5 курс / Инфекционные болезни / Доп. материалы / Mechnikov I.I. _Nevospriimchivost v infekcionnyx boleznjax
.pdf262 ГЛАВА VIII
Г е о р г и е в с к и А |
вакцинировал зеленых |
лягушек (Rana |
||
esculenta), приученных жить в термостате |
при 30°. Он |
при· |
||
вивзл им каждые 4-7 дней |
значительные |
nозы .культуры |
||
бацилл синего гноя, |
нагретые |
до 80°, чтобы убить всех |
ми· |
|
крабов. Через несколько недель (3-4) подготовленные таким
образом лягушки становились менее восприимчивыми, чем
их свидетели при тех же условиях. Так, лягушки, привитые
смертельной nозой живых бацилл, несомн~нно, обнаружи·
вали известную степень приобретенного, хотя и слабого
иммунитета. Они хорошо выносили безусловно смертельную
для свидетелей дозу и даже в полтора раза большую, но погибали от двойной дозы. Лимфатическая жидкость при·
витых л-ягушек елабо агглЮтинировала палочки синего r:ноя
( 1 : 20-1 : 30), служа им в то же время отличной питатель·
ной средой. Г е о р г и е в с кий убедился в том, что агглю
тинация совершенно недостаточна для установления иммуни
тета у лягушки. И действительно, агглютинированные ба·
uиллы очень вирулентны.
Подробное исследование явлений, происходящих в имму низированной лягушке, выяснило следующие данные. Ба· uиллы,· впрыснутые в спинной лимфатический мешок, в тече ние первых мгновений свободны в жидкости и сохраняют
<:вою форму, не превращаясь в зерна. Микробы, переносимые
лимфатическим потоком, быстро распространяются во всем
те.11е. Но уже очень скоро после впрыскив·ания некоторые
лейкоциты начинают поглощать бациллы синего гноя, кото
рые превращаются в зерна внутри этих клеток. Позднее фагоцитарная реакция усиливается и через 15-20 часов все
бациллы находятся уже внутри лейкоцитов. Легко убедиться
в том,. что ·микробы эти .были nоглощены живыми. Через
48 часов после прививки лимфа спииного мешка не заклю
чает больше микробов ни .внутри, ни вне клеток. Но в жид·
кости этой, посеянной на питательных средах, еще через
JS и даже 18 дней nосле прививки развиваются колонии
бацилл синего гноя.
Из этих данных можно заключ"йть, что холоднокровные nозвоночные сnособны приобретать слабую степень иммуни тета, и что в этой приобретенной невосприимчивости наблю·
ОБЗОР ФАI<ТОВ ПРИОБРЕТЕННОГО ИМ."<<УНИТЕТА |
263 |
дается явный фагоцитоз, но что бактерицидная способность
жидкостей отсутствует.
Для того чтобы составить себе более полное понятие
о механизме приобретенного иммунитета, следует наблюдать
его у высших позвоночных, у которых легко достигается
очень высокая степень этой невосприимчивостй. Прежде чем предст.авить чиrателю общий итог вопроса, мы должны об
ратиться к млекопитающим и пересмотреть достаточное число
примеров.
В течение долгого времени исследования приобретенного иммунитета сводились почти исключительно к разбору дан
ных, наблюдаемых у животных, подверженных прививкам
первой и второй пастеровской вакцины против сибирской язвы. Этим путем удалось собрать большое число важных фактов; главные из них и будут представлены читателю.
Но раньше, чем приступить к этому вопросу, необходимо
дать общее понятие относительно приобретенного иммунитета лабораторных животных к вибрионам, так как пример этот
играет преобладающую роль во всей главе приобретенного
иммунитета против микробов.
Б е р и н г и Н и с э н 1 в своих исследованиях о бактери
цидной сnособности серумов, между прочим, исследовали несколько образчиков серумов, происходящих от животных, nривитых про.тив различных микробов. В то время как
в большинстве случаев приобретенный иммунитет невызы вал нИкакого усиления этой способности, кровяная сыворотка
-морской свинки, хорошо иммунизированной против вибриона
Г а м а л е и (Vibrio Metchnikovi), оказывалась гораздо бак
терициднее относительно последнего, чем серум новых и
чувствительных свинок.
Названные авторы пришли к тому выводу, что в приоб
ретенном иммунИтете, по крайней мере в случае приведен
наго. вибриона, главная роль принадлежит бактерицидному
веществу, развивающемуся в жидкостях вакцинированных
животных. Они удовлетворились этим наблюДением, не по
пытавшись выяснить ход разрушения вибрионов в организме
1 Zeitschrift fiir. Hygiene, 1890, т. VШ, стр. 412.
264 |
ГЛАВА Vlll |
привитых морских свинок. Пф е й ф ф е р 1 в сотрудничестве
с И с а е вы м попробовали пополнить этот пробел. Только
вместо вибриона Г а м а л е и исследователи эти сосредото·
чили свои усилия на изучении приобретенного иммунитета
морских свинок к холерному вибриону. Так как микроб этот д.Jiя свинок вообще менее вирулентен, чем вибрион Г а м а·
л е и, то для того, чтобы вызвать смертельную инфекцию, его
надо впрыскивать не в подкожную клетчатку, 'а в брюшную
полость. Мы уже видели в VI главе, что холерный вибрион,
привитый в брюшную полость свинки, встречает сильное со
противление 'со стороны лейкоцитов, схв~тывающнх живых и
вирулентных вибрионов н переваривающих их, освобожд~я
· таким образом организм. Но, когда увеличивают число виб
рионов, последние развиваются, несмотря на фагоцитарную
реакциЮ. Они размножаются в брюшной полости, откуда
наводняют лимфатические и кровяные сосуды и вызывают
смерть животного.
Поэтому у морской свинки легко вызвать смертельную инфекцию холерным вибрионом. Но ее легко также вакцини
ровать против этой экспериментальной болезни. Для этого
стоит только привить несмертельную дозу живых холерных
вибрионов или же культуру их, убитую высокой температу· рой, или, наконец, кульТурную жидкость, освобожденную фильтрацией от вибрионов. Всеми этими путями можно через
короткое время достичь искусственного иммунитет~ морски)t
свинок. Если в это время взять у них немного крови и к ее сыворотке прибавить небольшое количество холерных виб рионов in vitro, то легко убедиться в их исчезновении под
влиянием бактерицидного вещества, растворенного в жид·
кости. В этом отношении мы видели, следовательно. боль
шую аналогию с фактами, установленными Б е р и н г о м и
Н н с э н о м по отношению к вибриону Га м а л е и.
Впрыснув в брюшную полость вакцинированной морской
свинки· известное количество холерной культуры, содержа·
щей вирулентные и подвижц.ые вибрионы, и взяв затем, по-
1 Zeitschrift fO.r |
Hygiene, |
1894, т. XVII, стр. 355, и Deutsche med. |
Wochenschrift, 1896, |
стр. 97 и |
J 19. |
~
i
!
i
ОБЗОР ФАНТОВ ПРИОБРЕТЕННОГО ИМ•..,УНИТЕТА |
265 |
мощью стеклянной трубочки, немного. перитонеальной жид
кости, можно убедиться в том, что вибрионы подверглись
глубоким видоизменениям в невосприимчивом организме.
Уже через несколько минут после впрыскивания вибрионов. лейкоци1:ы почти совершенно исчезают из перитонеальной
жидкости; в ней находят только несколько маленьких лим
фоцитов и множество вибрионов, большинство которых nре вратилось в зерна (фиг. 39), представляя вполне типичное
пфейфферовское явление: Рядом с круглыми зернами наблю
даются и вЗдутые вибрионы, и такие, которые сохранили
нормальную форму. Все они совершенно неподвижны. Не
которые зерна. соединены маленькими кучками, другие
остаются изолированными в жидкости.
Если к висячей капле, заключающей превращенных
вибрионов, прибавить немного разбавленного водного раст
вора метиленовой синьки, то некоторые· зерна ~чень сильно
окрашиваются, в то время r<ак другие представляют очень
бледную, едва заметную окраску. Многие из этих зерен еще живы; это видно из того, что вне организма они расправля ются и вновь принимают вид вибрион9в. Но большое число
:"~тих зерен не обнаруживает никакой жизненности и, очевид но, мер_твы. П ф ей ф ф е р и некоторые другие наблюдатели
утверждают, что зерна могут раствориться в перитонсальной
жидкости вполне, подобно тому как кусок сахара раство ряется в воде. Я тщательно старался удостовериться в этом
явлении исчезновения зерен в висячих каплях nеритонеаль~
но~ жидкости, но никогда не наблюдал уменьшения числа
превращенных вибрионов. Его не было даже через несколько
дней; я не видел также процесса растворения зерен. Тем не
менее несомненно, что зернисто.е перероЖдение указывает на
очень серьезное повреждение холерных вибрионов под влия
нием перитонеальной жидкости иммунизированного орга
низма.
Было желательно определить механизм пфейфферов
скоrо явления; Фишер 1 старался свести его. к осмотиче
ским влияниям солей тех жидкостей, в которых находятся
1 Zeitschcift fii1' Hygiene, 1900, т. XXXV, стр. 1.
ГЛАВА VIII
вибрионы. По его мнению, внутриклеточное давление послед
них увеличивается под влиянием большего или меньшего
содержания солей в тех жидкостях, в которых они разви лись. Вследствие этого вибрионы разбухают или же выру
екают круглую каплю протоплазмы из одного из св:>их по
люсов. Объяснение это не было достаточно обст~влено авто ром и его нельзя считать доказанным. Наоборот, приходится допустить, что зернистое перерождение обязано фермента
тивному действию перитонеальцого экссудата, как мы это
увидим ниже.
В то время как вибрионы претерпевают это перерожде
ние в брюшной полости иммунизированной морской свинки,
последняя оправляется от кратковременноГо недомогания и nродолжает жить; новые ·же. не предохраненные морские
свинки умирают с громадным количеством вибрионов, киша
щих в брюшном экссудате. Разница между обоими животными
в высшей степени резкая и понятно, что Пфейффер, пора женный ею, мог приписать приобретенный иммунитет своих
свинок· исключительно зернистому перерождению, вызван
ному бактерицидным веществом, заключенным в жиnкостях
иммунизированного животного.
Легкость, с которой наблюдается изменение формы ви-·
брионое под влиянием жидкостей организма, значительно облегчает изученИе бактерицИдного вещества.
Прежде чем nерейти к вопросу о роли вещества этого
в приобретенном иммунитете, мы должны остановиться ·на r-лавных свойствах его. Способность вызывать nфейфферов
ское яnление, очень явная в брюшной жидкости, представ
ляется такой же и в кровяной сыворотке Иммунизированных морских свинок; .это было показано В орд э. l(огДа серум
совершенно свеж, то капли его достаточно, чrобьi легко и
быстро превратить множество вибрионов в зерна.
Но достаточно срока в несколько дней или |
наrревания |
|
до 55° в течение часа для nолного исчезновения |
вещества, |
|
nроизводящего пфейфферовское |
явление. Особенность эта |
|
тотчас обнаруживает nрисутст!fие |
микроцитаза в |
жидкостях |
морской свинки, которая приобрела иммуниrет против холер ного вибриона.
ОБЗОР ФАК[ОВ ПРИОБРЕТЕННОГО ИММУНИТЕТА |
267 |
Кровяная сыворотка и перитонеальная жидкость мор ской свинки, однако, и после освобождения от микроuитаза нагреванием до 55° и 56° сохраняют поразительное влияние на вибрионов. Последние не претерпевают более зернистого
перерождения под влиянием нагретых жидкостей, но стано
вятся неподвижными.- скучиваются и nриобретают особенную
чувствительность к действию цитаза. Вскоре nосле открытия пфейфферовскоrо явления мне удалось доказать, 11то это зернистое перерождение мuжет быть при следующих усло виях полуqено in vitro. Приготовляют висячую каплю из
кровяного серума· морской свинки, вакцинированной против
холерного ·вибриона; серум этот потерял способность вызы
вать сам по се.бе зернистое nерерождение вибрионов. К нему
прибавJJяю·r капельку брюшной лимфы новой, непривитой, морской свинки; лимфа эта заключает живые или мертвые
лейкоциты и сама по себе также неспособна вызвать пфейф
феровское явление.
Когда же к смеси этих двух жидкостей, из которых
каждая отдельно недеятельна, прибавляют немного холер
ных вибрионов, то последние немедленно превращаются в зер
на. Это превращение, полученное iп vitrt>, вполне сходно
с тем, которое происходит в брюшной полости вакцинирован
ного животного.
Б о р д э 1 сделал в моей лаборатории очень обстоятель
ную работу относительно пфейфферовского явления вне ор
ганизма. Он нашел, что в моем опыте брюшная лимфа мо
жет быть заменена кровяной сывороткой новай морской
свинки, не мешая зернистому nерерождению.
Бор д э значительно разработал этот вопрос и пришел
к тому результату, . что пфейфферовское явление обязано
действию двух веществ. Одно из них находится в нагретых
до 55-561) (или иным nутем лишенных возможности само
стоятельно вызывать зернистое перерождение) серуме и
брюшной жидкости морской свинки, в-акциw.ированной nротив холеры. Вещество это выдерживает вышеупомянутую темпе
ратуру и теряет свою способность только после нагреваниs;~
1 Annales de 1'1nstitut Pasteur, 1895, стр. 462.
268 |
ГЛАВА VIII |
до 68-70°. |
Второе из этих веществ, находящееся в брюш |
ной лимфе или в кровяной сыворотке свежей морской свинки.
разруШается, наоборот, при 55-56° и есть не что иное, как
обыкновенный цитаз (или алексин), -свойственный жидкостям
нормальных животных.
Итак, факты, приведеиные нами относительно nфейффе
ровского ЯВJiения в жидкостях иммунизированных животных,
объясняются следующим образом. Брюшной экссудзт или
кровяная сыворотка этих животных в свежем виде · легко
вызывают зернистое превращение, потому что в этих жид
костях соединены оба необходимых· для этого вещества.
Но так как микроцитаз - вещество очень · неустойчивое,
разрушающееся от времени и от нагревания до 5q-56°, ·то
жидкости иммунизированных животных очень легко теряют
его. Поэтому кровяная сыворотка вне организма через неко
торое время становится неспособной превращать вибрионов
в зерна. l(огда же к ней прибавляют немного цитаза, нахо· дящегося в кровяной сыворотке или в брюшной лимфе новой
·морской свинки, то превращение происходит с большой быст
ротой.
Таким образом, серуму иммунизированных животных,
ставшему недеятельным, возвращают его способность вызы
вать пфейфферовское явление. Объяснение это, формулиро ванное Б о р д э, соответствует совокупности всех· известных
фактов и стало общепринятым.
Так как жидкости иммунизированных животных, став
шие неспособными превращать вибрионов в зерна, сохра
няют свою способность останавливать подвижность этих
микробов и скучивать их, то возникает вопрос, не необхо
димо ли агглютинативное вещество, мало чувствительное
к высокой температуре, для производства пфейфферовского явления. И действительно, некоторое время можно_ было ду мать, что явление это обязано микроцитазу, действующему
на вибрионов, Подвергнувшихея сначала влиянию агглютина
тивного вещества.
Последнее выдерживает ·наГревание до 55--56° и разру
шается только при более высоких температурах; оно сохра
няется в серуме долго после полного исчезновения цитаза.
ОБЗОР ФАКТОВ ПРИОБРЕТЕННОГО ИММУНИТЕТА |
269 |
Аналогия несомненна между агглютинативным вещест
вом жидкостей животных, приобретших иммунитет, и предо·
хранительным веществом тех же жидкостей, выдерживаю
щим высокие температуры, и, однако, эти два вещества не
тождественны.
Целый ряд фактов, с которыми мы не замедлим позна
комить читателя, несомненно, доказывают это. Серум может
быть очень агглютинативен, не будучи в состоянии превра·
тить вибрионов в зерна и наоборот. Вещество, способствую
щее пфейфферовскому явлению н находящееся в жидкостях
иммунизированных морских свинок, есть не что иное, как
«фиксатор», сходный с тем, который бьжл уже оnисан нами в серумах животных, привыкших резорбировать различные
клеточные элементы. Как и при этом резорбиро.вании, фи
ксаторы также специфичны и при разрушении миi<робов. Так,
фиксатор, способствующий зернистому · превращению, не
только отличается от фиксаторов. сенсибилизирующих крае
вые шариии ·и. семенные тела, но отличается та:кже от фи
ксаторов, вызывающих чувствительность других бактерий.
Специфичность эта была обнаружена и .изучена П ф е й Ф·
ф е р о м, установившим, что она может служить для распо знавания бактериальных видов. Серум свинки, иммунизиро
ванной против холерного вибриона, вызывает чувствитель
ность этих вибрионов исключительно против действия микро цитаза. Даже такие соседние вибрионы, как, например, мно
гие водные, нечувствительны к фиксатору антихолерного
серума. С другой стороны, серумы, полученные после впрыс
кивания этих водных вибрионов, не в состоянии вызвать зер нистое превращенне холерного вибриона.
Когда одному и тому же животному прививают не
сколько видов вибриона~, то полученный серум или брюшная жидкость вызывает пфейфферовское явление со всеми этими привитыми видами вибрионов.
Такой антивибрионный серум заключает один· только ци таз против вибрионов, но столько различных фиксаторов,
СКОЛЬКО бЫЛО Пр11ВИТЫХ ВИДОВ.
Когда под влиянием жидкостей организма иммунизиро
ванных животных сильному зернистому превращению под·
270 |
ГЛАВА Vlll |
вергаются вирулентные вибрионы, то это служит очень дра
гоценным указанием совместного присутствия цитаза и спе
цифического фиксатора. Как было сказано в начале описа
ния приобретенного иммунитета морских свинок против холерного вибриона, пфейфферовское явление обнаружи вается в перитонеальной жидкости этих животных уже через
короткое время после прививки вибрионов (через ~--20 ми·
нут).
Это доказывает, что в ней действительно соединены оба
вещеетва и что фиксатор и цитаз растворены в плазме экс·
судата. Наблюдается ли то же и во всех частях тела имму·
низираванных животных?
Если вместо брЮшной полости мы введем холерный ви·
брион в подкожную клетчатку или в переп.нюю камеру глаза,
то пфейфферовского явления вовсе не произойдет.. Изолиро·
ванные или соединенные мален.,кими кучками вибрионы не
nретерnевают зернистого nревращения; они хорошо сохра·
няют свою нормальную форму вибрионов и остаются живы·
ми гораздо дольше, чем в брюшной nолости. Наблюдаются
такие вибрионы, которые живут еще 24 часа после прививкн
под кожу и несколько дней (4--6) в nередней камере глаза. Когда вводят холерный вибрион в отек лапы, вы~ванr~ый за·
медленнем кровообращения, то nфеАфферовское явление
также не наблюдается и вибрионы остаются Жliвыми до·
вольно. долго. Факты эти, конечно, указывают на то, что в жидкости пассивного. отека, так же как и в глазной влаге или в поnкожной клетчатке, не находится обоих веществ,
необходимых для зернистого превращения. Но отсутствуют
ли они оба или только одно из них?
Вопрос этот легко разреши1'ь с помощью nрибавления к
названным жидкостям серума новых морских свинок, кота·
рый сам по себе не в состоянии произвести nфейфферовског& явления. Бордэ 1 сделал э~и оnыты и пришел к тому выводу, что жидкость пассивного оrека иммунизированной морской
|
1 Contrlbutlon а l'~tude de s~rum chez |
les anlmaux vacclnёs. Annales |
de |
la Societё royale des sciences naturelles et |
medicales de Bruxelles, 1895, |
т. |
IV. |
|
ОБЗОР ФАКТОВ ПРИОБРЕТЕННОГО ИММУНИТЕТА |
271 |
свинки, смешанная с новым серумом, превращает холерного
вибриона в зерна. Это nроисходит только в меньшей степени,
чем под влиянием серума, нагретого до 55-56°, той же имму
низированной свинки и также добавленного новым серумом.
Мы имеем, следовательно, nраво заключить, что отечная
жидкость не заключает цитаза, но содержит известное коли
чество холерного фиксатора, однако меньшее, чем кровяная жип.кость. Что же касается глазной влаги иммунизированных
животных, то аналогичные опыты доказали, что она не за
ключает ни одного из двух веществ, необходимых для nро изводства пфейфферовского явления.
Факты, в общих чертах изложенные мной, приводяt к
следующей точке зрения. У животного, иммунизированного против холерного вибриона, микроцитаз находится в брюш
ном экссудате, но не переходит ни в жидкость пассивного
отека, ни в глазную влагу. Холерный фиксатор также нахо дится в перитонеальной жидкости и переходит в отек, но не.
проникзет в глазную влагу. Это указЬ1вает на то, что микро
цитаз находится в жип.костях, богатых лейкоцитами, и от
сутствует в тех, которые заключают мало или вовсе не за·
ключают этих клеток.
Введение вибрионов в брюшную полость иммунизирован·
ных морских свинок тотчас вызывает nфейфферовско~ явле ние и в то же время производит исчезновение большинства
лейкоцитов из брюшной лимфы. Мы уже несколько раз имели случай говорить об этом фаголизе, так как он проис
ходит вследствие впрыскивания в брюшную полость крови, семенных тел и различных жидкостей.
Фаrолиз тем сильнее, чем больше количество впрысну-
1'ОЙ жидкости н чем бельше отличается ее температура от
нормальной темnературь! брюшной полости.
П и е р а л л и н и 1 изучал в моей лаборатории фаголнз в брюшной полости морской свинки н пришел к нескольким,
стоящим внимания заключениям.
Из всех употребленных им жидкостей, как вода, бульон, фильтрованные микробные культуры н физиологический рас-
1 Annales de l'lnstitut Pasteur, 1897, '· XI, стр. 308.