
- •Рецензенты:
- •1.2. Статус клинико-диагностической лаборатории
- •1.4. Организация рабочих мест и оснащение клинико-диагностической лаборатории
- •1.5. Правила безопасной работы в лаборатории
- •1.5.1. Санитарно-противоэпидемический режим в клинико-диагностической лаборатории
- •1.5.2. Средства индивидуальной защиты
- •1.5.3. Правила обеззараживания использованного биологического материала
- •1.5.4. Способы и средства дезинфекции и стерилизации изделий медицинского назначения в кдл
- •1.5.5. Противопожарная безопасность в кдл
- •1.5.6. Правила безопасной работы с едкими веществами (кислоты, щелочи)
- •1.5.7. Первая помощь пострадавшим в лаборатории
- •2.2. Средства пробоподготовки в лаборатории. Дозирующие устройства
- •2.3. Центрифугирование
- •2.4. Перемешивающие и термостатирующие устройства
- •2.5. Весоизмерительная техника
- •2.6. Лабораторные реагенты
- •Правила хранения химических реактивов
- •2.7. Правила приготовления растворов
- •Например, широко используемый для работы с клетками крови фосфатный буфер (рН 5,8-8,2) приготавливается следующим образом:
- •2.7.1. Определение рН растворов
- •2.7.2. Фильтрование
- •2.7.3. Определение плотности растворов
- •2.7.4. Измерение температуры растворов
- •2.8. Оборудование клинико-диагностической лаборатории
- •3.2. Запрос на анализ
- •3.3. Взятие материала
- •3.6. Выбор метода и режима исследования
- •3.7. Обеспечение качества лабораторных исследований
- •3.7.1. Система управления качеством лабораторных исследований
- •3.8. Представление результатов лабораторных исследований
- •3.9. Принципы оценки результатов лабораторных исследований
- •3.9.2. Референтные интервалы лабораторных показателей
- •4.1.1. Основные условия измерений при работе с фотометрической аппаратурой
- •4.1.2. Способы измерений, расчета и представления результатов фотометрии
- •4.2.1. Способы детекции результатов иммунохимической реакции
- •4.2.2. Краткий обзор некоторых иммунохимических тестов
- •4.2.3. Радиоиммунологический анализ
- •4.2.4. Иммуноферментный анализ
- •4.2.5. Иммуноблотинг
- •4.3. Методы фракционирования биологических жидкостей
- •4.3.2. Электрофорез
- •Иммуноэлектрофорез
- •Электрофорез с последующей иммунофиксацией
- •4.4. Методы микроскопии в клинико-диагностической лаборатории
- •4.4.1. Методы световой микроскопии
- •4.4.2. Современные микроскопические приборы
- •Инвертированные микроскопы проходящего света
- •Люминесцентный микроскоп
- •4.4.3. Уход за микроскопом
- •4.5. Сухая химия
- •4.6. Молекулярно-биологические методы исследований
- •4.6.1. Применение пцр в клинической практике
- •4.6.2. Пцр в реальном времени
- •Глава 1. Введение
- •Глава 2. Цель, задачи, критерии контроля качаства
- •Глава 3. Контрольные материалы
- •Глава 4. Этапы лабораторных исследований, подлежащие контролю качества
- •Глава 5. Проведение внутрилабораторного контроля
- •Глава 6. Стадии внутрилабораторного контроля
- •Глава 1. Введение
- •Глава 2. Цель и задачи
- •Глава 3. Организация внешнего контроля качества
- •Глава 4. Мероприятия внешнего контроля качества
- •Глава 5. Статистическая обработка и оценка результатов внешнего контроля качества
2.7.2. Фильтрование
Фильтрованием называется отделение от жидкости находящихся в ней частиц при помощи фильтрующей перегородки. Жидкость, отделяемая при фильтровании, называется фильтратом. Существуют различные фильтрующие материалы, а также различные способы фильтрования.
В биохимических лабораториях наиболее часто используются фильтрование через бумажные фильтры. Такой вид фильтрования называют поверхностным. Частицы остаются на поверхности фильтра, если размеры превышают размер диаметра пор. Фильтровальная бумага, в отличие от обычной бумаги, более чиста по составу и волокниста, что и обусловливает ее фильтрующую способность. Фильтровальная бумага бывает обычная и беззольная. Фильтры, приготовленные из беззольной бумаги, при сжигании дают очень незначительное количество золы (оно указывается на фабричной этикетке на каждой пачке). Беззольную бумагу употребляют при точных аналитических работах, связанных со сжиганием осадка вместе с фильтром. В клинико-диагностических лабораториях чаще используют обычные фильтры.
Плотность фильтра условно обозначают определенным цветом бумажной ленты, которой оклеивают упаковку. Приняты следующие обозначения:
Розовая или черная лента – быстро фильтрующая бумага. Предназначена для отделения студенистых осадков, например гидроокисей металлов.
Белая лента – бумага средней проницаемости. Используется в лабораториях в большинстве случаев.
Синяя лента – плотные фильтры. Применяются для фильтрования мелкозернистых осадков. Фильтрование идет очень медленно.
Желтая лента – обезжиренные фильтры. Применяются при исследованиях липидов.
Обычно в методике, по которой проводится то или иное количественное определение, указано, какой плотности фильтр надо выбрать.
В качестве фильтрующего материала могут быть использованы многослойные материалы – хлопок, стекловолокно и другие. При этом частицы задерживаются как на поверхности, так и в глубине фильтра, поэтому такой вид фильтрования называют «глубоким».
Обычное фильтрование происходит под влиянием силы тяжести. При этом скорость фильтрации, как правило, небольшая, и существенно зависит от характера фильтрующего материала, размера пор, размера частиц в растворе. Для фильтрования при комнатной температуре и атмосферном давлении применяют стеклянные воронки. Воронку располагают таким образом, чтобы ее носик немного входил в емкость для фильтрата и прикасался к его стенке. При этом конец трубки должен быть на достаточной высоте от дна емкости, чтобы при наполнении емкости фильтратом трубка воронки не была погружена в жидкость. В воронку вставляют фильтр такого размера, чтобы его края были ниже краев воронки на 0,5–1 см. Затем смачивают фильтр водой, прижимают пальцем плотно к стеклу и начинают фильтрование.
Если жидкость проходит свободно через фильтр, надо раствор лить непрерывно. Если жидкость проходит через фильтр медленно, новую порцию доливают, когда бόльшая часть жидкости пройдет через фильтр.
Для увеличения скорости фильтрования можно использовать фильтрование под вакуумом. При этом к действию силы тяжести добавляется сила всасывания. Для вакуумной фильтрации применяют специальные фильтры с повышенной плотностью. В простейшем виде фильтрование под вакуумом можно реализовать с помощью водоструйного насоса, к которому присоединяют колбу Бунзена.
Одним из вариантов фильтрования является так называемая «ультрафильтрация». Она осуществляется через фильтры с чрезвычайно узкими порами, через которые проходят молекулы небольшого размера, но задерживаются крупные молекулы (например, белки). Использование таких фильтров помогает повысить концентрацию макромолекул (например, концентрацию белков в биологическом материале).
В настоящее время широкое применение получают фильтры с заданным размером пор, изготовленные из полимерных материалов – целлюлозы, полвинилхлорида, полиамида, нейлона и др. Их называют мембранные фильтры. Выбор материала и размера пор зависит от цели применения фильтра. Наиболее широко используют фильтры с размером пор 0,45 μm и 0,2 μm для предстерилизации и стерилизации сред для культивирования и реактивов. Мембранные фильтры с размером пор, соизмеримым с размерами клеток (5-8 μm) могут использоваться для сепарации клеток.