396

Объект исследования - конкретный фрагмент реальности, где существует проблема, подвергающаяся непосредственному изучению: люди, животные, процессы, организации, предприятия и т.д. Например: объект исследования – животные, растения, породы, сорта. Предмет исследования – ткани, органы растения, животного. Методики и условия исследований очень специфичны и зависят от направления и профиля подготовки.

Вэкспериментальных работах, связанных с постановкой полевых и вегетационных опытов, приводят методику проведения опыта: название, схему, план и метод размещения вариантов, общую и учетную площадь делянки, повторность, если требуется, то характеристику изучаемых вариантов (дозы пестицидов, удобрений, глубина обработки почвы и т.д.), перечень наблюдений и исследований.

Приветствуется проведение комплексные исследований

вмногофакторных опытах. При постановке 2х и 3х факторных опытов нужно указывать расшифровку факторов, контроль по каждому фактору, соблюдая принцип единственного различия.

Перечень наблюдений и исследований приводят с указанием ГОСТов и общепринятых методик. В работах, связанных с почвенным и агрохимическим картированием, приводится краткая методика составления почвенных карт.

Вкачестве обязательных в перечень сопутствующих исследований нужно включать: анализ агрохимических свойств пахотного слоя почвы, анализ посевных качеств семян использованных для посева, фенологические наблюдения, анализ структуры урожайности, определение запасов продуктивной влаги в почве по основным фазам вегетации, оценку качества продукции, включая полный зоотехнический анализ

31

основной и побочной продукции. Работы, в которых исследованы показатели качества продукции, выглядят завершенными и ценнее. Другие исследования планируют с учетом темы исследований и поставленных задач. Они должны соответствовать и содействовать решению этих задач.

Все наблюдения и исследования необходимо проводить в 3 – 4 кратной повторности, что позволяет провести математическую обработку данных и повышает их достоверность.

Общепринятые ГОСТы и методики на проведение анализов только перечисляют с указанием их номера и года, не давая подробного описания. Анализы и исследования, которые проведены по методикам, утвержденным на кафедре, следует дать более подробно.

Условия исследований включают место и время проведения опыта, метеорологические и почвенные условия, агротехнику.

Характеристику климатических условий дают по данным метеорологической станции, в зоне действия которой проведены исследования. Погодные условия (температура, осадки, ГТК и др.) за годы исследований сравнивают со средними многолетними данными по фазам роста и развития растений, или по декадам, указав их влияние на урожайность, еѐ структуру и другие показатели. Данные нагляднее показать графически, при этом таблицы с исходными цифрами следует дать в приложении. В этом же разделе аспирант кратко описывает почвенно-климатические условия хозяйства, в котором проводились исследования.

При характеристике почвенных условий необходимо указать основные типы и подтипы почв, их агрохимические и физико-химические свойства. Кроме характеристики пахотного слоя, должен быть представлен почвенный разрез, дано

32

описание всех горизонтов и их агрохимические показатели. Название почвы должно быть полным и точным в соответствии с общепринятой классификацией почв.

Агротехнику в опыте описывают по плану: севооборот (чередование культур и полное название), предшественник, система удобрений, подготовка почвы, семена и их подготовка, посев (срок, способ, норма высева, глубина и направление посева), приемы ухода, способ и срок уборки, с полной агрономической характеристикой приема (сортовые и посевные качества семян, дозы, удобрений и пестицидов, срок проведения, агрегат, глубина и т.д.

Объѐм главы в научном докладе 2 – 3 страницы.

Глава результаты исследований должна включать как текстовую часть, так и таблицы, графики, рисунки, фотографии и содержать оценку результатов исследований. Объем главы в научном докладе 12 – 14 страниц. Оценка результатов эксперимента является основной частью научноквалификационной работы, которая в зависимости от объема может быть поделена на параграфы и пункты.

Перед написанием научно-квалификационной работы весь полученный экспериментальный материал должен быть систематизирован и обработан математически. Основные математические и статистические показатели, сопровождающие полевые и вегетационные опыты: наименьшая существенная разность (НСР05), относительная ошибка (Sх, %), коэффициент вариации (V, %) должны проставляться в последней горизонтальной строке под цифрами, подвергшимися обработке. Коэффициент линейной корреляции (г) и индекс детерминации (D, %) также вносятся в текст работы. Уравнения регрессии вписываются отдельной строкой.

33

Вработах, связанных с морфологической, агрохимической, химической и агрофизической характеристикой почв необходимо привести следующие математические показатели: среднее арифметическое выборочной совокупности (х), среднее квадратическое отклонение (S), дисперсия выборочной совокупности (S2), ошибка среднего арифметического (Sх), точность определения (Sx, %), коэффициент вариации (V, %), коэффициент линейной корреляции (r), коэффициент детерминации (dyx).

Вработах, выполненных по направлению почвоведение, подробно описываются условия распространения почв, их приуроченность к элементам рельефа, почвообразовательные процессы, морфологические признаки, гранулометрический и валовой химический состав, содержание гумуса и его качественный состав, физико-химические, химические и агрофизические свойства и их оценка.

По направлению «Сельское хозяйство» приводят урожайность основной продукции, приведенной к стандартной влажности и 100% чистоте. Урожайность и отклонения от контроля следует давать в ц, или т/га (сено, зерно, сухая масса с точностью до 0,1, картофель, зеленая масса трав, силосных – до целых без десятых). При обсуждении результатов не нужно повторять цифры таблицы. Лучше назвать абсолютную цифру контроля, а затем отклонения от него, в г, ц, кг, и

впроцентах. Процент приводят с точностью до целых.

Втаблице урожайности (внизу) указывают статистический показатель, подтверждающий достоверность полученных данных – коэффициент вариации, наименьшая существенная разность (HCP05). В 2-х и 3-х факторных опытах должны быть приведены HCP05 главных и частных различий. Результаты исследования следует излагать, начиная с основ-

34

ных показателей, а затем им давать научное обоснование. Так, при поставленной цели на достижение урожайности сельскохозяйственной культуры, научным обоснованием должны быть слагаемые ее (структуры) – густота продуктивного стеблестоя или растений на 1 м2, масса зерна с соцветия или растения, число зерен или семян в соцветии или с растения, масса 1000 семян. Эти показатели должны быть приведены с указанием НСР05.

Затем следует приводить данные остальных сопутствующих наблюдения и исследований: фенологию культуры, пищевой и водный режимы почвы, показатели фотосинтеза, засоренность, поражение вредителями и болезнями, качество продукции и т.д. с их математической обработкой, т.е. оценкой существенности различий. Работа считается завершенной, если дана оценка качества продукции, что является обязательным.

Экономическая, агроэнергетическая и производственная оценки результатов работы являются неотъемлемой частью их обоснования. Аспирант должен уметь пользоваться методиками определения экономической эффективности изучаемых вариантов. Показатели экономической оценки изученных вопросов разнообразны и зависят от задач исследований, культуры и специфики условий проведения научной работы.

Наиболее распространенными показателями экономической оценки будут: достоверная прибавка урожайности основной и побочной продукции по сравнению с контролем в денежном выражении с учетом качества продукции, себестоимость продукции, чистый доход с единицы площади и дополнительного урожая, рентабельность производства продукции и окупаемость дополнительных затрат, возможную прибыль в стоимостном выражении (р./га).

35

Основой для расчетов экономической эффективности изучаемых вариантов: культуры, сорта, приемы обработки почвы, норма высева, удобрения, пестициды и т.д. является технологическая карта.

При изучении энергосберегающих приемов и технологий возделывания сельскохозяйственных культур желательно привести их агроэнергетическую оценку Агроэнергетическая оценка дополняет экономическую. Для расчетов можно воспользоваться методикой «Агроэнергетическая оценка эффективности приѐмов и технологий возделывания полевых культур». Пермь : ФГБОУ ВПО Пермская ГСХА, 2010. 76 с.

Производственную оценку проводят на основе производственного опыта, проведенного в условиях сельскохозяйственного предприятия, в котором сравнивают контрольный и оптимальный варианты по урожайности и другим показателям (структура урожайности, качество продукции, экономические показатели и т.д.).

Структура основного содержания научноквалификационной работы по направлению «Ветеринария и зоотехния» включает следующие главы:

1.Материалы и методы исследования;

2.Результаты исследования;

3.Обсуждение результатов исследования.

Материалом исследования может служить кровь, сыворотка, лабораторные животные, культура клеток, органы животных, корма, почва, вода и др.

Пример. При выполнении работы материалом для исследований служили патогенные микроорганизмы (хламидии). Опыты были проведены на крысах обеих полов. А также исследованию подвергались крупный рогатый скот и сви-

36

ньи, разного возраста, обеих полов, абортированные плоды, новорожденные и мертворожденные животные.

Методы исследования. Вы составляете полный перечень методик, используемых Вами в работе. На первые места нужно поставить те, которые Вы применяли во всех сериях экспериментов или наблюдений. Далее последуют методики, использованные только в некоторых сериях и так до методик, принимаемых однократно.

Стандартные и общепринятые методики достаточно только назвать. Подробно описанные в общедоступной литературе более сложные методики, также не требуют детального изложения, достаточно привести их названия и дать ссылки на литературные источники. Подробное описание необходимо, если они Вами лично созданные и модифицированы.

Вполне уместно привести номера патентов, авторских свидетельств или свидетельств о принятых рационализаторских предложениях.

Пример: Для заражения крыс использовали возбудитель Chl. Psittaci, штамм «Лори» выделенный в 1957 г. от попугая; описание микроорганизма приведено в «Каталоге штаммов», вып. 4, М.; 1962.

Исследования, выполненные на крысах, проведены в лабораториях кафедры инфекционных болезней ПГСХА и кафедры анатомии и физиологии ТГСХА.

Исследования на сельскохозяйственных животных проведены в хозяйствах Пермского края: Пермский мясокомбинат, ООО «Русь» Пермского района.

Для опытов было взято 40 беспородных половозрелых крыс (36 самок и 4 самца), средняя масса самок составила 250 г., самцов 300 г. За 2 недели до эксперимента животные прошли карантин.

37

Инфекционный материал животным вводили внутрибрюшинно в виде 10% взвеси очищенной дифференциальным центрифугированием овокультуры Chl. psittaci штамм «Лори». Инфекционный титр инокулянта составил 10-7 LD50/0,5 мл для куриных эмбрионов.

Животные были разделены на 2 группы, первая опытная, вторая контрольная, в каждой группе было 18 самок и 2 самца. Все животные первой группы подвергались заражению возбудителем хламидиоза, а вторая группа служила контролем, им вводили физиологический раствор внутрибрюшинно.

Животных содержали в виварии в соответствии с «санитарными правилами по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально - биологических клиник» (от 6.04.1993). Кормили в соответствии с нормами, утвержденными приказом МЗ СССР от 10.03.1996 г. № 163.Все эксперименты выполнены с правилами бережного обращения с лабораторными животными в соответствии с приложением 4 к приказу № 755 МЗ СССР. Исследования начинали через 10-15 минут после убоя.

Животных умерщвляли через 14 дней после заражения посредством передозировки эфирного наркоза. Мозг извлекали на стекло и обрабатывали для гистологических и элек- тронно-микроскопических исследований.

Исследования были проведены на коровах и свиньях, также объектом для изучения служили абортированные и мертворожденные плоды и новорожденные животные.

В качестве объекта исследования для описания морфологических признаков нами представлены органы центральной нервной системы, а именно: полушария конечного мозга

38

и червь мозжечка, ткани плаценты, матки коров и свиней, селезенка, легкие абортированных плодов.

После того, как животных убивали, указанные органы извлекались из полости черепа, подвергались фиксации в 12 % растворе нейтрального формалина для гистологических исследований и для электронной микроскопии в 2.5% растворе глютарового альдегида. На следующий день производилась вырезка кусочков, далее проводка по спиртам возрастающей крепости. Заливку производили для гистологических срезов –

впарафин, для электронно-микроскопических исследований –

вэпоксидные смолы.

Гистологические срезы окрашивали по Нисслю, гематоксилином и эозином. Гематоксилин окрашивает в синефиолетовые тона оболочку ядер клеток, хроматин. Эозин окрашивает в розово-красно-оранжевые тона цитоплазму и некоторые структуры, в частности волокна (обзорная методика). Для выявления возбудителя в структурах головного мозга применялась окраска по Г.Т. Павловскому (Автандилов Г.Г., 1994).

С готовых блоков на санном микротоме изготавливались срезы толщиной до 5 микрон. Полученные препараты изучались с исследованием микроскопа фирмы Zeiss (Axioskop40) при увеличении окуляра х10, с объективами х4,

х10.

Срезы подвергались исследованию с помощью системы визуального анализа изображения. Они фотографировались с использованием цифровой видеокамеры Sony ЗССД и архивировались на съемном носителе и в памяти компьютера.

В головном мозге и мозжечке гистологической оценке подвергались: оболочки, микроциркуляторное русло, серое и белое вещество мозга, включающее нейроциты и волокни-

39

стые структуры, сосудистые сплетения, оценивалось состояние эпендимы желудочков.

Кусочки тканей для электронно-микроскопических исследований вырезали бритвенным лезвием в виде пластинки толщиной 0,1 см и помещали в предварительно очищенный 2,5%-ный раствор глютаральдегида, в нем пластинки разрезали на кусочки величиной 0,1 мм3 и фиксировали в другой порции этого раствора в течение 4-6 часов. Затем кусочки отмывали в фосфатном буфере и обрабатывали осмиевым фиксатором в течение 1,5-2 часов при t+4°С. В качестве заливочных сред использованы аралдит и эпон идентичных фирм.

Срезы готовили на ультратоме ЛКБ-8800, контрастировали 2%-ным спиртовым раствором уралацетата в течение 15 минут и цитратом свинца по Рейнольдсу (Б.Уикли, 1975). Материал исследовали в электронном микроскопе ЭМВ-100БР при ускоряющем напряжении 75 К. Поиск и идентификацию очагов поражения, а также отдельных сосудов и клеток осуществляли методом прицельного ультрамикротомирования путем получения полутонких срезов и окрашивания их толуидиновым синим по прописи А.И.Лысенко (1973).

Диаметр стенок сосудов головного мозга и клеток Пуркинье в мозжечке, а также толщину слоев серого и белого вещества определяли с помощью окуляр-микрометра микроскопа МБС – 9.

Полученный цифровой материал подвергнут стандартной статистической обработке (ГОСТ 11.0004-74, К.П.Гладилин, С.З.Рачинский, 1979). Рассчитывали среднюю арифметическую величину изученных нами показателей (Мх), среднее квадратичное отклонение средней арифмети-

40