4 курс / Дерматовенерология / Эффективная_лазерная_терапия_Том_1_Основы_лазерной_терапии_С_В_Москвин

ОСНОВЫ ЛАЗЕРНОЙ ТЕРАПИИ

боли в мышцах туловища и конечностях, а также появляются признаки хронического инфекционного процесса (лихорадка, увеличение и болезненность шейныхилиподмышечныхлимфатическихузлов, боливгорле, фарингит, субфебрилитет), психические и неврологические проблемы (ухудшение памяти, нарушениесна, депрессия, снижениеаппетита, изменениемассытела). Чтобы поставить диагноз хронической усталости, нужно исключить любые состояния, симптомом которых может быть усталость, включая злокачественные новообразования, аутоиммунныеивоспалительныехроническиезаболевания, инфекции, нервно-мышечныеиэндокринныезаболевания, психическиеболезни, побочное действие лекарственных препаратов и интоксикации [Afari N., Buchwald D., 2003].

Методика 1. ВЛОК-635, длина волны 635 нм, мощность на выходе световода 1,5–2 мВт, 7–15 ежедневных сеансов по 10–30 мин. Параметры воздействия варьируются исходя из возраста и состояния пациента.

Методика 2. Лазерная акупунктура (табл. 2.5) проводится по точкам базового рецепта (рис. 2.2) с модуляцией частотой 2,4 Гц. Дополнительно через день воздействуют на точку VG20 в течение 30 с и АP «таламуса» в течение 10 с. Еслипациентпередпроцедуройчувствуетвыраженноеснижениеобщего тонуса, тосначалавоздействуютнаточки«ши-сюань» (кончикипальцеврук), а затем проводится основная процедура.

530

Рекомендовано к покупке и прочтению разделом по дерматологии сайта https://meduniver.com/

Часть III. Частные методики лазерной терапии

ОФТАЛЬМОЛОГИЯ (соавт. И.А. Попова)

Основой раздела послужила глава из книги «Низкоинтенсивная лазерная терапия» [ПанковО.П., 2000], уточненынекоторыедетали, добавленыданные последних исследований и новые методики.

В офтальмологии лазеры применяются давно и весьма успешно, в первую очередь, этохирургическиеметоды, самыйизвестныйизкоторых– коррекция зрения эксимерным лазером (рефракционная хирургия), в последние годы всё большее распространение получает также ФДТ [Балашевич Л.И., 2002; БольшуновА.В., 2013; ДогаА.В. идр., 2011; ГамидовА.А., 2004; ГндоянИ.А., Петраевский А.В., 2002; Куренков В.В., 2002]. Уникальная способность лазерного луча свободно проходить через оптические среды глаза и возможность фокусировать излучение на структурах глазного яблока позволяют без вскрытия глаза коагулировать кровоизлияния на глазном дне, «приваривать» сетчатку для профилактики отслойки, производить фотодеструкцию опухолей, проводить иридотомию при глаукоме и расслоение вторичной плёнчатой катаракты и др.

Значительнорежевофтальмологическойпрактикеможновстретитьфизиотерапию, в том числе лазерную, хотя в ряде случаев её эффективность несомненна [Полунин Г.С., Макаров И.А., 2012; Сосин И.Н., Левченко О.Г., 1988]. Крометого, дляЛТхарактернынеинвазивность, комфортность, асептичность, безболезненность, высокая проходимость через глазные среды, контролируемость, возможность регулировать диапазоны длин волн и частоту импульсов, кумуляция эффекта от сеанса к сеансу [Панков О.П., 2000].

ДляЛТвофтальмологиичащевсегоиспользуютГНЛилидиодныелазеры красного (635 нм) и ИК (890–904 нм) спектров.

Экспериментальные исследования влияния низкоинтенсивного лазерного света на глаза

Изучение оптических параметров энуклеированного глаза

А.Р. ЕвстигнеевиЮ.А. Порецкий(1989) изучалиспектральныеоптические характеристики глаза в красной и ближней инфракрасной областях спектра. Использовали ГНЛ с длинами волн 633 и 1150 нм, мощностью излучения 8,5 мВт, режим излучения непрерывный, и импульсный ИК-лазер (длина волны 890 нм, частота 80 Гц, импульсная мощность 5–6 Вт, длительность импульса до 200 нс). Во всех случаях диаметр коллимированного лазерного луча составлял 3,5 мм.

Объектомисследованияслужилиэнуклеированныеглазакроликов(всего6) породышиншилла. Диаметрзрачка(освечиваниеНИЛИпроводиличерезних)

531

ОСНОВЫ ЛАЗЕРНОЙ ТЕРАПИИ

составлял 7–8 мм. Энуклеирование глаз проводили непосредственно перед исследованиями.

Полученные данные позволили сделать следующие выводы:

1)энуклеированный глаз селективно пропускает лазерное излучение различных длин волн, что свидетельствует о воздействии лазерного излучения через глаз на биоткани;

2)структуры глаза обладают способностью отражать, поглощать, пропускать и рассеивать лазерное излучение;

3)энуклеированныйглазпропускаетлазерныйсветвближнейИК-области спектра значительно больше, чем в красной;

4)необходимо учитывать оптические параметры глаза для разработки новых методик лазерной терапии в офтальмологии и гигиенических регламентаций.

Оптические эффекты при воздействии НИЛИ на глаз и зрительную кору

В.А. КашубаиА.В. Черкасов(1987, 1988) изучаливозможностипроникновениялазерногоизлученияиполихромногосвета(ПС) черезглазвретробульбарнуюобласть, атакжевоздействиеихнакорковыйотделзрительногоанализатора. Экспериментыпроводилина15 кроликахи4 трупахлюдейобоегопола в 1-е сутки после смерти, во время патологоанатомического исследования. Освечиваниюподвергалиглаз(открытыйизакрытыйвеками), егомедиальный угол(покасательнойкглазномуяблоку), атакженеповреждённыепокровные ткани головы в зоне проекции коркового отдела зрительного анализатора. Кроме того, производили исследования на энуклеированных глазах, нервах, костях, а также на наркотизированных животных. Для изучения проникновения и распространения лазерного излучения и ПС в ретробульбарных тканях и структурах мозга применяли послойное и тотальное их удаление.

Впервые показано, что непрерывное НИЛИ видимого и ближнего ИКдиапазонов спектра (мощность 4 мВт) проникает в ретробульбарные ткани глаза. Выходящее из глаза излучение имеет направленно-рассеянный характер. Суммарно задняя полусфера глазного яблока кролика пропускает 62% лазерного излучения с длиной волны 1150 нм и 15% с длиной волны 633 нм. Свечениезрительногонервасвидетельствуетотом, чтоинервыслужатсвоего рода проводниками света, а их оптические свойства могут влиять на передачу нервных импульсов. Через окружающие глаз мягкие ткани и кости черепа лазерноеизлучение(633 нм) достигаеткорыголовногомозга(0,9–0,2% вкаждой измеряемойточкеприсканированиипоповерхностимозга), преимущественно обонятельной и лобной долей. Полихромный свет от ручного офтальмоскопа (без светофильтров) проходит в полость черепа (опыт с участием проф. Л.А. Линника), гдетакжеотмечаетсясвечениекраснойсоставляющейсветана поверхностимозга. Синийсветобладаетслабовыраженнымипроникающими

532

Рекомендовано к покупке и прочтению разделом по дерматологии сайта https://meduniver.com/

Часть III. Частные методики лазерной терапии

свойствами. Приосвечиванииглазтруповчеловекаинтрапупиллярно(диаметр зрачков 5–8 мм) коллимированным лазерным пучком с длиной волны 633 нм, как и у животных, наблюдалось свечение в орбитальной области вследствие сложного перераспределения излучения: пропускания, поглощения, отражения, рассеяния, при этом рефлекс с глазного дна был ярким, красным.

Со стороны внутренней поверхности черепа при воздействии лазерным излучением и ПС на глаз наблюдалось свечение красного цвета в области передней и средней черепных ямок. Величина выходного репера (светового пятна) изменялась в зависимости от направления, локализации, формы пучка и применяемого источника света. При определённых положениях источника лазерное излучение и ПС в зоне освещения оказывались поверхность коры лобной доли мозга, гипофиз, гипоталамус, турецкое седло, зрительный нерв, зрительныйперекрест(хиазма). Удалениеретробульбарнойклетчатки, атакже выступающей части клиновидной кости (ala minor) способствовало увеличению яркости и равномерности освещения указанных анатомических образований. При закрытом веке яркость выходного репера снижалась. Освечивание медиального угла глаза приводило к увеличению яркости выходного репера.

При использовании ПС с уровнями освещения на поверхности глаза от 30 до 8500 лк, в том числе при удалении источников света на расстояние до 5 м от глаз, свечение выходного репера на внутренней поверхности черепа оставалось красным. Размер выходного репера не превышал 46 мм. Воздействие лазерного излучения и ПС через неповреждённые кожу и кости черепа также вызывало освещение поверхности мозга в зонах, соответствующих положению выходного репера на черепе.

Явление избирательного пропускания глазом и покровными тканями головы излучения в красной и ближней ИК-областях спектра подтверждалось использованием светофильтров, которые не нарушали цветопередачу выходного репера красного цвета. Синий свет практически полностью поглощается тканями.

Таким образом, глаз и покровные ткани головы являются проводящими светорассеятелями и играют роль светофильтра, избирательно пропускающего лазерное излучение и ПС не только в рецепторный, но и в проводниковый, корковый отделы зрительного анализатора. Это открывает перспективу разработки новых методов диагностики и лечения глаз и ретробульбарной патологии (воспаление зрительного нерва, перекреста, арахноидиты и др.). Вэтойсвязиможетоказатьсяэффективнымиспользованиевретробульбарной области лекарственных средств, изменяющих свою активность под влиянием света. Полученные данные следует учитывать при анализе механизмов лечениялазернымизлучениемиПСамблиопии, макулодистрофии, диабетической ретинопатии и другой патологии.

Структуры глаза и ткани головы обладают способностью рассеивать оптическое излучение и селективно пропускать его в полость черепа, преимущественно красной и ближней ИК-областей спектра. НИЛИ и ПС, проходя

533

ОСНОВЫ ЛАЗЕРНОЙ ТЕРАПИИ

черезглаз, ретробульбарныетканиикостичерепа, достигаютлобно-базальной поверхности коры мозга. При освечивании неповреждённой поверхности затылочной области головы наблюдается свечение зрительной коры, при этом глубинапроникновенияизлученияввеществомозгасоставляетнеменее5 мм.

Возможность прямого воздействия лазерным излучением и ПС на различные отделы зрительного анализатора через неповреждённые ткани головы, в том числе через глаз, и на соответствующие структуры головного мозга следует учитывать при использовании лазеров и ярких источников света в офтальмологии.

Экспериментальное обоснование применения ЛТ при дистрофических заболеваниях сетчатки

Макулодистрофия остаётся ещё трудно поддающейся лечению патологией

инередко приводит к резкому снижению зрения. Поэтому особый интерес вызвало предложение Л.А. Линника и И.Л. Баронецкой (1978) использовать для лечения макулярных дистрофий субпороговые энергии лазерного света.

Н.С. Шульгина и др. (1981) изучали влияние НИЛИ на культуру лимфоцитов. При культивировании лимфоидных клеток в присутствии фитогемагглютинина (ФГА), т. е. неспецифического митогена, определённый процент их подвергается митозу. Отношение бластобразующих форм к количеству дегенерированныхклетокуказываетнастимулирующеедействиенеспецифическогомитогена. Былоустановлено, чтоприплотностимощности0,4 мВт/см2 происходитнаиболееактивнаятрансформациялимфоцитоввбластныеформы (45%), количество дегенерированных клеток при этом минимально – 5,9%. ИспользуявкачествеконтроляреакциюбласттрансформациинаФГА, авторы смогли определить активность воздействия лазерного излучения на пролиферативные процессы в культуре лимфоцитов.

Эти и аналогичные наблюдения позволяют сделать предположение, что

ипри воздействии на сетчатую оболочку повышение остроты зрения может быть связано со стимулирующим эффектом. В ганглиозных и биополярных клетках сетчатой оболочки под влиянием субпороговых энергий лазера активируется внемитотический синтез ДНК. Первые признаки увеличения синтеза ДНК отмечались уже через несколько часов после освечивания, к концу первых суток внемитотический синтез ДНК достигал максимального уровня, в последующие дни снижался, достигая исходного уровня к концу недели. Содержание ДНК в ядрах клеток за это время повышалось на 25–30% и оставалось повышенным. Реакция клеток сетчатой оболочки на лазерное освечиваниенеисчерпываласьактивациейсинтезаДНК, одновременноусиливалсяи синтез РНК. Максимального уровня эта реакция достигает через 24–48 часов после воздействия [Усов Н.И., Линник Л.А., 1978].

Вэтихэкспериментахобращаетнасебявниманиеоднаобщаяособенность: какэлектронно-микроскопические, такицитохимическиеизменениявклетках

534

Рекомендовано к покупке и прочтению разделом по дерматологии сайта https://meduniver.com/

Часть III. Частные методики лазерной терапии

обнаруживались на довольно большом (4–6 мм) расстоянии от фокального пятна, т. е. реакция клеток сетчатой оболочки на освечивание проявлялась на большей площади – сетчатка реагировала как единая функциональная структура. Подобное реагирование сетчатки на локальное освечивание было положено в основу разработки и последующего применения в клинической практике нового способа лечения некоторых видов дистрофий жёлтого пятна [Усов Н.И., Линник Л.А., 1978].

Результатыэлектронно-микроскопическихисследованийпоизучениюдис- тантных изменений в элементах сетчатой оболочки указали на предпочтение

виспользовании излучения малой мощности. В одних группах клеток изменений почти не возникало, в других определялись вакуолизация митохондрий и деструкция наружных мембран со снижением электронной плотности цитоплазматического матрикса, а в третьих преобладали признаки усиления метаболической активности. Отмечались увеличение количества рибосом и полисом, скоплениезернистойицитоплазматическойсети. Кариоицитоплазма перикарионастановиласьблизкойпоэлектроннойплотности, ещёна7-есутки часть ганглиозных клеток находилась на высоте развития гиперпластических процессов. Со временем возникал комплекс внутриклеточной регенерации, ведущей впоследствии к нормализации и активированию внутриклеточных биосинтетических процессов [Панков О.П., 2000].

Известно, что важнейшей функцией пигментного эпителия является фагоцитоз. Он осуществляется с помощью лизосом, гидролитические ферменты которых переваривают избыточный материал фоторецепторов [Marmor M.F., 1975]. Установлено также, что при старении или возникновении дистрофических процессов снижается интенсивность фагоцитоза пигментного эпителия, следовательно, изменяетсяструктурнаяифункциональнаяактивностьлизосом мембран – пигментных клеток [Ермакова Н.А., Рабданова О.Ц., 2007; Крас-

нов М.М. и др., 1982].

Освечивание НИЛИ (633 нм) оказывает положительное действие на биоэнергетические процессы в клетках нейроэпителия сетчатки [Леус Н.Ф. и др., 1982]. Известно, чтовпроцессестаренияиливозникновенияразногородаболезней корреляция вэтом процессенарушаетсяиизменяетсяактивность жизнедеятельности, вконкретныхусловияхснижаетсяжизнеспособностьклеток. Снижениебиосинтезахарактеризуетсяуменьшениемгенетическогоматериала

вклетке, т. е. определяется первоначальное уменьшение синтеза ДНК. Авторами впервые установлен факт увеличения синтеза ДНК в ядрах ганглиозных клеток сетчатки под влиянием НИЛИ. Такое необычное явление повышает устойчивость клеток к влиянию неблагоприятных факторов и их функциональную активность. Следует уточнить, что усиление синтеза ДНК происходит при использовании энергии с плотностью мощности до 0,4 мВт/см2.

Обращает на себя внимание тот факт, что воздействие некогерентным ПС вызывает угнетение синтеза ДНК. Под влиянием же лазерного света с длиной волны690 нмактивноповышаетсясинтезРНК(внейроэпителии– на135%, в

535

ОСНОВЫ ЛАЗЕРНОЙ ТЕРАПИИ

биполярных клетках – на 55%), а с длиной волны 570 нм ещё более активно – до 230%. Заметной резорбции вновь синтезированных молекул в нейроэпителииибиполярныхклеткахвтечение7 днейнепроисходило. Изучениесинтеза белкапоказало, чтопродукцияегоизменяетсямало. Следовательно, кольскоро излучение лазеров красного спектра приводит к усилению синтеза ДНК, что реализуется более активно с повышением синтеза РНК, происходящего при освечивании зелёным светом, то встаёт вопрос о комбинированном лазерном воздействии, т. е. необходимосветитьзелёнымсветомвследзакрасным[Лин-

ник Л.А. и др., 1982].

Экспериментальное изучение механизмов лазерной стимуляции роговицы и хрусталика

Большойвкладвкомплексноеизучениенекоторыхсторонмеханизмадействия малых энергий лазерного света внесли исследования Л.А. Линника с соавт. (1971, 1982). Установлены отчётливые различия в биомодулирующем действииизлученийлазеров, работающихвразныхспектральныхдиапазонах, атакжемеждудействиемполихроматическихисточниковнекогерентногосветаилазерами. Взначительноймереэтиразличияобусловленыособенностями поглощения света разными структурами глаза.

Авторыотдаютпредпочтениелазерам, генерирующимизлучениевкрасной части спектра (633 нм), однако при воздействии на хрусталик и в некоторых других случаях решающей может стать стимуляция излучением аргонового лазера (488 и 514 нм) [Линник Л.А. и др., 1973, 1982].

Уяснив суть явлений стимуляции сетчатки, можно предположить, что стимулирующий эффект после лазерного освечивания не может ограничиться изменением функций только сетчатки. Было установлено также повышение функциональной активности эпителия роговицы, её эндотелия и эпителия передней сумки хрусталика. Характер ответной реакции этих клеток зависит от степени первоначальной их активности, величины энергии и длины волны НИЛИ. Последующие исследования показали, что лазерное излучение (633 нм) при плотности мощности 0,1–0,2 мВт/см2 оказывает выраженное стимулирующеевлияниенарегенеративныеспособностиэпителияроговицы.

При ожогах роговицы на фоне эпителиально-эндотелиальной дистрофии, при травматических повреждениях и начальной глаукоме, других патологических состояниях переднего отдела глаза лазерная стимуляция (ЛС) оказываетвыраженноеблаготворноевлияниенатечениепатологическогопроцесса. Обращает на себя внимание и то, что комбинированное применение аргонового и гелий-неонового лазеров для стимуляции репаративных процессов в роговице оказалось более эффективным, чем применение излучения только НИЛИ красного спектра (ГНЛ, 633 нм).

ОченьважнымиследуетсчитатьрезультатыЛСхрусталика. Опытыпроводили на кроликах, которым производилась ежедневная затравка нафталином

536

Рекомендовано к покупке и прочтению разделом по дерматологии сайта https://meduniver.com/

Часть III. Частные методики лазерной терапии

по1,5 гна1 кгмассытела, т. е. воспроизводиласьоднаизмоделейтоксической катаракты.

Вконтрольнойгруппе(36 животных) каких-либодополнительныхвоздейс- твий на животных не оказывали, а в опытной группе (26 животных) за сутки до начала затравки глаза кроликов освечивали аргоновым лазером с ПМ, не вызывающей образования очагов коагуляции на глазном дне. Засветка прово- дилась3–5 импульсамидлительностью0,01 с, следовавшихсинтерваломв1 с.

Участи животных контрольной группы уже на 2–3-й день, а у основной массы к концу первой недели после начала затравки в области экватора хрусталиков появлялись веретенообразные помутнения в субкапсулярном слое. Помутнения располагались радиально под передней и задней капсулами. Продолжение затравки животных нафталином приводило к расширению помутнений, их слиянию, и в итоге в течение нескольких дней всё вещество хрусталика оказывалось мутным. Среднее время начала развития катаракты

вконтрольной группе составило 5,0 ± 0,5 дня.

Укроликов опытной группы добиться развития катаракты практически не удалось. Из 26 животных только у одного на 22-й день затравки нафталином появилась начальная катаракта на одном глазу. Остальные животные погибли от интоксикации, но катаракта у них так и не развилась.

В контрольной группе продолжение затравки после появления катаракты также приводило к гибели животных от общей интоксикации, которая наступала примерно в те же сроки, что и в опытной группе, т. е. на продолжительность жизни животных освечивание глаз светом аргонового лазера влияния не оказывало.

Примечательной особенностью эффекта лазерного воздействия в данном случае является то, что произошла не просто стимуляция, а повысилась устойчивость хрусталика к действию катарактогенного фактора. В отношении многихзаболеваний, втомчислеикатаракты, можноговорить отойилииной степени выраженности индивидуальной чувствительности или индивидуальной сопротивляемости. Это отчётливо проявилось и у животных контрольной группы: у части кроликов начальная катаракта появилась на 2-й день, у большинства – к концу недели, а у одного – только на 14-й день. Таким образом, непосредственное воздействие лазерным излучением на глаза привело к существенному снижению чувствительности хрусталиков к действию катарактогенногофактора, кболеедлительномусохранениюимпрозрачности

взаведомо неблагоприятных условиях.

Таким образом, возможности использования малых энергий лазерного света для лечения заболеваний органа зрения ещё далеко не исчерпаны. Достаточно серьёзным основанием для такого вывода являются особенности ответной реакции тканей глаза на воздействия: генерализованность реакций и отсутствие качественных отличий их от проявлений нормальной жизнедеятельностиклетокитканей. Последнееобстоятельство, атакжебольшойопыт использования этого вида терапии в клинике позволяют ответить и на такой

537

ОСНОВЫ ЛАЗЕРНОЙ ТЕРАПИИ

важный в практическом отношении вопрос, как безопасность. Действительно, известны способы «стимуляции» физиологических функций некоторыми фармакологическимисредствами. Какправило, такаястимуляцияоснованана мобилизации резервов клеток и при длительном применении или проведении на фоне повышенной нагрузки может привести к истощению клеточных резервов и развитию деструктивных процессов.

Прилазернойстимулирующейтерапиипроисходит, по-видимому, нестольконепосредственноеусилениефункций, сколькоповышениефункциональных возможностей клеток, их жизнедеятельности, что позволяет рассматривать этот вид терапии как вполне безопасный, а исследования по расширению показаний к её применению – перспективными [Панков О.П., 2000].

Влияние ультрафиолетового (УФ) лазерного излучения на состояние заднего эпителия роговицы (ЗЭР) в эксперименте

Т. Кенчик с соавт. (1987) экспериментально изучали состояние заднего эпителия роговицы (ЗЭР) после воздействия на роговицу излучением УФ-ла- зера. ОфтальмологамизвестноблаготворноедействиеУФ-светаприкератитах различнойэтиологии. Однакофототерапиявэтомспектрененашладолжного применения, чтообъясняется, соднойстороны, низкимтехническимуровнем аппаратуры, трудностью задания необходимой длины волны, плотности мощности и иными моментами, а с другой – открытием достаточно эффективных лекарственных средств. К тому же наряду с данными о положительном воздействии УФ-света в клинической практике имеются сообщения о его повреждающем действии на роговую оболочку.

Появление УФ-лазеров открыло перспективу их применения в клинической медицине, в том числе офтальмологии. Экспериментальными исследованиями установлен факт влияния лазерного УФ-света на передний эпителий роговицы. Отмечен положительный лечебный эффект этого вида излучения при инфицированных поражениях роговой оболочки. Однако нерешёнными остаются вопросы дифференцированного подхода к выбору оптимальных терапевтических энергий при различных формах и стадиях патологического процесса и безопасных для окружающих тканей.

Объективным критерием при выборе безопасных мощностей УФ-излуче- ния может быть оценка состояния ЗЭР. Известно, что клетки ЗЭР обеспечиваютстабильностьпроцессовобменаигидратациироговойоболочкииявляются высокочувствительными к любым минимальным повреждающим факторам, вызывающим дестабилизацию метаболизма.

Следует отметить, что появление метода зеркальной микроскопии сделало его предпочтительным по сравнению с другими в прижизненном изучении состояния клеток ЗЭР.

В литературе имеются сообщения о возможном повреждении ЗЭР как в эксперименте, так и в клинике в зоне прохождения через роговую оболочку излучения различных лазеров при кератотомии, трабекулопластике, гонио-

538

Рекомендовано к покупке и прочтению разделом по дерматологии сайта https://meduniver.com/

Часть III. Частные методики лазерной терапии

пунктуре, иридо- и капсулотомии, коагуляции сетчатки и т. д. В эксперименте был использован азотный лазер (длина волны 337 нм). Доставку излучения от выходного окна лазера до объекта воздействия (роговица глаз кроликов) осуществляли через кварцевое моноволокно.

Исследования проведены на 104 глазах 52 половозрелых кроликов породы шиншилла массой 2,5–3,5 кг. Животных с нарушением прозрачности оптическихсредизопытаисключали. Освечивалиправыеглазакроликов. Контролем служили парные левые (неосвеченные) глаза; параллельно в качестве второго контроля проводили наблюдения над восемью интактными глазами четырёх кроликов. ПрименялиследующиепараметрыУФ-лазерноговоздействия: плотность мощности излучения 5, 10, 20 мВт/см2, экспозиция 1, 5, 10, 15 мин. Диаметр лазерных аппликаций соответствовал диаметру роговицы кроликов, направление луча было параллельно зрительной оси.

Перед освечиванием и при дальнейшем динамическом наблюдении глаза животных тщательно обследовали (боковое фокальное освещение, биомикроскопия, флюоресцеиновый тест, прямая офтальмоскопия).

Эндотелиальную микроскопиюпроизводили спомощью контактногомикроскопамоделиHS = СЕМЗ(США) послепредварительнойинстилляционной анестезии0,25% растворомдикаина. Фоторегистрациюцентрального участка роговицы выполняли на фотоплёнку РФ-3 до лазерного воздействия и через 1 ч, 1, 10, 15 сут и 3 мес. после него. Состояние клеток ЗЭР (форма, количество на 1 мм2 площади, однородность, взаиморасположение) оценивали по серии фотоотпечатков. Подсчёт плотности клеток ЗЭР проводили по методике, прилагаемой к прибору. Цифровой материал подвергали статистической обработке.

В сроки наблюдения от 1 ч до 3 мес. биомикроскопически не было выявлено видимого повреждающего действия лазерного УФ-света на роговую оболочку: онаоставаласьабсолютнопрозрачной. Внорме, т. е. довоздействия на глаз экспериментальных животных УФ НИЛИ, средняя плотность клеток ЗЭР составляла 3058,13 ± 56,27 на 1 мм2. Различия этого показателя между парнымиглазаминевыходилизапределыслучайныхколебаний, авариабельность не превышала 7%. Клетки были правильной гексагональной формы, тесно прилегали друг к другу.

Через 1 ч после нанесения лазерных аппликаций среднее количество клеток на 1 мм2 составило на освеченном глазу 3030,26 ± 74,29, а на парном – 3085,66 ± 38,25, т. е. ни на освеченном, ни на парном глазу существенных изменений не произошло (p > 0,05).

При изучении в динамике количественных показателей плотности клеток ЗЭР максимальное их количество наблюдали на 10-е сутки после освечивания как на опытных, так и на интактных парных глазах, однако разница была статистически недостоверна (p > 0,05).

Спустя 3 мес. после освечивания плотность эндотелиальных клеток на освеченных глазах составляла 3116,44 ± 53,50 на 1 мм2, на парных – 3115,5 ±

539