учебники микра / UMP_Vozbuditeli_difterii_tuberkuleza___2023

ВОЗБУДИТЕЛИ ДИФТЕРИИ, ТУБЕРКУЛЕЗА,

АНАЭРОБНЫХ ИНФЕКЦИЙ.

СПИРОХЕТОЗЫ, ХЛАМИДИОЗЫ

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ

«РОСТОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ» МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Кафедра микробиологии и вирусологии №1

ВОЗБУДИТЕЛИ ДИФТЕРИИ, ТУБЕРКУЛЕЗА,

АНАЭРОБНЫХ ИНФЕКЦИЙ.

СПИРОХЕТОЗЫ, ХЛАМИДИОЗЫ

Учебно-методическое пособие

Под общей редакцией

д.м.н., профессора Набока Ю.Л.

Ростов-на-Дону

2023

2

УДК 616.988(075.8)

ББК 51.9я7 В 64

Возбудители дифтерии, туберкулеза, анаэробных инфекций. Спирохе-

тозы, хламидиозы : учебно-методическое пособие / сост. : Ю.Л. Набока, Л.И. Васильева, М.Л. Черницкая [и др.] ; под общ. ред. д.м.н., проф. Ю.Л. Набока ; ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России, каф. микробиологии и вирусологии №1. – Ростов-на-Дону : Изд-во РостГМУ, 2023. – 56 с.

Учебно-методическое пособие составлено в соответствии с федеральным государственным стандартом высшего образования, типовой учебной программой по дисциплине «Микробиология, вирусология».

Предназначено для самостоятельной подготовки обучающихся медицинских вузов к практическим занятиям и самоконтроля усвоения материала.

Составители:

Набока Ю.Л., Васильева Л.И., Черницкая М.Л., Гудима И.А., Иванникова Е.В., Джалагония К.Т., Кудря Е.В., Исмаилов Р.С., Белоглазова Н.Н., Свирава Э.Г., Леус И.Н., Крицкая В.В.

Рецензенты:

Харсеева Г.Г. – доктор медицинских наук, профессор, зав. кафедрой микробиологии и вирусологии № 2 ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России.

Куцевалова О.Ю. – кандидат медицинских наук, зав. лабораторией клинической микробиологии, главный внештатный специалист по клинической микробиологии МЗ РО (ул. 14-я Линия 63) ФГБУ «Ростовский научноисследовательский онкологический институт» МЗ РФ.

Утверждено на кафедральной конференции кафедры микробиологии и вирусологии № 1 ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России. Протокол № 7 от

16.12.2022 г.

Утверждено центральной методической комиссией ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России. Протокол №3 от 22.12.2022 г.

© ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России, 2023

3

СОДЕРЖАНИЕ

4

Занятие №1

Тема. Микробиологическая характеристика дифтерии, туберкулеза, проказы.

Цель занятия. Изучить характеристику возбудителей дифтерии, туберкулеза,

проказы, микробиологическую диагностику вызываемых ими заболеваний. Изучить схему бактериологического метода иссле-

дования при подозрении на дифтерию. Изучить препараты для специфической профилактики дифтерии, туберкулеза и специ-

фического лечения дифтерии.

I.Теоретические знания:

1.Характеристика возбудителя дифтерии, микробиологическая диагностика,

специфическая профилактика и лечение.

2.Микобактерии. Характеристика возбудителей туберкулеза, клинические формы, микробиологическая диагностика и специфическая профилактика.

3.Характеристика возбудителей проказы, микробиологическая диагностика.

II.Практические навыки:

1.Изучение схемы бактериологического исследования мазков со слизистой оболочки ротоглотки и носа больного при подозрении на дифтерию. Учет и интерпретация результатов исследования.

2.Световая микроскопия нативного препарата из мокроты больного туберку-

лезом, окрашенного по Цилю-Нильсену.

5

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ

1.Характеристика возбудителя дифтерии, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и лечение.

Возбудитель дифтерии – Corynebacterium diphtheriаe.

Морфо-тинкториальные свойства: грамположительные полиморфные палочки, спор, жгутиков не имеют, образуют микрокапсулу. В мазках располагаются в виде «растопыренных пальцев» или латинских букв V, X, Y. Имеют включения, представленные двумя полярно расположенными зернами волютина (полирибитилметафосфаты), которые выявляют окраской по Нейссеру.

Культуральные свойства: требовательны к питательным средам, растут на 5% кровяном и 10% сывороточном агаре. Образуют R-формы колоний: шероховатые, исчерченные, крошковидные, иногда с зонами гемолиза. На кровя-

но-теллуритовом агаре образуют 3 типа колоний: gravis (крупные, сухие,

черные, шероховатые с радиальной исчерченностью и неровными краями), mitis (мелкие, гладкие, блестящие, черные, с ровными краями), intermedius (мелкие, сухие, черные колонии с более прозрачной периферией и неровными краями).

Рост C. diphtheriаe на кровяно-теллуритовом агаре.

6

Биохимические свойства: дифференциация C. diphtheriae от других видов коринебактерий основана на способности ферментировать глюкозу, сахарозу и наличии ферментов уреазы и цистиназы (табл. 1).

Факторы патогенности:

1.Факторы адгезии: микрокапсула и другие липидно-белковые вещества (обеспечивают прикрепление к клеткам эпителия верхних дыхательных путей);

2.Ферменты инвазии: гиалуронидаза, нейраминидаза;

3.Токсинопродукция: гистотоксин, гемолизин, дермонекротоксин (вызывает некроз клеток в месте размножения возбудителя).

Основной фактор патогенности – гистотоксин (экзотоксин). Нетокси-

генные штаммы C. diphtheriae не вызывают развития заболевания.

Гистотоксин состоит из двух белковых фрагментов:

Фрагмент А представляет собой фермент, блокирующий фактор элонгации трансферазу-2, ответственную за удлинение полипептидной цепи на рибосоме, что приводит к подавлению синтеза клеточного белка и гибели клеток.

Фрагмент В взаимодействует с клеточными рецепторами, облегчая проникновение в клетку фрагмента А.

Токсинопродукция возбудителя дифтерии обусловлена одним из видов генетической изменчивости – лизогенной (фаговой) конверсией. Умеренный коринефаг содержит в своем геноме ген tox, кодирующий синтез гистотоксина. При интеграции ДНК умеренного фага с хромосомой дифтерийной палочки она становится токсигенной, то есть продуцирует гистотоксин.

Источники инфекции: больной человек или бактерионоситель.

Пути заражения: воздушно-капельный, реже контактный, алиментарный. Входные ворота инфекции: слизистые оболочки ротоглотки, носа, горта-

ни, глаз, половых органов, поврежденные кожные покровы и др.

Дифтерия, как инфекционный процесс, развивается по интоксикацион-

ному механизму.

Патогенез: в месте внедрения возбудителя происходит его размножение и выделение гистотоксина, который обладает как местным, так и общим действием. На слизистых оболочках формируются пленчатые фибринозные налеты,

7

прочно спаянные с подлежащей тканью. Повышается сосудистая проницаемость и возникает отек ткани ротоглотки и подкожной клетчатки шеи. Экзотоксин поступает в кровь и связывается с мембранами клеток органов-мишеней (миокардиоциты, почечный эпителий, клетки коркового и мозгового вещества надпочечников, периферические нервы). Ингибирование токсином белкового синтеза в клетках миокарда приводит к структурным и функциональным нарушениям тканей, способным вызвать смерть больного. В нервной ткани происходит демиелинизация волокон, приводящая к развитию параличей и парезов. В почечной ткани развивается токсический нефроз.

Клинические формы дифтерии различают по локализации, характеру течения и степени тяжести.

По локализации выделяют следующие клинические формы:

1. Дифтерия ротоглотки (90-95%).

Пленчатые фибринозные налеты при дифтерии ротоглотки.

2.Дифтерия гортани.

3.Дифтерия редких локализаций (носа, глаз, кожи, уха, половых органов и др.).

При поражении нескольких органов выделяют комбинированную форму заболевания.

Микробиологическая диагностика.

Материал на исследование: слизь или отделяемое пораженного органа (ротоглотка, нос и др.) забирают стерильным тампоном не позднее 12 часов с момента обращения больного, до назначения антибиотиков.

1.Бактериологический метод: посев исследуемого материала на 5% кровяной агар, выделение чистой культуры на 10% сывороточном агаре. Идентификацию возбудителя проводят по морфо-тинкториальным, культуральным, биохимическим свойствам и по определению продукции эк-

зотоксина (гистотоксина). Бактериологический метод является обяза-

тельным для подтверждения диагноза с выделением токсигенной

C.diphtheriae при клинически подозрительных поражениях слизистых оболочек ротоглотки, носоглотки, носа и др.

2.ПЦР: определяют ДНК C. diphtheriae и наличие гена tox+.

Для определения гена tox+помимо ПЦР используют ИФА и РНГА.

8

Для уточнения напряженности коллективного противодифтерийного иммунитета используют серологический метод (РНГА, ИФА и др.).

Специфическая профилактика дифтерии:

АКДС-вакцина (адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина).

АДС-анатоксин (адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин). АДС-м-анатоксин (дифтерийно-столбнячный анатоксин с пониженным со-

держанием антигенов).

АД-м-анатоксин (очищенный адсорбированный дифтерийный анатоксин с пониженным содержанием антигена).

Препараты с пониженным содержанием антигенов предназначены для профилактики у детей старше 6 лет, подростков и взрослых.

В настоящее время для профилактики дифтерии также используются зару-

бежные препараты.

Для выявления уровня коллективного противодифтерийного иммунитета определяют его напряженность серологическим методом в РНГА, ИФА.

Специфическое лечение дифтерии: сыворотка противодифтерийная антитоксическая лошадиная очищенная. Сыворотку вводят дробно (см.

учебно-методическое пособие «Учение об инфекции и иммунитете. Основы иммунологии»).

2.Микобактерии. Характеристика возбудителей туберкулеза, клинические формы, микробиологическая диагностика и специфическая профилактика.

Микобактерии широко распространены в окружающей среде и могут вызывать: туберкулез, туберкулезоподобные заболевания, другие микобактериозы, проказу (табл. 2).

Mycobacterium tuberculosis complex – микобактерии туберкулезного ком-

плекса (МБТК) – группа микроорганизмов внутри рода Mycobacterium, вызывающих специфические туберкулезные поражения органов и тканей: M. tu-

9

berculosis (92%), M. bovis (5%) (возбудитель туберкулеза крупного рогатого скота), M. africanum (3%).

Нетуберкулезные микобактерии (НТМБ) – представители рода

Mycobacterium, не входящие в группу МБТК; условно-патогенные виды, вызывающие у человека микобактериозы.

Все микобактерии классифицируются по культуральным (скорость роста, способность образовывать пигмент в разных условиях освещения), биохимическим свойствам и др.

Морфо-тинкториальные свойства: тонкие, прямые или слегка изогнутые палочки. Реже встречаются зернистые и нитевидные формы. Спор, капсулу, жгутиков не имеют. Кислотоустойчивы за счет наличия в клеточной стенке высокого содержания липидов и миколовых кислот. По методу Циля-Нильсена окрашиваются в красный цвет.

M.tuberculosis в мокроте. Окраска по Цилю-Нильсену.

Культуральные свойства МБТК: требовательны к составу питательной среды. Культивируются на специальных плотных яичных средах ЛевенштейнаЙенсена и Финн II (R-формы колоний) и жидкой – Миддлбрука. Время генерации – 24 ч., поэтому их рост на питательных средах происходит медленно. На среде Миддлбрука рост появляется через 4-45 суток, на плотных средах – через

30-90 суток.

Рост МБТК на средах Левенштейна-Йенсена и Финн II.

Культивирование МБТК на жидкой питательной среде проводят в автоматизированной системе Bactec MGIT 960/320.

10