6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Группы крови человека

Глава 12.

Система Diego

В настоящее время в групповую эритроцитарную систему Diego (Диего) включен 21 антиген (табл. 12.1), из них два редких (Di a и Wr a) являются антитетичными по отношению к двум частым антигенам (Di b и Wr b) соответственно. Остальные 17 антигенов не имеют антитетичных партнеров и встречаются крайне редко у представителей всех обследованных популяций и этнических групп. Антиген Di a представляет определенный интерес для антропологов как своеобразный расовый маркер, поскольку встречается исключительно у монголоидов. К настоящему времени установлено, что специфичность антигенов Di a и Di b обусловлена заменой пролина на лейцин в позиции 854 на протеине полосы 3, встроенном в мембрану эритроцитов. Эта структура, выполняющая функцию транспортера анионов в клетке, также обозначается как АЕ1 или CD233.

Рис. 12.1. Генная карта локуса DI (SLC4A1, AE1, EPB3).

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Различия другой пары антигенов (Wr a и Wr b) обусловлены аминокислотной заменой Lys 658 Glu в белке полосы 3. Эритроциты с дефицитом гликофорина А имеют группу Wr(a −b −). Таким образом, для экспрессии на эритроцитах антигена Wr b (DI4) требуется присутствие как белка полосы 3, так и гликофорина А. Остальные антигены системы Diegо являются результатом точковых мутаций в различных участках гена DI, приводящих к аминокислотным заменам в соответствующих участках протеина полосы 3 (рис. 12.1). Новые аминокислотные последовательности иммуногенны и способны стимулировать синтез антител, специфически их распознающих. Нулевой фенотип, Di(a −b −), в системе Diegо не известен. Ген SLC4A1, контролирующий синтез белка полосы 3, картирован на хромосоме 17 в позиции 17q12–q21. Структура гена исследована

(табл. 12.2).

652

Антигены Dia и Dib

Антиген Di a описан Layrisse и соавт. [95] в 1955 г. Антитела против этого антигена вызвали гемолитическое заболевание у новорожденного мисс Diego, в семье европейцев и потомков коренных индейцев (Каракас, Венесуэла). Антитела, идентифицирующие антиген Di b, антитетичный фактору Di a, описаны 12 годами позднее Thompson и соавт. [164].

Антиген Di a не является редким среди индейцев Южной Америки (табл. 12.3). У них его выявляли с частотой 36 % (Allen, Corcoran [6]), у некоторых племен частота антигена Di a достигала 60–70 % [95, 99]. У представителей других монголоидных рас фактор Di a встречался с частотой 5–12 %.

Этот фактор найден и среди индейцев Северной Америки, хотя на этом континенте его частота оказалась ниже. Интересен тот факт, что антиген Di a встречается реже среди аборигенов Аляски и Канады, чем Сибири. Среди народов Юго-Восточной Азии антиген Di a выявляли с частотой 2–12 %, среди японцев частота Di a оказалась выше (12 %), чем у китайцев (5 %) (Lewis и соавт. [100], Layrisse,Arends [93]).

При проведении популяционных исследований в СССР Х.Р. Неванлинна [1] среди 500 обследованных эстонцев нашел 2 с фенотипом Di(a + ). У 1 из 105

653

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

обследованных коми, жителей села Визинги, также был выявлен антиген Di a (Eriksson, Frants [43]). Однако следует заметить, что в этом селе ранее проживало несколько китайских семей. Таким образом, не исключен импорт гена Di a в популяцию коми из китайской диаспоры.

У лиц белой расы этот антиген практически не встречается (Layrisse и соавт. [95, 94, 99], Lin-Chu и соавт. [109], Simmons и соавт. [153], Graninger [51], Won и соавт. [174]).

Случаи выявления лиц Di(a + ) среди поляков и австрийцев объясняли дрейфом гена Di a в период монголо-татарского нашествия в Западную Европу в XIII–XIV веках (Kusnierz-Alejska, Bochenek [89]). Известен один индивид белой расы, гомозиготный по гену Di a и проживавший в Австрии

(Issitt, Anstee [65]).

654

Антиген Di a отсутствует у австралийских аборигенов, жителей островов Тихого Океана и крайне редко встречается у негроидов.

Issitt иAnstee [65] призывают критически относиться к сообщениям о частоте фенотипа Di(a + ) среди различных популяций в силу ряда причин.

Во-первых, по их мнению, величина выборок, варьирующая от 29 до 5259 обследованных, не является репрезентативной.

Во-вторых, при обследовании одних и тех же этнических групп получены противоречивые результаты. Так, в одном из исследований среди 1 тыс. китайцев Тайваня фенотип Di(a + ) был найден в 32 случаях, тогда как в другом среди 772 обследованных он не был выявлен ни разу. Причины таких расхождений, как полагают Issitt и Anstee, трудно объяснить. Противоречие может быть обусловлено тем, что для исследования была использована сыворотка, которая, помимо антител анти-Di a, могла содержать антитела к одному из редких антигенов системы MN (Mt a, Mur, MUT, Hil, MINY), встречающихся у китайцев.

В-третьих, разные исследователи сообщали о выявлении антигена Di a с частотой от 1 : 4462 среди европейцев до 1 : 827 среди американских негров. Фенотип Di(a + ) не найден среди 1741 жителя Папуа – Новой Гвинеи, 1374 австралийских аборигенов, 1 тыс. американских негров и 107 жителей Ганы (Африка). В то же время есть сообщения о высокой частоте фенотипа Di(a + ) в тех же этнических группах. Большинство из таких исследований было проведено с использованием антител анти-Di a, явившихся причиной ГБН или появившихся у реципиентов, получавших трансфузии крови. В этих случаях антиген Di a был выявлен среди англичан, ирландцев а также среди белых американцев (Issitt и Anstee [65]). Сведения о возможности смешения с монголоидами отсутствовали. Одна жительница Германии, венгерка по национальности, имела фенотип Di(a +b −), т. е. правомерно полагать, что она гомозиготна по гену Di a. Вместе с тем Issitt и Anstee [65] отмечают, что факты обнаружения антигена Di a в отдельных английских и ирландских семьях вряд ли связаны с завоеваниями монголов.

Как уже отмечалось выше, обнаружение фенотипа Di(a + ) среди поляков объясняли заносом гена Di a в эту этническую группу во времена монголотатарского нашествия. Наибольшая частота фенотипа Di(a + ) (0,66 %) выявлена на Юго-Востоке Польши (область вторжения монголо-татар), а в западных районах этой страны частота антигена Di a составила 0,3 %. Оригинальная публикация содержит карту Польши, на которой отражены вариации частоты антигена Di a и районов, где имела место монголо-татарская экспансия.

Если гипотеза относительно генного дрейфа верна, то среди населения определенных регионов России и Украины антиген Di a также должен встречаться с частотой, близкой к таковой среди поляков. Можно полагать, что этот антиген имеется у татар, башкир, марийцев, мордвы, калмыков. Однако распределение антигена Di a среди жителей России пока не изучено.

655

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Гораздо меньше популяционных исследований было проведено с использо-

ванием сывороток анти-Di b (Mourant и соавт. [122], Tills и соавт. [165], EdwardsMoulds,Alperin [42], Issitt и соавт. [70]). При этом было установлено, что все без исключения Di b-отрицательные индивиды имели группу Di(a + ). Нулевой фенотип в системе Diegо [Di(a −b −)] найден не был.

Антигены Di a и Di b полностью развиты на эритроцитах новорожденных к моменту рождения (Thompson и соавт. [164], Edwards-Moulds, Aiperin [42], Layrisse, Arends [92], Lewis и соавт. [104], Tatarsky и соавт. [162], Feller и соавт. [44], Nakajima и соавт. [124]).

Антитела анти-Dia и анти-Dib

Анти-Dia

Первые 3 образца антител анти-Di a были найдены у женщин, дети которых страдали тяжелой формой ГБН, а новорожденный мисс Diego погиб от указанного заболевания (Levine и соавт. [98, 99], Tatarsky и соавт. [162]). В последующие годы были найденыдругиеобразцыантителанти-Di a,последниечастовырабатывалисьвовремя беременности,многиеизнихявилисьпричинойГБН(Richesисоавт.[143],KusnierzAlejska, Bochenek и соавт. [89], Graninger [51],Alves De Lima, Berthier [7], Zupanska и

соавт.[185]).Водномслучаеантителаанти-Di a,выявленныеуавстралийскойженщи- ныбелойрасы,имелиестественноепроисхождение(Simmonsисоавт.[153]).

Антитела анти-Di a способны вызывать посттрансфузионные реакции немедленного типа (Hinckley, Huestis [58]), однако в публикации указанных авторов сообщается об одновременном присутствии в сыворотке крови больного антител анти-с, поэтому осталось невыясненным, какие именно (анти-с или антиDi a) из них послужили причиной гемотрансфузионного осложнения.

Thompson и соавт. [164], Yasuda и соавт. [177] описали замедленные гемолитические посттрансфузионные реакции, обусловленные антителами анти-Di a.

Панели стандартных эритроцитов, используемые для рутинного скрининга иррегулярных антиэритроцитарных антител, обычно не содержат клеток Di(a + ), поэтому антитела анти-Di a, как правило, не выявляют при таких исследованиях.

В странах Америки опасность посттрансфузионных реакций, обусловленных антителами анти-Di a, выше, чем в Европе, поскольку частота доноров Di(a + ) там существенно выше. Бразильскими авторами (Zago-Novaretti и соавт. [181]), изучавшими специфичность антител среди реципиентов, получавших множественные трансфузии, антитела анти-Di a были найдены у 4 из 112 (3,6 %).

Анти-Dib

Имеются сообщения о ГБН, вызванной анти-Di b-антителами. Для лечения новорожденных потребовались обменные переливания крови (Ishimori и со-

авт. [64], Orlina и соавт. [129], Uchikawa и соавт. [166]).

656

Описан случай, когда антитела анти-Di b клинических проявлений ГБН не вызвали,несмотрянаположительныйпрямойантиглобулиновыйтестсэритроцитами новорожденногоипринадлежностьантителксубклассуIgG3(Habashисоавт.[54]). В тестах с монослоем моноцитов антитела анти-Di b вызывали более высокий уровень адгезии и фагоцитоза с клетками Di(a −b + ), чем Di(a +b + ) (Lin и соавт. [108]). Антитела анти-Di b естественного происхождения не описаны. У 2 из 74 больных аутоиммунной гемолитической анемией найдены аутоантитела антиDi b, присутствовавшие наряду с антителами других специфичностей (Daniels [37]). В одном случае аутоантитела анти-Di b вызвали аутоиммунную гемолитическую анемию с выраженнымиклиническимипроявлениями(Issittисоавт.[66]).

Аллоиммунные антитела анти-Di a и анти-Di b чаще присутствуют в виде моноспецифических, реже их выявляли в сыворотках одновременно с антителами другой специфичности. Указанные антитела чаще представлены субкласса-

ми IgG1 и IgG3 (Riches и соавт. [143], Kusnierz-Alejska, Bochenek [89],Alves De Lima, Berthier [7], Zupanska и соавт. [185], Habash и соавт. [54]). Некоторые об-

разцы антител связывали комплемент и вызывали гемолиз эритроцитов in vitro

(Kusnierz-Alejska, Bochenek [89], Mollison и соавт. [119]). Описаны агглютини-

ны с указанной специфичностью (Simmons и соавт. [153]). Оптимальным методом выявления антител анти-Di a и анти-Di b является антиглобулиновый.

Японские исследователи (Miyazaki и соавт. [118]) сообщили о 2 гетерогибридомах анти-Di a, полученных слиянием клеток мышиных миелом с В-лимфоцитами лиц, сенсибилизированных к указанному антигену. Одна из гибридом продуцировала антитела IgM, взаимодействующие в прямой реакции агглютинации в солевой среде, другая секретировала антитела IgG, которые реагировали в непрямой антиглобулиновой пробе.

Антигены Wra и Wrb (Wright и Fritz)

Антигены Wr a и Wr b на протяжении многих лет после их обнаружения не удавалось отнести к какой-либо из известных эритроцитарных групповых систем. Учитывая антитетичность связи, их в 1991 г. выделили в коллекцию 211 WRIGHT, где они были обозначены WR1 (211.001) и WR2 (211.002). Лишь в

1995 г. была показана принадлежность этих антигенов к системе Diegо, куда они были внесены с новыми обозначениями – Di3 и Di4.

Редко встречающийся антиген Wr a (Wright), описанный Holman [59] в 1953 г., имеет частоту менее 1 : 1000 среди европеоидов (табл. 12.4). Обширные исследования частоты антигена Wr a были проведены среди представителей разных этнических групп. Он был обнаружен среди монголоидов и некоторых негроидов, но не был найден среди австралийских аборигенов, жителей Папуа – Новой Гвинеи (Simmons [152]).

Исследования во многих семьях показали аутосомное доминантное наследование гена Wr a в соответствии с законом Менделя (Holman [59], Kornstad [83], Metaxas, Metaxas-Buhler [117], Lewis и соавт. [103, 107]). Результаты

657

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

исследования в одной семье указывали на возможность сцепления генов, контролирующих экспрессию антигенов Wr a и Sd a (Lewis и соавт. [103]).

Антиген Wr a полностью развит на эритроцитах к моменту рождения, однако его выраженность варьирует.

Символ анти-Wr b было впервые использован Adams и соавт. [4] для обозначения антител, найденных в сыворотке крови женщины по фамилии Fritz, и открывавших часто встречающийся антиген, антитетичный Wr a. Эритроциты сенсибилизированной женщины сильно реагировали с антителами анти-Wr a, поэтому имелись основания полагать, что они несут двойную дозу указанного антигена. Антитела сыворотки ее крови проявляли эффект дозы, реагируя более интенсивно с эритроцитами Wr(a −), чем с эритроцитами Wr(a + ). Эритроциты второго пробанда Wr(a +b −), содержащего антитела анти-Wr b, несколько отличались от эритроцитов мисс Fritz, поскольку слабо реагировали с моноклональными антителами анти-Wr b (Dahr et al [34]). Эффект дозы антител анти-Wr a и

анти-Wr b с эритроцитами Wr(a +b −), Wr(a +b + ) и Wr(a −b + ) позднее был под-

твержден с помощью иммуноферментного варианта антиглобулинового теста

(Wren, Issitt [175]).

Секвенирование кДНК протеина полосы 3 выявило замену кодонов G 1972A

вэкзоне 16. Последняя обусловливает замену глютаминовой кислоты на лизин

вположении 58 на четвертой экстрацеллюлярной петле белка полосы 3 (Bruce и соавт. [17]). У 3 индивидов, гомозигот Wr(a −b + ), имелся кодон для Glu 58, а у гетерозигот Wr(a +b + ) – кодоны как для Glu 58, так и Lys 58.

658

Антигены Wr a и Wr b устойчивы к действию протеолитических ферментов (трипсин, химотрипсин, папаин, фицин, бромелин, проназа), донаторов суль-

фгидрила и АЕТ (Daniels [36], Ring и соавт. [146]).

Указанные антигены не были выявлены на лимфоцитах, моноцитах и гранулоцитах в периферической крови.

Антитела анти-Wra и анти-Wrb

Анти-Wra

Антитела анти-Wr a встречаются часто. В различных сообщениях их частота среди здоровых лиц варьирует от 1 : 13 (McGuire, Funkhouser [113]) до

1 : 56–1 : 100 (Wallis и соавт. [171], Greendyke, Banzhaf [52], Lubenko, Contreras [111], Hardman, Beck [55]). Частота указанных антител существенно выше среди больных, родильниц и сенсибилизированных лиц, имеющих аллоантитела другой специфичности (Wallis и соавт. [171]).

Greendyke, Banzhaf [52] обнаружили анти-Wr a-антитела у каждого 3-го больного аутоиммунной гемолитической анемией.

С.А. Фатьянов и соавт. [2, 3] исследовали 1823 сыворотки крови здоровых лиц (доноров крови), беременных, сенсибилизированных к антигенам системы Rh, а также пациентов с сосудистой патологией (атеросклероз сосудов нижних конечностей, варикозное расширение вен, тромбофлебит) и заболеваниями соединительной ткани (ревматоидный артрит, системная красная волчанка) на наличие антител к антигену Wr a. Антитела выявляли непрямым антиглобулиновым и ферментным методами с эритроцитами редких фенотипов: OCCDeeWr(a + ), ОccDEeWr(a + ) и OccddeeWr(a + ) – предоставленными доктор-

ом Marcela Contreras и доктором Jeoff Poole из Национальной службы крови Великобритании (Лондон, Бристоль). Антитела анти-Wr a выявили у 1,2 % доноров, у 10,51 % беременных, у 11,42 % больных системными заболеваниями соединительной ткани, у 17,83 % больных сосудистой патологией. Среди Rhотрицательных лиц, аллоиммунизированных антигеном D, частота этих антител составила 18,52 %.

По мнению некоторых авторов, образование антител анти-Wr a в организме Wr a-отрицательных лиц в отсутствие специфической стимуляции может указывать на существование особого иммунного механизма элиминации эритроцитов in vivo, в основе которого лежит модификация протеина полосы 3 в мембране эритроцитов с возникновением de novo Wr a-подобных антигенных детерминант. В частности, присутствие анти-Wr a-антител коррелировало с интенсивностью гемолиза эритроцитов in vivo (Issitt,Anstee [65]).

Первые 2 найденных образца антител анти-Wr a явились причиной тяжелой ГБН. Позднее появились другие аналогичные сообщения (Holman [59], Arriaga и соавт. [9], Wiener, Brancato [173], Daw [41], Jorgensen, Jakobsen [77]). Антитела анти-Wr a описаны также в качестве причины гемолитических

659

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

посттрансфузионных реакций (Metaxas, Metaxas-Buhler [117], van Loghem и соавт. [168]).

Несмотря на высокую частоту антител анти-Wr a, случаи ГБН, так же как и посттрансфузионные реакции, обусловленные ими, регистрируют редко

(Lubenko, Contreras [111]).

Как уже отмечено выше, анти-Wr a-антитела часто присутствуют одновременно с аллоантителами другой специфичности. Это создает дополнительные трудности при производстве серологических стандартов из аллогенных сывороток, поскольку антитела анти-Wr a требуется адсорбировать, для чего необходимы эритроциты редкого фенотипа Wr(a + ) (Byrne, Byrne [22]).

К настоящему времени получены мышиные моноклональные антитела антиWr a класса IgG (гибридома BGU1-WR). Для получения гибридомы животных иммунизировали эритроцитами человека Wr(a + ) (Ring и соавт. [146]).

Анти-Wrb

Антитела анти-Wr b были впервые найдены у лиц Wr(a −b −) (Adams и соавт. [4], Dahr и соавт. [34]). Информации о клиническом значении этих антител мало. Больной En(a −)Wr(b −) с наличием антител анти-En a и анти-Wr b перенес гемолитическую посттрансфузионную реакцию замедленного типа после переливания ему6доздонорскойкровиEn(a + )(Furuhjelmисоавт.[47]).Эритроцитыноворожденного Wr(b + ), родившегося от матери, имевшей анти-Wr b-антитела, давали положительную прямую антиглобулиновую пробу, однако обменного переливания крови для лечения ребенка не потребовалось (Langley и соавт. [91]). Результаты хемилюминесцентных тестов дали основание полагать, что антитела анти-Wr b способны ускорять разрушение эритроцитовWr(b + ) in vivo (Poole и соавт. [133]).

Антитела анти-Wr b нередко имеют аутоиммунную природу. Golgfinger и соавт. [50], Issitt и соавт. [67], изучая элюаты с эритроцитов больных аутоиммунной гемолитической анемией с положительным прямым антиглобулиновым тестом, у 110 пациентов выявили антитела, не относящиеся к системе Rh; у 46 – идентифицированы аутоантитела анти-Wr b, при этом у 4 они были моноспецифическими. У 2 больных указанные аутоантитела явились причиной внутрисосудистого гемолиза со смертельным исходом (Dankbar и соавт. [40],Ainsworth и соавт. [5]).

Получен ряд серий мышиных моноклональных анти-Wr b-антител (Ridgwell

и соавт. [145], Anstee, Edwards [8], Rouger и соавт. [148], Gardner и соавт. [49]),

одна гибридома, продуцирующая анти-Wr b-антитела, получена из мононуклеаров обезьян Macacus rhesus (Reid и соавт. [140]).

Наследование и полиморфизм антигенов Diegо

Посемейными исследованиями установлено, что ген Di a передается по наследству как доминантный признак (Cann и соавт. [23], Graninger [51], Lewis и

соавт. [104], Race, Sanger [137], Levine, Robinson [98], Layrisse и соавт. [96]).

Протеин полосы 3, полученный из эритроцитов, подвергнутых обработке

660