2 курс / Гистология / Морфо_–_функциональная_характеристика_лимфатической_системы_легких

52

В

1

2

С

8

3

E

Рисунок 7. Пинцет со съемными насадками для работы с лимфатической системой и мягкими тканями.

А. Пинцет во время работы с лимфатической системой легкого кролика. B. Cхема пинцета со съемными насадками (вид сверху),

54

Следующий этоп - сравнительная визуализация данных, полученных на сканах МРТ и при патологоанатомическом вскрытии, проводилась по ана-

логии с работами Коновалова В.К. и др. (2002) (рисунок 8.А-С.1-5).

При этом обращали внимание на:

-топографию трахеобронхиальных ЛУ, КС и других органов грудной полости;

-особенности формы и размеры трахеобронхиальных ЛУ, КС;

-принадлежность ЛУ к группам (классификация ЛУ по группам (Чума-

ков В.Ю., 1997; Акаевский А.И. и др., 2009; Ткаченко Л.В., 2012 [238, c. 108-

112]; Ткаченко Л., 2012).

Затем сопоставляли анатомические данные со сканами МРТ.

Описание нормальной макроанатомии ЛУ и некоторых анатомических образований грудной полости проводили также и на 50 животных,

участвующих в «Способе прижизненной морфо функциональной оценки лимфатической системе Л. и регионарных ЛУ легких у животных в эксперименте».

Полученные результаты описывали, взяв за основу: (Anderson W. и др., 1994; Чумаков В.Ю., 1997; Маккрекен Т. и др., 2002 [146, 339 c.]; Коновалов В.К. и др., 2000 [16, c. 58-80], 2002; Климов А.Ф. и др., 2003; Wheelhouse N. et al., 2011 [306, p. 196-199]; Ворота легких … [37]; Корень легких [95]; Грудная клетка [57]; Кости грудной клетки [101]; Лёгкие [111]; Топографическая анатомия грудной стенки [247]; Топографическая анатомия грудной полости

[246]; Топографическая анатомия трахеи, бронхов, плевры … [248]).

Для протоколирования данных, полученных на вскрытии, разработали схему макрофотографирования. Использовали препаровальный столик Малофеева с разнообразными фонами (Ткаченко Л.В. и др., 2009 [89] [188];

Ткаченко Л., 2012).

Фотографирование проводили по схеме:

- общий вид органов в грудной полости;

- детальный вид конкретного ЛУ сверху, справа или слева;

56

- вид с линейкой (рисунок. 6.С; 8.В.1; 47.F. 1,5,6,8).

Подобный подход в работе позволил получить четкий фоторяд в нужных проекциях, что необходимо для совмещения изображений полученных на вскрытии со сканами МРТ (рисунок 8.А-С.1).

Макрофотосъемку проводили фотоаппаратом Sony, видеосъемку прово-

дили камерами JVS С70, Sony DSC – S 730.

Таким образом, «Способ визуализации ЛУ и некоторых анатомических образований грудной полости по результатам МРТ взрослого кролика» по-

зволяет прижизненно исследовать ЛУ и подтверждать полученные данные морфологически.

Для проведения дальнейших морфологических исследований разработа-

ли и использовали «Способ целостной фиксации комплекса органов у мел-

ких животных с сохранением топографии и последующими комплексными морфологическими исследованиями» (Малофеев Ю.М. и др., 2009 [225,

с. 79-81], Ткаченко Л.В. и др., 2010 [78, с. 118-120], Ткаченко Л.В. и др., 2011

[169, 8 с.]) (рисунок 9; 10), который проводили по схеме:

- снятие шкурки с тушки животного по общепринятой методике (Жа-

ров А.В. и др., 2000);

- рассечение мускулатуры шеи, грудной кости; удаление грудной кости,

ребер справа и слева;

- удаление мускулатуры с ребер и грудного отдела позвоночника

(рисунок 9.А.1.2), что необходимо для более удобного иссечения соответствующего фрагмента (для следующей манипуляции);

- иссечение необходимого фрагмента (в данном случае с VCIII – IV до

VTrX). В этом случае на анатомическом объекте остается пищевод, Тр.,

регионарные ЛУ легких, сердце, Л., фрагменты кровеносных сосудов,

грудного лимфатического протока (рисунок 9.В.5-10).

Это позволяет сохранить форму внутренних органов, зафиксированных в известном положении, не нарушая при этом топографию, которая хорошо визуализируется;

58

- фиксация выделенного фрагмента. Анатомический объект должен сво-

бодно лежать в емкости. Фрагмент позвоночника играет роль остова, за счет которого органы свободно находятся в фиксирующем растворе, не деформи-

руясь и сохраняя при этом свою топографию и естественный вид.

Фиксацию фрагмента проводили в нейтральном 10% водном растворе формалина первые 24 часа при температуре 37С°, а далее при комнатной температуре;

-вымачивание зафиксированного объекта в проточной воде от 24 часов

иболее (по необходимости);

-фрагментация материала (рисунок 9.С.11; 10.А.В).

После фиксации ткань становится плотноватой. В зависимости от анато-

мических особенностей доли Л., разрезали через всю паренхиму органа на отдельные фрагменты (F) как в продольном, так и в поперечном направлени-

ях, что было обусловлено задачами исследований. Фрагментацию начинали с острого края Л ЛУ рассекали повдоль.

Обозначения, используемые при фрагментации ткани Л., представлены в таблице 1.

Из данных таблицы 1 заключаем, что для исследований в обозначении каждого F указывается: - принадлежность к доле Л.;

- номер F и конкретная его часть (треть) (1 – верхняя, 2- средняя и 3 –

нижняя треть, обозначается через дробь) (рисунок 10.В).

Например, средняя часть третьего F левой каудальной доли будет иметь такое обозначение: ЛКF3/2 (рисунок 10.В).

60

Для исследований брали идентичные F долей Л и ЛУ.

Принцип фрагментации и обозначения, представленный в таблице 1,

прост в использовании и позволяет точно указать на топографию исследуе-

мого анатомического объекта;

-маркировка и дальнейшая фиксация в нейтральном 10% водном раство-

ре формалина (при необходимости);

- гистологические исследования по общепринятой схеме (рисунок

9.С.11-14).

Описанный способ приемлем также для исследования Л. и их ЛУ у жи-

вотных любого вида и возраста (рисунок 10.С-D.1-3).

Таким образом, «Способ целостной фиксации комплекса органов у мел-

ких животных с сохранением топографии и последующими комплексными морфологическими исследованиями» предназначен для целостной фиксации комплекса органов мелких животных, позволяет сохранить естественную форму органов, зафиксированных в известном положении, не нарушая при этом их топографию.

Полученные данные подвергали статистической обработке и анализу

(Автандилов Г.Г., 1990).

Для оценки лимфатической системы легких и их регионарных лимфати-

ческих узлов взрослого кролика (в эксперименте) разработали и испытали

«Способ морфо – функциональной оценки лимфатической системы лег-

ких и их регионарных лимфатических узлов взрослого кролика в экспери-

менте» который состоит:

Регистрация животного в «Журнале эксперимента» по общепринятой

схеме.

Для достоверной оценки полученных данных провели стандартизацию технических параметров эксперимента, с определением: