2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Частная бактериология

732

утилизацию. Шкуры дезинфицируют. Важное значение имеют мероприятия по снижению численности бродячих собак.

Перечень профилактических мероприятий, проводимых органами и учреждениями госсанэпиднадзора и ветеринарной службы, определен санитарными (СП 3.1.091-96) и ветеринарными (ВП 13.3.1310-96) правилами.

В целях экстренной профилактики лицам, подвергшимся риску заражения лептоспирозом, назначают доксициклин.

Лечение. Для лечения лептоспироза используют антибиотики (пенициллин, тетрациклин) в сочетании с лептоспирозным гетерологичным иммуноглобулином, получаемым из крови гипериммунизированных волов. Лептоспирозный иммуноглобулин представляет собой бесцветную прозрачную жидкость, содержащую антитела к серотипам лептоспир Icterohaemorrhagiae, Grippotyphosa, Tarassovi, Canicola, Pomona. В качестве стабилизатора применяют 2-4% гликокол. Иммуноглобулин вводят после предварительной десенсибилизации.

Вопросы для контроля усвоения материала

1.Морфологические, тинкториальные и культуральные свойства лептоспир.

2.Источники инфекции и пути заражения человека лептоспирозом.

3.Какие факторы патогенности характерны для лептоспир?

4.Опишите патогенез развития лептоспироза.

5.Каковы клинические симптомы лептоспироза?

6.Назовите методы профилактики и лечения лептоспироза.

Тренировочные тесты

1. Возбудителем лептоспироза является (один правильный ответ):

1.1Borrelia afzelii

1.2Leptospira parva

1.3Leptospira interrogans

1.4Leptospira inadai

1.5Treponema pallidum

2. К особенностям лептоспир относится (несколько правильных ответов):

2.1тонкие спирохеты с загнутыми концами

2.2обладают активной подвижностью

2.3образуют споры

2.4синтезируют капсулу

2.5грамотрицательные

3. Пути заражения человека лептоспирами (несколько правильных ответов):

3.1контакт с больным человеком

3.2питье инфицированной воды

3.3купание в зараженных водоемах

3.4уход за больным скотом

3.5воздушно-капельный

733

4. Для лептоспироза характерно (несколько правильных ответов):

4.1кольцевая эритема

4.2длительное депонирование возбудителя в почках

4.3поражение гепатоцитов

4.4поражение эндотелия капилляров

4.5поражение суставов

5.При диагностике лептоспироза используются методы (несколько правильных ответов):

5.1 аллергический

5.2 бактериоскопический

5.3 бактериологический

5.4 биологический

5.5 серологический

6.В качестве исследуемого материала при лептоспирозе используют (несколько правильных ответов):

6.1 фекалии

6.2 моча

6.3 СМЖ

6.4 сыворотка крови

6.5 желчь

7.Специфическую профилактику лептоспироза проводят с использованием (один правильный ответ):

7.1 бактериофагов

7.2 антибиотиков

7.3 убитой вакцины

7.4 анатоксинов

7.5 живой вакцины

8.Для лечения лептоспироза применяют (несколько правильных ответов):

8.1антибиотики

8.2живую вакцину

8.3анатоксин

8.4убитую вакцину

8.5иммуноглобулин

Правильные ответы: 1.3; 2.1, 2.2, 2.5; 3.2, 3.3, 3.4; 4.2, 4.3, 4.4; 5.2, 5.3, 5.4, 5.5; 6.2, 6.3, 6.4; 7.3; 8.1, 8.5.

734

10. S-образные бактерии

S-образные бактерии объединяют кампилобактерии и хеликобактерии. Они относятся к типу (филуму) Proteobacteria, классу Epsilonproteobacteria, порядку

Campylobacterales. Этот порядок объединяет 2 семейства: семейство

Campylobacteraceae и семейство Helicobacteraceae. В свою очередь, семейство Campylobacteraceae включает 3 рода: Campylobacter, Arcobacter и Sulfurospirillum. К семейству Helicobacteraceae относится 6 родов: Flexispira, Helicobacter, Sulfuricurvum, Sulfromonas, Thiovulum и Wolinella. Основное клиническое значение имеют представители родов Campylobacter и Helicobacter.

10.1. Кампилобактерии

Кампилобактерии относятся к возбудителям зоонозных бактериальных инфекций с фекально-оральным механизмом передачи и преимущественным поражением пищеварительного тракта. Кампилобактериоз – это острая кишечная инфекция, при которой поражается преимущественно тонкий кишечник.В последующем возможна генерализация процесса с развитием септицемии и поражением различных органов и систем.

Кампилобактерии были выделены в начале ХХ века как возбудители инфекционных заболеваний крупного рогатого скота, овец и свиней. Впервые возбудитель выделен из тканей абортированных плодов овец и крупного рогатого скота в 1909-1913 г. Дж. Мак-Фадианом, С. Штокманом и Т. Смитом. Бактерии были отнесены к вибрионам, а болезнь получила название вибриоз. От людей кампилобактерии были впервые выделены из крови беременных женщин в 1947 г. Р. Винцентом (Vinzent R.) с соавторами.

Таксономическое положение. Кампилобактерии относятся к типу (филуму)

Proteobacteria, классу Epsilonproteobacteria, порядку Campylobacterales, семейству Campylobacteraceae, роду Campylobacter (греч. campylos - кривой, изогнутый),

который включает в себя более 30 видов. Основными патогенными для человека видами являются:

-С. jejuni (40 сероваров);

-С. fetus;

-С. coli;

-C. lari.

С. fetus чаще поражает ослабленных людей с развитием гематогеннодиссеминированных форм заболевания.

По температурному оптимуму кампилобактерии подразделяются на термофильные и мезофильные. Термофильные кампилобактерии имеют температурный оптимум роста 42-44ОС. Они образуют группу С. jejuni,

включающую виды С. jejuni, С. coli и C. lari. Мезофильные (нетермофильные)

кампилобактерии имеют температурный оптимум 25-37ОС. К ним относится С. fetus и ряд условно-патогенных видов (C. faecalis, C. fetus, C. concisus, C. sputorum, C. fennelliae, C. cinaedi, C. hyointestinalis), обитающих в ротовой полости, толстом кишечнике и мочеполовой системе теплокровных.

736

Спор и капсул кампилобактерии не образуют. Анилиновые красители воспринимают с трудом. Обычно эти бактерии окрашивают карболовым фуксином Циля, азуром-эозином, кристаллическим фиолетовым. Хорошо окрашиваются по Романовскому-Гимзе. По Граму кампилобактерии окрашиваются в розовый цвет - грамотрицательные (рисунок 10.4).

Рисунок 10.4 - Чистая культура кампилобактерий, окраска по Граму. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Культуральные и биохимические свойства. Кампилобактерии являются

капнофилами (хорошо развиваются в присутствии углекислого газа) и микроаэрофилами (лучше растут при сниженной концентрации кислорода). Оптимальной газовой средой служит смесь из 5-7% кислорода, 83-85% азота и 10% углекислого газа. Оптимальная величина рН питательных сред - 7,0-7,2. Время выращивания составляет не менее 24-48 часов.

Кампилобактерии требовательны к питательным средам. Растут на средах с добавлением глицерина, крови, гемина, гидролизата белков, аминокислот, ростовых факторов и солей. Для выращивания кампилобактерий используются следующие питательные среды:

-мясо-пептонный печеночный агар (МППА);

-полужидкий печеночно-желатиновый агар (ПЖА);

-железо-эритритный кровяной агар (ЖЭКА);

-сафранино-железо-новобиоциновая среда (СЖН);

-среда Китта-Тароцци без масла;

-кампилобакагар;

-селективная питательная среда для выделения термофильных кампилобактерий (ПСТК-среда);

-кровяной агар (КА);

-шоколадный агар (ША);

-среда Бутцлера.

Обязательное условие - наличие в среде 7-10% эритроцитов и антибиотиков (ванкомицина, амфотерицина В и др.), подавляющих рост сопутствующих микроорганизмов.

На плотных средах кампилобактерии через 24-48 часов образуют нежный мелкоросинчатый серовато-белый налет или отдельные серо-голубоватые или серовато-жемчужные мелкие блестящие слизистые расползающиеся или выпуклые колонии (рисунок 10.5).

а б Рисунок 10.5 - Рост кампилобактерий на плотных питательных средах: а - кровяной

агар; б – шоколадный агар. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

На полужидком печеночно-желатиновом агаре через 2-722 суток отмечается рост около самой поверхности среды в виде серовато-голубоватого диска толщиной от 1 до 4 мм. В жидких питательных средах кампилобактерии образуют гомогенное помутнение и осадок.

Биохимические и ферментативные свойства выражены слабо: кампилобактерии не ферментируют углеводы, не образуют индола и аммиака, образуют сероводород, не разжижают желатина, не свертывают молоко, дают положительную реакцию на каталазу, гемолитической активностью не обладают.

Способность к гидролизу гиппурата натрия является основным признаком, позволяющим дифференцировать C. jejuni и С. coli. Биохимические признаки используются для установления видовой принадлежности кампилобактерий (таблица 10.1).

Таблица 10.1 – Дифференциально-диагностические признаки некоторых кампилобактерий

Геном кампилобактерий представлен кольцевой молекулой ДНК, некоторые штаммы могут содержать плазмиды.

Антигенная структура. Кампилобактерии имеют термостабильный соматический О-антиген и термолабильный жгутиковый Н-антиген. О-антиген находится во внешней мембране и входит в состав липополисахарида. По О- антигену кампилобактерии подразделяются на 60 сероваров, а по Н-антигену – на 50 серотипов.

Резистентность кампилобактерий невысокая. При нагревании кампилобактерии быстро инактивируются, при комнатной температуре сохраняются до 2 недель, в воде - до 3 недель, а в замороженных тушах животных - несколько

738

месяцев. В водопроводной воде при 20ОС кампилобактерии выживают в течение 12-24 часов, при 37ОС – 6-12 часов, в сточной воде – до 10 суток. В сыром молоке сохраняется в течение 5-14 суток, при 25ОС возбудитель погибает через 3 дня. В продуктах при 4ОС они сохраняются до 7 суток. В почве, помете птиц, навозе животных, фекалиях кампилобактерии сохраняются до 30 суток. Длительно сохраняются в водной среде при низких температурах. При нагревании до 60ОС они погибают через 15 минут, при пастеризации (71-77ОС) - в течение 15 секунд. Кипячение и хлорирование воды полностью уничтожают возбудителя.

Кампилобактерии устойчивы к сульфаниламидным препаратам, слабо устойчивы к пенициллину, но чувствительны ко многим другим антибиотикам (эритромицину, левомицетину, стрептомицину, канамицину, тетрациклинам, гентамицину и ципрофлоксацину).

Факторы патогенности кампилобактерий. К факторам патогенности кампилобактерий относятся следующие компоненты:

1.Жгутики, обусловливающие подвижность бактерий и способность к проникновению через слой слизи и перемещению вдоль эпителия.

2.Адгезины, обеспечивающие адгезию возбудителя на эпителиальных клетках и колонизацию слизистой оболочки кишечника.

3.Муциназа, способствующая проникновению бактерий через слой слизи, покрывающий эпителий кишечника.

4.Энтеротоксины (термолабильный и термостабильный). Термолабильный холероподобный энтеротоксин является разновидностью экзотоксина. Термостабильный энтеротоксин высвобождается после гибели бактерий и вызывает общую интоксикацию организма. Энтеротоксины нарушают водно-солевой обмен путем образования цАМФ.

5.Эндотоксин кампилобактерий подобно эндотоксинам других грамотрицательных бактерий вызывает развитие токсикоза, обладает пирогенным действием.

6.Дизентериеподобный цитотоксин высвобождается после гибели бактерий и вызывает гибель эпителиальных клеток.

7.Система секреции 4 типа (T4SS). Она участвует в инвазии возбудителя, транспортируя эффекторные белки внутрь эпителиальных клеток.

Патогенез. В патогенезе заболевания основная роль принадлежит адгезии и инвазии микроба, а также способности кампилобактерий размножаться в присутствии желчи. Благодаря наличию жгутиков, кампилобактерии проникают через слизь, движутся вдоль эпителия тонкой кишки и прикрепляются к эпителиальным клеткам.

После адгезии бактерии колонизируют верхние отделы тонкой кишки. Затем кампилобактерии проникают через эпителиальные клетки в составе фагосомоподобных вакуолей и через межклеточные пространства в подслизистый слой (инвазия). Термостабильный энтеротоксин и дизентериеподобный цитотоксин вызывают гибель эпителиальных клеток и оказывают общее токсическое действие на организм. Продукция цитокинов обусловливает развитие воспаления. Схема патогенеза кампилобактериоза представлена на рисунке 10.6.

739

Рисунок 10.6 – Патогенез кампилобактериоза. Заимствовано и адаптировано из Интернет-ресурсов.

В результате этого развиваются воспаление, отек слизистой оболочки, появляются язвы, которые сливаются и образуют крупные изъязвления (рисунок

10.7).

Рисунок 10.7 – Изъязвления в слизистой оболочке кишечника при кампилобактериозе. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Эрозии слизистой оболочки кишечника клинически проявляются наличием в стуле больного крови и слизи.

Проникновение бактерий в кровь приводит к развитию бактериемии с последующим гематогенным обсеменением органов и тканей.

Эпидемиология. По данным ВОЗ, кампилобактериоз является наиболее распространенным заболеванием в структуре кишечных инфекций. На его долю приходится от 3 до 80% ОКИ. В России за 2005-2007 годы официально ежегодно регистрировалось всего 394-398 случаев кампилобактериоза, что связано с недостаточной диагностикой этой инфекции. Кампилобактериоз в РФ составляет 6,5-12,2% от общего числа острых кишечных заболеваний.

740

Кампилобактериоз относятся к группе зооантропонозных инфекций.

Основным источником инфекции и природным резервуаром кампилобактерий являются птицы, сельскохозяйственные животные (крупный и мелкий рогатый скот, свиньи), редко - человек (больной или бактерионоситель). В последние годы основным источником кампилобактерий является промышленная птица. C. jejuni поражает широкий круг животных и птиц, C. coli чаще выделяется от свиней, а C. fetus в основном поражает крупный и мелкий рогатый скот. Инфицированные животные часто являются носителями кампилобактерий без клинических проявлений инфекции. Такое носительство приводит к последующей контаминации мяса возбудителем из содержимого кишечника. Животные-носители инфицируют кампилобактериями воду и почву, которые становятся резервуаром инфекции. Контаминация молока кампилобактериями происходит в его результате фекального загрязнения или при кампилобактериозном мастите коров. Загрязнение продуктов питания кампилобактериями происходит в результате неудовлетворительного состояния гигиены на производстве, при недостаточной термической обработке мясных и молочных продуктов.

Механизм заражения человека кампилобактериозом - фекально-оральный, пути заражения – пищевой, водный, контактно-бытовой, факторы передачи – пищевые продукты, вода (рисунок 10.8).

Рисунок 10.8 – Схема эпидемиологии и патогенеза кампилобактериоза. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Наиболее часто заболевание возникает при использовании инфицированного мяса, при употреблении воды из случайных источников и сырого молока. Инфицирующая доза составляет около 102-108 бактерий. Случаи заболевания регистрируются в течение всего года, чаще в летне-осенние месяцы. В большей степени кампилобактериозу подвержены дети в возрасте от 1 года до 3-5 лет, а также подростки. Заболеваемость кампилобактериозом регистрируется в виде спорадических случаев или эпидемических очагов. Отмечаются профессиональные заболевания лиц, ухаживающих за больными животными. Естественная восприимчивость людей высокая. В 1% случаев наблюдается бактерионосительство.