поражение мышц, аномалии скелета, изменения волос и кожи, катаракта, нарушения пищеварения, увеличение размеров печени и селезенки.

Отличительной особенностью наследственных болезней у новорожденных является наличие бессимптомного периода, который может продолжаться 2—3 дня после рождения. Дети рождаются внешне здоровыми, а их состояние ухудшается внезапно. 1. Ферментопатии - общее название болезней или патологических состояний, развивающихся вследствие отсутствия или нарушения активности каких-либо ферментов. Фермент представляет собой вещество, без которого не могут протекать различные химические реакции, которые составляют основу обмена веществ. Большая часть обменных расстройств в организме заключается во врожденной недостаточности определенного фермента, что является результатом генетической мутации. При недостаточности фермента он либо вообще не синтезируется в организме человека, либо синтезируется, но имеет низкую активность. Выпадение функций фермента создает блок в соответствующей химической реакции, что приводит к накоплению метаболитов, которые непосредственно предшествуют блоку, и дефицит конечных продуктов реакций. Химические вещества, которые накапливаются до блока часто являются токсичными. Заболевания: фенилкетонурия, наследственные нарушения синтеза мочевины (приводят в

Целый ряд наследственных болезней обмена обусловлен недостатком в организме витаминов. В некоторых случаях отсутствие или снижение активности соответствующего фермента может быть частично восстановлено путем введения повышенных доз витамина. Когда в результате генетической мутации образование фермента полностью нарушается или образуется фермент с нарушенной структурой, лишенный своей активности, то введение повышенных доз витамина не дает какого-либо эффекта. Такие нарушения обмана веществ носят название витаминрезистентных (устойчивых к введению витаминов) врожденных нарушений.

3. Заболевания связанные с нехваткой микроэлементов.

Причиной ряда наследственных болезней обмена может быть дефицит микроэлементов. Более 180 ферментов человеческого организма представляют собой металлопротеины, т. е. имеют в своем составе молекулы или ионы металлов. Такими металлами являются, к примеру, медь, цинк, марганец, магний, молибден, кобальт, селен. Дефицит микроэлементов может быть обусловлен особенностями среды, в которой живет человек, хотя в большинстве случаев он чаще связан с нарушениями всасывания и транспорта металлов в организме.

Основные принципы лечения наследственных заболеваний обмена веществ:

1. Соблюдение специфической диеты с целью исключения из рациона продуктов, содержащих вещества, не подвергающиеся полному расщеплению и последующим превращениям,

5.Устранение или ограничение влияния неблагоприятных факторов среды (устранение солнечного облучения при болезнях с повышенной или извращенной кожной чувствительностью, изъятие лекарств, усугубляющих обменные расстройства)

6.Специфическая терапия: медикаментозное лечение умственной отсталости при наследственных болезнях обмена включает в себя использование стимуляторов центральной нервной системы. Они улучшают обменные процессы в нервной ткани и играют главную роль в становлении психоречевого и двигательного развития детей. В комплексном лечении большая роль отводится витаминам. При наследственных болезнях обмена эндокринной системы зачастую используются соответствующие гормоны. При нарушении формирования костной ткани высокоэффективным оказывается прием гормональных препаратов в сочетании с препаратами кальция, фосфора, витаминами группы В, цитратами, антиоксидантами.

88.Общие клинические признаки генетической патологии.

Заболевание только у одного члена родословной не исключает наследственного характера

болезни, поскольку заболевание может быть результатом новой доминантной мутации у одного из родителей или гетерозиготности обоих родителей по рецессивной болезни.

а) Первичная плейотропия обусловлена биохимическими механизмами действия мутантного белка или фермента - первичных продуктов мутантных аллелей. Пример: при фенилкетонурии нарушается обмен фенилаланина, в результате чего в организме не синтезируется тирозин. Вследствие этого уменьшается или прекращается образование меланина, что ведет к гипопигментации кожи, волос и радужки. Патологические метаболиты (фенилпировиноградная кислота и др.) нарушают процессы развития и функционирования нервной системы (повышенная возбудимость, тремор, судорожные припадки, умственная отсталость). В основе всех этих очень разнородных симптомов лежит первичный эффект недостаточности (или отсутствия) активности фенилаланингидроксилазы. б) Вторичная плейотропия я обусловлена осложнениями первичных патологических процессов.

Пример: муковисцидоз обусловлен ошибкой в синтезе трансмембранного белка, обеспечивающего ионный транспорт в клетках. Нарушение ионного транспорта натрия и хлора ведет к образованию густой слизи в бронхах и в экзокринной части поджелудочной железы. За этим следуют вторичные легочные инфекции и нарушения переваривания пищи. И то и другое

Наследственные болезни, начинающиеся в любом возрасте, имеют хроническое течение с

(особенности функционирования генов у больного, т.е. регуляция их активности в установленных генотипом пределах) и средовыми (осложнения основного патологического процесса (активация микробного фактора, нарушение питания), и дополнительные повреждающие воздействия (охлаждение, инфекции, стрессы) факторами.

4. Специфические симптомы наследственных болезней.

Редко встречающиеся специфические симптомы или их сочетания дают основание думать о наследственной природе заболевания (астеническое телосложение и деформация грудной

Одна из особенностей наследственных болезней - устойчивость к терапии, хотя и не абсолютная. Это вполне понятно, потому что «исправить» первичные звенья, даже если известен первичный продукт мутантного гена, далеко не всегда удается (мукополисахаридозы, миодистрофия Дюшенна, нейрофиброматоз).

89. Подходы к молекулярно-генетической диагностике.

Молекулярно-генетические методы - это методы, которые позволяют выявить нарушения в строении гена на уровне ДНК.

Молекулярная идентификация мутаций в гене является самым объективным способом диагностики любого моногенного заболевания и может проводиться на любых стадиях его

При прямой диагностике объектом исследования является сам ген (его кодирующие последовательности). Для проведения прямой ДНК-диагностики необходимо точно знать структуру гена или его фрагмент, содержащий анализируемую мутацию. Точность реакции обеспечивается специфическими олигопраймерами.

Непрямая (косвенная) ДНК-диагностика применяется тогда, когда ген не секвенирован, не известны его структура, размеры, характер мутаций в нем, кодируемый белок, но известна его достаточно точная хромосомная локализация, то есть ген картирован, имеется информация о положении гена на цитогенетической карте.

Основными, наиболее часто используемыми методами ДНК-диагностики являются:

полимеразная цепная реакция (ПЦР), блотгибридизационный анализ по Саузерну. Эти методы позволяют выяснить молекулярный характер мутации (делеция, миссенс и т. п.),

проанализировать конкретный полиморфизм генетических маркеров (по длине рестрикционных фрагментов, длине тандемных повторов микро- и минисателлитов, однонуклеотидных замен и др.).

Технические приемы в молекулярной диагностике достаточно стандартны: 1. Получение образцов ДНК. Источником геномной ДНК, представляющей собой весь геном организма, могут быть любые ядросодержащие клетки

2.Получение фрагмента ДНК, который соответствует области мутации. Для этого используются специфические олигопраймеры (специально созданные короткие последовательности нуклеотидов, которые комплементарны функционирующим отделам, искомого фрагмента ДНК).

3.Идентификация полученных фрагментов ДНК. Для этого используют электрофорез в агарозном или полиакриламидном геле. Каждый фрагмент ДНК после окончания электрофореза занимает свое место и сравнивается со стандартными образцами ДНК с

Метод ПЦР заключается в циклическом синтезе in vitro строго заданных, ограниченных участков ДНК, позволяет амплифицировать необходимый участок ДНК, являющийся

1.Денатурация двойной спирали ДНК-матрицы.

2.Гибридизация олигопраймеров с комплементарными последовательностями одноцепочечной ДНК.

3.Синтез комплементарной цепи на ДНК-матрице с помощью термостабильной ДНКполимеразы, а также добавления «строительного» материала – четырех видов дезоксирибонуклеотидтрифосфатов (гуанидина, цитозина, аденина, тимина).

4.Идентификация «наработанных» фрагментов ДНК осуществляется с помощью различных методик электрофореза в агарозном или полиакриламидном геле.

Подвижность молекул фрагментов ДНК при электрофорезе является ключевым параметром и зависит от длины (молекулярного веса) и конформации изучаемого фрагмента ДНК. Чем больше молекулярная масса фрагмента, тем медленнее он движется в электрическом поле.

Блот-гибридизация по методу Саузерна.

Данный метод позволяет идентифицировать специфические последовательности нуклеотидов в общем наборе рестрикционных фрагментов геномной ДНК.

1.Проведение обработки полученной геномной ДНК одной из рестриктаз с закономерным для данного фермента набором фрагментов различной длины.

2.Разделение фрагментов при электрофорезе в геле в зависимости от их молекулярного веса.

3.После денатурации ДНК (путем ощелачивания) проведение процедуры блоттинга – переноса фрагментов ДНК с геля на нитроцеллюлозный фильтр.

4.Гибридизация денатурированных фрагментов ДНК с комплементарным радиоактивномеченым зондом. После отмывки накладывается рентгеновская пленка (авторадиография). При проявлении на пленке видны полосы, комплементарные использованному зонду.

90.Уровни профилактики генетической патологии.

Профилактика наследственных заболеваний является одной из важнейших задач клинической генетики.

Профилактика наследственных заболеваний может первичной (предупреждение зачатия или

рождения больного ребенка) и вторичной (разнообразные способы коррекции патологического генотипа). (В некоторых источниках выделяют первичную, вторичную и третичную профилактику. В таком случае, первичная направлена на предупреждение зачатия больного ребенка, вторичная включает в себя прерывание беременности, если обнаружены генетические патологии у плода, а третичная направлена уже на коррекцию патологического генотипа) В профилактике наследственной патологии выделяют 4 уровня (в методичке кафедры):

создание служб генетического мониторинг на государственном и международном уровнях. Осуществляется путем жесткого контроля содержания мутагенов и тератогенов в окружающей среде, проверке продуктов питания, воды, воздуха, лекарственных соединений и тд. б) Предупреждение зачатия больного ребенка (планирование деторождения): оптимальный возраст женщины 21-35 лет, отказ от деторождения в случае высокого риска наследственной патологии, отказ от деторождения в браках с кровными родственниками (особенно 1 и 2 степени).

2.Презиготный уровень: медико-генетическое консультирование, преимплантационная диагностика, искусственная инсеминация (введение в цервикальный канал или матку женщины спермы мужчины, полученной заблаговременно вне полового акта).

3.Пренатальная профилактика: определение генотипа плода на ранних сроках беременности (до 12-18 недель) и при необходимости рекомендации по ее прерыванию.

4.Постнатальная профилактика: осуществление скрининговых программ с целью начала

1.Медико-генетическое консультирование. Основные задачи: установление точного диагноза заболевания, определение типа наследования и расчет величины генетического риска заболевания в данной семье, объяснение смысла медико-генетического прогноза обратившимся за консультацией, помощь консультируемой семье в решении вопросов, касающихся планирования жизни, репродуктивного поведения, социальной адаптации; психологическая поддержка; пропаганда медико-генетических знаний.

2.Преимплантационная диагностика. Основана на возможности экстракорпорального оплодотворения. Суть метода заключается в оплодотворении яйцеклетки in vitro в пробирке, получение зиготы на стадии 4 или 8 бластомеров. Далее один из бластомеров извлекается и проводится ДНК-диагностика на конкретное наследственное заболевание. При выявлении патологии решается вопрос, имплантировать ли зародыш в матку матери. Показания: беременные женщины старше 35 лет; женщины с указанием в анамнезе о рождении ребенка с хромосомной патологией; наличие в семье больных с наследственными моногенными заболеваниями; для определения возможного гетерозиготного носительства (особенно при Х-

сцепленных формах). 3. Пренатальная диагностика. Методы пренатальной диагностики можно разделить на непрямые и прямые. Непрямые методы связаны с обследованием матери. К ним относятся клинико-акушерский, клинико-генеалогический, бактериосерологический (на цитомегаловирус, вирус герпеса, микоплазмы, хламидии). На протяжении беременности проводятся сывороточные маркерные тесты – определение альфа-фетопротеина (АФП) и хорионического гонадотропина (ХГ). Прямыми методами исследования оценивают состояние плода. Они могут быть неинвазивными (ультразвуковое исследование – УЗИ, сонография, рентгенография плода) и инвазивными (хорионбиопсия, плацентобиопсия, амниоцентез, кордоцентез, фетоскопия плода, биопсия тканей плода).

4. Постнатальная профилактика - неонатальный скрининг. Забор образца крови производится в родильном доме у всех новорожденных из пятки, капиллярная кровь наносится на специальную фильтровальную бумагу в виде трех капель. Высушенные образцы крови отсылают по почте в лабораторию.