6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Группы крови человека

а лица, гетерозиготные по Le и le секреторы, должны иметь эритроциты Le(a −b +c −d + ). Однако при исследовании эритроцитов 98 взрослых лиц авторы нашли только по одному из 4 антигенов на каждом образце эритроцитов: Le a, или Le b, или Le c, или Le d. Результаты эксперимента свидетельствовали о том, что Le c и Le d действительно вырабатываются в отсутствие гена Le, но без какого-либо участия гена le.

Предполагается, что при отсутствии гена Le активность гена Se в секреторных клетках возрастает, в результате чего синтезируется больше олигосахаридных цепей 1Н-типа, т. е. антигена Le d, а при отсутствии генов Le и Se (у лиц lese / lese) прекурсорные олигосахаридные цепи 1 типа остаются без изменения. Именно эти структуры (цепи 1 типа) распознаются анти-Le c-антителами.

Таким образом, при очевидной фенотипической связи антигенов Le a, Le b и Le d, Le c их генетическая связь подтверждения пока не находит.

Некоторые авторы полагают, что обозначение антигенных структур, выявляемых антителами анти-Le d и анти-Le c, символом Le(d + ) и Le(c + )не соответствует существующим правилам, поскольку ген Lewis не имеет отношения к синтезу этих антигенов [115].

Высказывались предложения взамен обозначения Le d использовать термин

"Н тип 1" (Mollison и соавт. [173]), вместо Le c − "прекурсор тип 1" (Lodge, цит. по [115]).

Антигены Х иY

Антиген CD15, или SSEA-1 (Stage Specific Embryonic Antigen), известный как X [83, 100, 212], а также антиген Y (или Le y) контролируются генами, сцепленными с Le и Se на 19 хромосоме [236], и представляют собой, по данным Hakomori и соавт. [102], изомеры Le a и Le b. Некоторые сыворотки к антигенам Lewis одновременно реагируют с антигенами Х иY.

Считается, что антигены Х и Y участвуют в клеточно-клеточной адгезии и играют важную роль в метастазировании рака у человека [38, 69, 77, 97, 101, 103, 129, 131, 222, 223].

Эти антигены отсутствуют на эритроцитах, но встречаются в большом количестве в клетках аденомы, аденокарциномы желудочно-кишечного тракта и молочной железы [35, 144]. Из опухолей выделены активные гликолипиды, несу-

щие антигены Х [101, 103, 223] иY[35, 144].

Y-антиген накапливается в опухолях и его уровень коррелирует со стадией заболевания.

Миелоидный тип Х-антигена контролирует ген, расположенный на хромосо-

ме 11 [227].

Вещества, подобные Lewis-антигенам человека, найдены в гуммиарабике (Matsuzawa [161]), экстрактах плодов некоторых высших растений

(Yamamoto [238]).

Ассоциаций антигенов Lewis с заболеваниями не выявлено.

561

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Геногеография

Антигены Lewis в различных популяциях встречаются с неодинаковой частотой (табл. 9.5). Среди европеоидов антигены Le a и Le b распространены практическисодинаковойчастотой.УнегроидовфенотипLe(a −b −)встречается существенно чаще, чем у монголоидов и европеоидов [29]. Высокая частота этого фенотипа зарегистрирована у хакасов. Фенотип Le(a +b + ) чаще выявляют у австралоидов (маори).

* авторы цитированы по сводке А.К. Туманова и В.В. Томилина [11].

Lewis в жидкостях организма

Антигены Lewis присутствуют в слюне, желудочном соке, плазме крови (сыворотке), содержимом кист, молоке, моче, семенной жидкости и, по-видимому, во всех других жидкостях, секретируемых и экскретируемых организмом.

Grubb [91, 92] нашел субстанцию Le a в слюне лиц, имеющих фенотип Le(a +b −). Субстанция Le b у них отсутствовала. Фенотип Le(a +b −) таких людей, установленный по эритроцитам, слюне и сыворотке крови, совпадает.

У людей Le(a −b + ) фенотип, установленный при исследовании эритроцитов и слюны, часто не совпадает, поскольку у большинства из них слюна содержит обе субстанции − Le a и Le b. Сыворотки лиц Le(a −b + ) нейтрализуют анти- Le b-антитела, а также, хоть и в меньшей степени, анти-Le а-антитела [40, 41, 53, 92, 154, 165, 211].

Cначала эти находки вызывали недоумение, однако по мере накопления сведений стало ясно, что в этом проявляется своеобразие системы Lewis.

Продукция субстанции Le a в небольшом количестве является нормальным свойством, присущим большинству лиц Le(a −b + ). Так Grubb [92], обследуя 1000 шведов (500 мужчин, 500 женщин), отметил, что слюна более 90 % лиц содержит субстанцию Le a. Для сравнения: частота Le(a + ) в этой популяции (по эритроцитам) около 22 %.

562

Несоответствие фенотипов, установленных по слюне и эритроцитам, обусловлено лишь количественными параметрами − пороговой дозой вещества Lewis на эритроцитах. У лиц Le(a −b + ), генетически Le / Se, в плазму выделяется много вещества Le b. Оно адсорбируется на эритроцитах в дозе, достаточной для обнаружения даже относительно слабыми сыворотками анти-Le b. Если

вплазму крови выделяется небольшое количество вещества Le a, то адсорбированного на эритроцитах субстрата оказывается мало для того, чтобы сыворотки анти-Le а, даже относительно сильные, могли проявить свою агглютинирующую активность.

Слюна лиц Le(a −b −), как правило, не содержит ни Le a-, ни Le b-вещества. При использовании высокоактивных сывороток Ornitoff и соавт. [186] обнаружили следовые количества Le a и Le b в плазме и слюне лишь у небольшого числа лиц с фенотипом Le(a −b −).

Присутствие некоторого количества вещества Le a в слюне Le(a −b −)

несекреторов констатировали Gunson и Latham [95], Andresen [16], Sturgeon, Arcilla [218]. Однако Race и Sanger [197] высказали сомнение по этому поводу, указав, что результаты экспериментов могли быть искажены особенностями анти-Le a-сывороток, использованных для постановки реакции нейтрализации.

В1948 г. Grubb [91] указал на связь системы Lewis со способностью выделять (секретировать) группоспецифические субстанции АВН в жидкости организма. На основе полученных им данных сделано следующее заключение:

лица Le(a +b −) не секретируют АВН-субстанций, лица Le(a −b + ), наоборот, секретируют АВН-вещества,

лица Le(a −b −) могут быть как секреторами (≈ 80 %), так и несекрето-

рами (≈ 20 %) (табл. 9.6).

Brown и соавт. [47] нашли, что антиген Le a слюны существует в двух разновидностях, одна из которых преципитируется кроличьими анти- Le a-сыворотками, другая − не преципитируется. Эти разновидности обнаружены в слюне лиц Le(a +b −), а позднее − в слюне лиц Le(a −b + ). К таким же выводам пришли Baer и соавт. [27] при использовании куриных анти-Le a-сывороток.

Установлено, что гены Le и Se влияют на секрецию антигенов А, В и H, однако присутствие вещества Lewis в слюне и других жидкостях организма не зависит от секреторного гена Se. Как указано выше вещество Le a найдено даже

вслюне Le(a −b −) несекреторов AB и H (Gunson и Latham [95], Andresen [16], Sturgeon,Arcilla [218]).

Секреторы Le a среди европеоидов встречаются в 92 % случаев, несекреторы  − в 7 %; секреторы АВН среди европеоидов составляют 78,9 %, несекреторы − 21,0 %. Среди негроидов секреторы Le a составляют 66,6 %, несекреторы  − 29,8 %; секреторы АВН − 74,9 %, несекреторы АВН − 25,0 %.

Среди секреторов и несекреторов АВН частота секреторов Le a примерно одинакова. Это свидетельствует о том, что локусы секреции Le a и секреции АВН генетически не связаны между собой, т. е. гены Lele и Sese независимы.

563

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Примечание. В круглых скобках частота в %.

Лица,генетическиявляющиесяLeSe / SeиLeSe / se,секретируютABH-субстанции. В этом проявляется регулирующая роль гена Se в отношении секреции АВН, однако секрецияLewisопределяетсяпреимущественногеномLe (иногдаLeиАВН,нонеSe).

Лица, имеющие ген Le, все без исключения секретируют антигены Le a или Le a + Le b, а лица, не имеющие гена Le (генетически le / le), выделяют со слюной антигены Le c и Le d, достаточно близкие по структуре антигенам Le а и Le b.

Lawler [139] нашел, что молоко является более богатым источником вещества Le a, чем слюна родильниц, выделителей Le-субстанций.

McConnell [163] обнаружил вещество Le a в желудочном соке в таком же количестве, как в слюне.

Более неожиданной явилась находка вещества Le a в большом количестве в моче (McConnell [163]).

Субстанция Le a обнаружена Lodge и Usher [150] в семенной жидкости, однако это не согласуется с данными Grubb [92], который не нашел антигена Le a в семенной жидкости 5 мужчин Le(a + ).

Упомянутые выше японские авторы [80] обнаружили субстанцию T (Le a-подобную субстанцию) в слюне, сыворотке крови, молоке, моче, амниотической жидкости, меконии, а также гуммиарабике. Присутствие Le a-подобного вещества в гуммиарабике подтвердил Matsuzawa [161].

Онтогенез

Распределение антигенов Lewis у взрослых и детей неодинаково (табл. 9.3, 9.7).Andresen [15] и Jordal [122] не обнаружили антигенов Lewis у новорожден-

ных. Из 152 новорожденных и 50 детей в возрасте до 6 мес., обследованных

Jordal [122], все были Le(a −b −).

564

По данным Brendemoen [39] и других авторов [62, 122, 124, 140], антиген Le a

в пуповинной крови отсутствует, у детей до года его частота увеличивается до 70 −90 %, а затем падает до 40 %. У детей 2 −3-летнего возраста частота антигена Le a такая же, как у взрослых  − около 22 % .

Антиген Le x (Le ab) хорошо выражен с момента рождения [122, 218] и выявляется сыворотками анти-Le x с той же частотой (≈ 1 %), что и у взрослых.

Lawler и Marshall [140, 141] показали, что антигены Le a и Le b присутствуют у новорожденных в слюне и сыворотке крови, но не выявляются на эритроцитах. Дети, чей фенотип впоследствии становился Le(a +b −), содержали в слюне и сыворотке вещество Le a, но не Le b. Дети, фенотип Le(a +b −) которых становился Le(a −b + ), имели вещества Le a и Le b в сыворотке крови и слюне, причем вещество Le a в сыворотке присутствовало только в период, когда эритроциты были Le(a + ). Дети, которые становились Le(a −b −), не имели ни вещества Le a, ни вещества Le b в слюне и сыворотке.

М.А. Бронникова и А.С. Гаркави [4] указали на несоответствие группы крови Lewis, установленной по сыворотке крови новорожденных и эритроцитам.

При использовании обычных методов (на плоскости с нативными эритроцитами) антигеныLe aиLe bудетейобнаружить,какправило,неудается,но,приэтом,какпоказалиCutbushисоавт.[62],13из22образцовпуповиннойкровидавалиположитель- нуюнепрямуюантиглобулиновуюпробуссывороткойанти-Le a.

М.А. Бронникова [3], используя козью иммунную антисыворотку, смогла обнаружитьLe aиLe b наэнзимированныхэритроцитахноворожденных.

Примечание. В круглых скобках – количество обследованных семей, без скобок – количество детей в семьях. «Le +» – субстанция Le a в слюне присутствует, «Le–» – отсутствует.

Вариабельность антигенов Lewis, по-видимому, присуща быстрорастущему организму, когда превалируют процессы ассимиляции. По наблюдениям некоторых авторов (Brendemoen [41], Hammar и соавт. [104]), агглютинабельность эритроцитов по отношению к сывороткам анти-Le a и анти-Le b у беременных

565

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

существенно снижена (иногда до нуля), но спустя некоторое время после родов восстанавливается [115].

Исследуя особенности возрастной трансформации антигенов Lewis у новорожденных и детей, М.А. Бронникова [3] пришла к ряду важных выводов, которые можно считать классическими, поскольку они в полной мере отражают состояние системы Lewis в этот период онтогенеза:

––в сыворотке новорожденных присутствуют оба вещества (Le а и Le b), а на эритроцитах они отсутствуют. Большинство новорожденных имеют фенотип Le(a −b −).

––у детей определяются антигены, отсутствующие у обоих родителей. Большинство детей до года имеют фенотип Le(a +b + ). Антиген Le а присутствует чаще, чем Le b. Lawler и Marshall [140, 141] полагают, наоборот, что Le b чаще.

––фенотип Le(a +b −) и отсутствие секреции АВН в первые годы жизни часто не связаны. Фенотип Le(a +b −) чаще сочетается с группой О(I).

––группа Le(a −b + ) формируется за счет постепенного уменьшения синте-

за Le а в группе Le(a +b + ).

––антигены Lewis окончательно формируются к 5 годам жизни, но возрастная трансформация по годам весьма индивидуальна. Группа

Le(a +b −) формируется раньше, чем Le(a −b + ).

––агглютинабельность эритроцитов новорожденных при воздействии на них сыворотками анти-Le а и анти-Le b выражена в меньшей степени, чем у взрослых, и не усиливается после обработки трипсином, а с

3-летнего возраста усиливается, как и у взрослых.

В эмбриональном и раннем постнатальном периоде, как полагает М.А. Бронникова [3], синтезируются не Lewis-антигены, а их предшественник, который затем трансформируется в Le а или Le b или утрачивает серологическую активность. Редкие случаи фенотипа Le(a +b + ) следует рассматривать как нарушение нормального процесса синтеза антигенов Lewis.

Считается [115], что Se- и Le-генспецифические трансферазы продуцируются в меньшем количестве у новорожденных, чем у взрослых. После рождения, примерно до 1 −1,5 лет жизни, Le-генспецифическая трансфераза вырабатывается в большем количестве, чем Se-генспецифическая. На этом фоне синтезируются преимущественно иммунодоминантные Le a-сахара, фенотип Le(a +b −), и нередко иммунодоминантные Le b-сахара, фенотип Le(a +b + ) [62, 140].

Начиная с 2 −3-летнего возраста продукция трансфераз уравнивается в количественномотношении,ифенотипдетейLe(a +b −)иLe(a +b + )изменяетсянаLe(a −b + ).

MäkeläиMäkelä(154)показали,чтоплазмановорожденныхнетрансформирует эритроциты Le(a −b −) взрослых в Le(a + ), но эритроциты Le(a −b −) детей могут трансформироваться в Le(a + ) при инкубации их в плазме взрослых Le(a + ).

Низкий уровень трансферазной активности и, следовательно, низкая концентрация олигосахаридов Lewis в плазме новорожденных создают видимость

566

отсутствия на эритроцитах антигенов Lewis. Характер реагирования эритроцитов новорожденных с сывороткой анти-Le x также указывает на то, что различия

всинтезе антигенов Lewis у детей и взрослых количественные.

Упредставителей монголоидных рас синтез антигенов Lewis имеет свою специфику. Lin и соавт. [148] нашли, что у детей тайваньцев в отличие от европейцев антиген Le b развивается раньше Le a, из чего было сделано заключение, что у монголоидов ген Se более активен, чем Le по сравнению с европеоидами.

Не исключено, что негроиды имеют свои особенности в формировании антигенов Lewis в онтогенезе, поскольку частота фенотипа Le(a −b −) среди представителей этой расы существенно выше, чем среди белых.

Lewis-антигены и Lewis-антитела у беременных

Brendemoen [41], Comoens и соавт. [58] и другие авторы [199, 224] обнару-

жили, что антигены Le a и Le b на эритроцитах беременных выражены слабее, чем до беременности. Некоторые женщины, типированные как Le(a −b + ) или Le(a +b −), во время беременности приобретали фенотип Le(a −b −), т. е. полностью утрачивали антигены Lewis. В то же время способность слюны этих женщин нейтрализовать сыворотки анти-Le a и анти-Le b не нарушалась (Hammar и

соавт. [104], Taylor и соавт. [224]).

На ослабление групповых антигенов АВО при беременности указывали Schachter и соавт. (цит. по Issitt, Anstee [115]), объясняя это тем, что продукция А-генспецифической N-ацетилгалактозаминилтрансферазы у беременных заметно снижается, вследствие чего уменьшается синтез группоспецифических олигосахаридов. Подобное объяснение экстраполировано на редукцию у беременных антигенов Lewis. Однако наблюдения Hammer и соавт. [104] показали, что это не совсем так. У беременных уровень олигосахаридов Lewis в плазме почти такой же, как у небеременных, но относительная концентрация липопротеинов по сравнению с общей клеточной массой эритроцитов существенно выше. Вновь синтезируемые олигосахариды Lewis, по-видимому, с большей скоростью связываются с липопротеинами плазмы, чем со сфинголипидами стромы эритроцитов. При таких условиях на эритроцитах адсорбируется существенно меньше Lewis-олигосахаридов, чем вне беременности.

Маловероятно, что беременные могут вырабатывать антитела анти-Le a и анти-Le b в тот период, когда антигены Lewis на их эритроцитах отсутствуют. Тем не менее остается фактом, что частота обнаружения антител анти-Le a и анти-Le b у беременных выше, чем у других лиц (Kissmeyer-Nielsen [132]). В этом проявляется еще одна особенность системы Lewis.

Issitt и Anstee [115] привели интересный случай: у женщины на 7-м мес. беременности обнаруживали сильные антитела анти-Le b, но когда через 3 мес. после рождения ребенка у нее была вновь взята кровь с целью получения тестового реактива анти-Le b, антител в ее сыворотке не оказалось, а эритроциты имели фенотип Le(a −b + ).

567

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Комментируя этот случай, Issit указывает, что частота обнаружения антител против антигенов Lewis могла бы быть неизмеримо выше при условии целенаправленного скрининга этих антител. Однако скрининг антител Lewis в родовспомогательных учреждениях и учреждениях службы крови, как правило, не проводят из-за малой их клинической значимости.

Внезапное исчезновение антител Lewis, по-видимому, возможно не только у беременных женщин. Мы наблюдали исчезновение антител анти-Le a у 22-лет- него мужчины через год с момента их обнаружения [5].

Фенотип Le (a +b + )

Среди европеоидов этот фенотип встречается редко, но чаще всего у представителей монголоидных рас (японцев [146, 218], тайцев [56]), а также у негроидов и австралоидов (аборигенов Австралии [36, 232], Полинезии [108]).

Broadberry и Lin-Chu [44] нашли фенотип Le(а +b + ) у 22 −25 % китайцев жи-

телей Тайваня; Henry и соавт. [108]  − у 10 −40 % полинезийцев.

В соответствии с существующими представлениями о синтезе олигосахаридов Lewis фенотип Le(a +b + ) возникает, если Le-генспецифическая трансфераза сверхактивна и добавляет L-фукозу к субтерминальному N-ацетил- D-глюкозамину прежде, чем Se-генспецифическая трансфераза присоединит L-фукозу к терминальной D-галактозе. В результате антиген Le a не может быть конвертирован в Le b и остается в плазме в виде олигосахарида Le a. Наряду с этим синтезируется и олигосахарид Le b. Оба олигосахарида (Le a и Le b) присутствующие в плазме, адсорбируются на эритроцитах, придавая им фенотип

Le(a +b + ).

Henry и соавт. [107, 108] пришли к выводу, что фенотип Le(a +b + ) появляется в результате действия особого гена Sew (аллеля Se), являющегося суперактивной формой гена Le.

Наличие гена Sew позволило Cowles и соавт. [60] и другим авторам [44, 108] объяснить повышенную частоту фенотипа Le(a +b + ) среди жителей Тайваня.

Обнаружены две мутации гена Se: одна влияет на активность гена Se у европейцев, обе вместе изменяют активность гена Se у полинезийцев несекреторов.

Ген S w пока детально не изучен. Не исключено, что фенотип Le(a +b + ), обусловливаемый геном Sew, отчасти может быть связан с тем, что типирование монголоидов проводят сыворотками европеоидов, которые, как нам представляется, могут неодинаково реагировать с эритроцитами представителей разных рас. Однако это всего лишь наше предположение.

Эритроциты, адсорбирующие Le b из плазмы и являющиеся Le(a −b + ), часто несут некоторое количество вещества Le a. Обычные поликлональные сыворотки анти-Le a и анти-Le b типируют такие клетки как Le(a −b + ), однако сильные сыворотки анти-Le a, особенно моноклональные, способны выявить антиген Le a.

Некоторые авторы [115] полагают, что при исследовании различных популяций, в том числе монголоидных, с помощью активных моноклональных

568

Рис. 9.1. Химическая структура антигенов Le а, Le b, Le d и Le c.

реагентов анти-Le a, следовые количества Le a, часто присутствующие, но не выявляемые поликлональными сыворотками анти-Le a, могли создавать видимость фенотипа Le(a +b + ). Вместе с тем нельзя полностью исключить возможность существования у монголоидов гена Sew, обусловливающего более высокую частоту фенотипа Le(a +b + ) по сравнению с европеоидными популяциями.

Sturgeon и Arcilla [219], обследуя семьи, где имелись родители и дети с фенотипом Le(a +b + ), констатировали, что у лиц Le(a +b + ) реакция с Le а выражена сильнее, чем с Le b. В слюне обнаруживали сильные субстанции Le x и Н. У 13 контрольных доноров Le(a +b −) в слюне отсутствовали субстанции Le b и АВН. По содержанию веществ Le а и Le b в слюне лица с фенотипом Le(a +b + ) занимали промежуточное положение между лицами Le(a −b −), имеющими низкий титр групповых субстанций, и Le(a −b + ) с высоким титром групповых веществ.

569

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Рис. 9.2. Химическая структура антигеновALeb, BLeb, Lex, Ley иALey.

Химическая структура антигенов Lewis

Иммунодоминантные рецепторы Lewis, как впервые установлено

Morgan, Watkins, Kabat (Watkins [234]), имеют одинаковую химическую структуру независимо от того, на каком носителе они расположены: на клеточной мембране или в жидкой части крови, в слюне или молоке, желудочном соке или моче.

Антигены Lewis представляют собой олигосахаридные цепи 1 типа (Watkins [234]) (рис. 9.1). В слюне они связаны через глюкозу с гликопротеинами, в плазме крови − через глюкозу с гликосфинголипидами.

Специфичность детерминант обусловлена положением фукозы на концевом участке олигосахаридной цепи, который представляет собой дисахарид Galβ1 → 3GluNAc. Если фукоза присоединена к углероду 4 на

570