов во всех изученных органах кроме желудка. Реакция макрофагального компонента отмечается только в коже, где на раннем сроке повышается их количество. Происходит повышение секреторной активности тучных клеток в очаге воспаления, в капсуле надпочечников, тимусе, желудке. В соединительной ткани надпочечников, кишечника, желудка количество CD45+клеток снижается. При этом в трабекулах тимуса плотность лейкоцитов повышается. Пролиферативная активность соединительнотканных клеток в органах меняется по-разному. В надпочечниках, тимусе, коже количество Ki-67+клеток повышается, в то время как в кишечнике – снижается. Через 6 часов в коже в месте введения скипидара отмечается повышение содержания суммарного оксипролина. При этом в коже с брюшной стороны тела количество оксипролина понижается. Ко 2-м суткам в обмене коллагена синтетические явления начинают превалировать. Содержание оксипролина увеличивается в надпочечниках, тимусе, кишечнике, желудке и коже с места введения скипидара. В коже с брюшной стороны тела количество общего оксипролина остается на пониженном относительно контроля уровне.
Фазные изменения соединительной ткани в ответ на местное повреждение носят генерализованный характер. При этом стадийность процессов, происходящих в удаленных от очага органах, соответствует классической схеме развития воспалительной реакции: на ранних сроках отмечается преобладание экссудативных явлений, которые на более поздних сроках (2 суток) сменяются клеточной реакцией.
374
ПОВРЕЖДЕНИЕ МИОКАРДА И РОЛЬ ОБРАТНОГО ЗАХВАТА НОРАДРЕНАЛИНА: ИШЕМИЯ И ЕСТЕСТВЕННЫЕ МЕХАНИЗМЫ ЗАЩИТЫ
С.Е. Науменко, Т.В. Латышева, М.А. Гилинский НИИ физиологии СО РАМН Новосибирск, nse2@mail.ru
Применение трициклических антидепрессантов, способных блокировать обратный захват норадреналина (НА) в симпатических нервных окончаниях, связывают с опасностью развития инфаркта миокарда. Основное опасение вызывает не столько способность этих препаратов воздействовать на обмен НА в миокарде, сколько вызываемое ими замедление внутрижелудочковой проводимости и ортостатическая гипотония. С другой стороны, было показано, что введение блокатора обратного захвата норадреналина дезипрамина до начала ишемии приводит к уменьшению величины инфаркта миокарда. Однако остается неясным, какое влияние на величину инфаркта будет оказывать блокада обратного захвата НА во время реперфузии после ишемии миокарда и при использовании ишемического прекондиционирования.
Цель исследования: изучить влияние блокады обратного захвата норадреналина в реперфузионном периоде на размер инфаркта миокарда и динамику интерстициального НА после ишемического прекондиционирования. Крысам (Вистар) в условиях уретанового наркоза осуществляли локальную ишемию миокарда с последующей реперфузией (окклюзия левой коронарной артерии). Животные были разделены на 4 группы: 1-я группа (контроль 1) – 30 минутная ишемия миокарда с последующей 120 минутной реперфузией; 2-я группа аналогична группе 1 + внутривенное введение дезметилимипрамина — блокатора обратного захвата НА в начале реперфузии. 3-я группа (контроль 2) – ишемическое прекондиционирование (три трехминутных ишемии с трехминутними реперфузиями) с последующей 30 минутной ишемией миокарда и 120 минутной реперфузией. 4-я группа аналогична группе 3 + внутривенное введение дезметилимипрамина в начале реперфузии. Уровень интерстициального НА определяли микродиализным методом с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии. После последовательного окрашивания синим Эванса и тетразолиумом измеряли размер инфаркта миокарда относительно зоны риска. В 1 группе величина инфаркта миокарда относительно зоны риска соста-
вила 32,0±3,1%, во 2-й – 46,1±3,4% (p=0,006); в 3-й группе – 15,3±3,1%, в 4-й – 44,7±4,7% (р=0,0027). Между 1-й и 3-й группами р=0,008. При этом уровень НА в интерстиции миокарда крыс экспериментальных групп (2-й и 4-й) во время реперфузии снижался гораздо медленнее, чем в контроле (группы 1 и 3). Таким образом, блокада обратного захвата НА в период реперфузии после ишемии миокарда приводит к повышению содержания интерстициального НА и увеличению размера инфаркта миокарда. Последнее не предотвращается ишемическим прекондиционированием, в обычных
375
условиях уменьшающим повреждение. Обсуждается роль симпатической системы миокарда в развитии инфаркта миокарда, функционировании механизмов естественной защиты миокарда, и особенности медикаментозного обеспечения постинфарктного периода.
5-НТ1А РЕЦЕПТОР – КЛЮЧЕВОЙ ЭЛЕМЕНТ СЕРОТОНИНОВОЙ СИСТЕМЫ МОЗГА В РЕГУЛЯЦИИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ФУНКЦИЙ И ПОВЕДЕНИЯ
В.С. Науменко, Д.В. Базовкина, Е.М. Кондаурова
Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск, naumenko2002@mail.ru
Нейротрансмиттер мозга серотонин (5-НТ) вовлечен в регуляцию самых разнообразных видов поведения и физиологических функций. Нарушение в работе серотониновой системы мозга приводят к развитию крайне тяжелых нарушений функции мозга и поведения. В настоящее время известно множество различных рецепторов, опосредующих действие 5- НТ на нейроны, однако наибольший интерес представляет 5-НТ1А рецептор. Этот рецептор вовлечен в механизмы регуляции некоторых поведения и 5-НТ-зависимых физиологических функций. Показано вовлечение 5- НТ1А рецепторов в регуляцию агрессивного поведения, каталепсии, полового, пищевого и питьевого поведения, сна, терморегуляции, центральной регуляции эндокринных желез. Известно, что 5-НТ1А рецепторы локализуются как пост-, так и пресинаптически, благодаря чему способны регулировать секрецию 5-НТ и, следовательно, контролировать функциональное состояние 5-НТ системы мозга. Примечательно, что этот рецептор является самым древним среди 5-НТ рецепторов в эволюционном плане, он обнаружен уже у кишечнополостных.
Нами были получены новые экспериментальные доказательства невероятной полифункциональности 5-НТ1А рецептора и его роли в регуляции различных видов поведения, терморегуляции и ауторегуляции 5-НТ системы мозга. Была показана роль 5-НТ1А рецепторов в ингибировании агрессивного поведения вне зависимости от его типа (агрессия, вызванная страхом, агрессия нападения). Было обнаружено вовлечение 5-НТ1А рецепторов в механизмы зимней спячки и ассоциированной с ней глубочайшей гипотермией. Продемонстрировано участие 5-НТ1А рецепторов в механизмах фильтрации сенсорной информации. Более того, выявлена способность 5-НТ1А рецепторов опосредовать действие некоторых других рецепторов 5-НТ системы мозга. Так гипотермический эффект активации центральных 5-НТ3 рецепторов частично опосредуется 5-НТ1А рецепторами. Также было показано, что 5-НТ1А рецепторы опосредуют действие 5-НТ2А рецептора: стимуляция 5-НТ2А рецепторов приводит к активации 5-НТ1А рецепторов, что отражается в снижении выраженности генетически детерминированной каталепсии у мышей. Обнаружено существование взаимодействий типа рецептор-рецептор и рецептор-ген, ключевым звеном кото-
376
рых является 5-НТ1А рецептор и показана роль этих взаимодействий в ауторегуляции 5-НТ системы мозга.
Работа поддержана грантом Российского фонда фундаментальных исследований (12-04-00082-а); Программой Российской академии наук «Молекулярная и клеточная биология» (№ 6.9).
ВЗАИМОСВЯЗИ АЛЬФА-АКТИВНОСТИ ГОЛОВНОГО МОЗГА ПРИ РАЗЛИЧНЫХ РЕЖИМАХ ВЕНТИЛЯЦИИ С ПАТТЕРНОМ СПОКОЙНОГО ДЫХАНИЯ У ЗДОРОВЫХ ЛИЦ
Д.Л. Нахамчен Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН,
Благовещенск, ndl.amur@mail.ru
Цель исследования состояла в определении взаимосвязи альфаактивности головного мозга с паттерном спокойного дыхания при различных режимах вентиляции.
Методы. Обследованы 21 практически здоровый доброволец. Паттерн дыхания регистрировался с помощью инструментального комплекса для кардиореспираторных исследований фирмы «Эрих Егер» (Германия). Исследование проводилось в расслабленном состоянии посредством регистрации спокойного дыхания через рот на протяжении 15 минут, измерялись скоростные и объемно-временные характеристики потока вдыхаемого и выдыхаемого воздуха пневмотахометрической трубкой. Непрерывную регистрацию электрической активности головного мозга проводили на энцефалографе «Энцефалан-131-03» (Россия). Схема наложения 19 электродов «10-20». Частота дискретизации 256 Гц. Референт - объединенный ушной электрод. Данные обрабатывались в программе EEGLab с использоавнием алгоритма ISA Fasticag. Спектральный анализ мощности в альфадиапазоне (8-14 Гц) производился методом быстрого преобразования Фурье. Всего анализу подверглось 37 эпох по 4 с за 90 с фона перед гипервентиляцией, 30 с пика двухминутной гипервентиляции воздухом комнатной температуры и 30 с пика двухминутной холодовой гипервентиляции (температура вдыхаемого воздуха -20 С). Взаимосвязь между показателями определяли с помощью коэффициента корреляции Спирмена (R).
Результат. Корреляционный анализ показал отсутствие взаимосвязей альфа-ритма электрической активности головного мозга на фоне произвольного спокойного дыхания с показателями паттерна дыхания. Нами были определены прямые и обратные взаимосвязи альфа-активности на фоне произвольной гипервентиляции воздухом комнатной температуры с показателями паттерна дыхания при отсутствии достоверных различий относительной мощности альфа-ритма на фоне спокойного дыхания и при произвольной гипервентиляции воздухом комнатной температуры: с дыхательный объемом (л) в отведениях Fp2 (R=-0,44, р=0,047), F8 (R=-0,51,
р=0,018), Cz (R=-0,45, р=0,040), С4 (R=-0,47, р=0,031), с продолжительно-
377
стью вдоха (Твд, с) в отведении Fp2 (R=-0,44, р=0,049); с длительностью дыхательного цикла (То, с) в отведениях Fp2 (R=-0,46, р=0,037), F8 (R=-
0,44, р=0,049), Cz (R=-0,46, р=0,036), с частотой дыхания (раз в 1 мин.) в отведениях Fp2 (R=+0,45, р=0,043), Cz (R=+0,45, р=0,042). Альфа-
активность на фоне произвольной гипервентиляции холодным воздухом имела корреляции только с временными параметрами паттерна: с Твд в от-
ведениях F4 (R=-0,44, р=0,045), F8 (R=-0,46, р=0,034), C4 (R=-0,44, р=0,045); с То в отведении с F8 (R=-0,44, р=0,044).
Заключение. Отсутствие взаимосвязи между альфа-активностью в покое и паттерном спокойного дыхания свидетельствует об относительно автономном функционировании дыхательного центра в состоянии спокойного бодрствования. Появление взаимосвязей паттерна спокойного дыхания с мощностью альфа-ритма на фоне гипервентиляции воздухом комнатной температуры и их трансформация при подключении холодового стимула свидетельствует о включении коры головного мозга в процесс регуляции дыхания, для обеспечения адаптации к воздействию факторов разной модальности.
ВОЛЮМОРЕГУЛЯТОРНЫЕ РЕАКЦИИ ЛИМФОЦИТОВ В УСЛОВИЯХ БЛОКАДЫ Са2+ - СИГНАЛЬНЫХ ПУТЕЙ
Нгуен Тхи Лан Хыонг Белгородский государственный национальный исследовательский университет,
Белгород, lanhuong_9586@yahoo.com
Цель работы - изучить влияние верапамила на развитие осморегуляторных реакций лимфоцитов при снижении осмолярности среды.
Материалы и методы. В экспериментальной части работы использовали суспензию лимфоцитов здоровых доноров, полученную путем центрифугирования крови. 30 мкл суспензии лимфоцитов инкубировали в 150 мкл среды, содержащей 10-9 ммоль/л верапамила в течение 15 мин при комнатной температуре. По окончании времени инкубации суспензию лимфоцитов делили на три пробы, объемом по 10 мкл каждая. К первой пробе добавляли 50 мкл аутологичной плазмы, ко второй – 50 мкл 0,4% раствора хлорида натрия, к третьей – 50 мкл 0,9% раствора хлорида натрия. Формировали однослойные суспензионные препараты, на которых регистрировали изображения и проводили измерения габаритных размеров лимфоцитов и их ядер, используя анализатор изображений «ВидеоТест». Функциональную активность лимфоцитов и ядер оценивали по показателю использования ими мембранного резерва, который вычисляли как отношение объема клеток в экспозиционной среде к объему клеток, измеренному в аутологичной плазме. Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью редактора «Microsoft Excel 7.0». Статически достоверными считали значения при р<0,05.
378
Результаты исследования. В результате проведенных экспериментов установлено увеличение объема лимфоцитов в гипотонической среде на 30 с инкубации на 13.0% (р<0,05) по сравнению с изотоническим раствором. Увеличение морфометрических параметров клеток отмечалось в течение 60 секунд, а затем, начиная со 150 и по 180 секунды, наблюдалась реакция регуляторного восстановления объема клеток до значений изотонического раствора. Наряду с клетками, диаметр, обьем и площадь поверхности ядра через 60 с экспозиции увеличивались соответственно на 5,7%; 16,0% и 11.1%(р<0,05) по сравнению с изотоническим раствором. К окончанию действия нагрузки (3600 с) объем ядра возрастал на 28,0% (р<0,05).
Анализируя интенсивность использования мембранного резерва клетками на поддержание объема установлено, что общей тенденцией как
вгипо- ,так и в изотоническом растворе является цикличность. Реакция клеток на снижение осмолярности среды выражалась не продолжительными 30-ти секундными интервалами, характеризующимися увеличением использования мембранного резерва, которые сменялись периодами, продолжительностью в 120 секунд, в течение которых его использование снижалось до контрольных значений. Максимальное
использование резерва мембраной отмечали с 390 по 540 с. Использование резерва кариолеммой после блокады Са2+-сигнальных путей возрастало в течение первых 150 с в умеренно гипотонической среде в среднем на 13% (р<0,05).
Заключение. Таким образом, установлена асинхронность в использовании резерва плазмалеммой и кариолеммой при снижении
осмолярности среды. Реакция ядра на гипотоничскую среду после блокады Са2+-сигналных путей развивается на 30 с медленее чем клетки, но она более выраженная, ее длительность составляет 120 с, в то время как клетка
вцелом отвечает сразу же, но при этом задействует мембранный резерв в течение 30-ти и 60-ти секундных интервалов. К окончанию времени экспозиции значения мембранного резерва ядра и клетки численно не отличаются, что свидетельствует о синхронизации функций.
ИНДИВИДУАЛЬНО-ТИПОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РЕАКЦИИ НА ГИПОКСИЧЕСКОЕ ВОЗДЕЙСТВИЕ В РАЗНЫХ ВОЗРАСТНЫХ ГРУППАХ
Н.В. Некипелова, С.Г. Кривощеков
НИИ физиологии СО РАМН, Новосибирск, krivosch@physiol.ru
Цель исследования: определение индивидуально-типологических различий в реакциях на гипоксическое воздействие у детей и подростков в сравнении с взрослыми.
Было обследовано 26 взрослых и 49 детей двух возрастных категорий, пациентов психосоматического отделения клиники НИИ физиологии СО РАМН. Всем испытуемым проводилось психофизиологическое обсле-
379