
- •Основные этапы биотехнологического производства.
- •Кривая роста микроорганизмов в простых периодических условиях.
- •Вторичные метаболиты. Кинетика образования.
- •Основные этапы становления биотехнологии.
- •Периодическая культура.
- •Использование биотехнологии в интересах промышленности, медицины и в других областях.
- •Основные параметры роста микробной культуры.
- •Классификация микроорганизмов по типу получение энергии и источникам углерода.
- •Стадии биотехнологического процесса.
- •Фазы роста периодической культуры микроорганизмов.
- •Производство ферментов поверхностным способом.
- •Кривые накопления первичных и вторичных метаболитов.
- •Механизмы регуляции микробного метаболизма: ингибирование конечным продуктом.
- •Рост микроорганизмов на различных средах. Метаболизм метана и метанола.
- •Производство ферментов глубинным способом.
- •Регуляция скорости синтеза ферментов путем репрессии и индукции.
- •Непрерывные методы культивирования.
- •Рост микроорганизмов на различных средах. Метаболизм метанола и ацетата.
- •Контроль транспорта питательных веществ в клетку. Проницаемость мембран.
- •Потребности микроорганизмов в кислороде.
- •Методы культивирования микроорганизмов.
- •Первичные и вторичные метаболиты. Особенности образования.
- •Ассимиляция жиров микроорганизмами.
- •Влияние состава питательных сред и условий культивирования на рост и образование продуктов.
- •Кинетика гибели микроорганизмов. Удельная скорость гибели.
- •Катаболитная репрессия – как механизм регуляции синтеза ферментов.
- •Мутационные дефекты метаболитической регуляции.
- •Элементы методологии генной инженерии.
-
Первичные и вторичные метаболиты. Особенности образования.
См 3 и 4
-
Ассимиляция жиров микроорганизмами.
Различные физико-химические факторы, а также микроорганизмы, могут вызывать разложение и порчу жиров.
Начальной стадией разрушения жиров является их гидролиз (омыление) на глицерин и жирные кислоты. Этот процесс легко происходит при высокой температуре под действием щелочей или кислот. Под влиянием ферментов (липаз) гирдолиз протекает при обычной температуре. Омыление жиров при воздействии ферментов происходит, например, во время переваривания жиров в пищеварительном тракте животных. Ферменты, разрушающие жиры, вырабатываются многими микроорганизмами.
Образовавшиеся в результате гидролитического расщепления глицерин и жирные кислоты затем подвергаются дальнейшему разрушению. Наиболее легко разрушается глицерин, служащий для многих микроорганизмов источником углерода. Разрушение глицерина может происходить в аэробных и анаэробных условиях.
Жирные кислоты менее подвержены разрушению, однако и они постепенно окисляются, преимущественно в аэробных условиях. Конечной стадией разрушения глицерина и жирных кислот является их минерализация, сопровождающаяся образованием углекислого газа и воды.
Наиболее активно разлагают жиры некоторые пигментные и флуоресцирующие бактерии, микрококки и актиномицеты, а также плесневые грибы, особенно оидиум лактис и многие виды из родов аспергиллус и пенициллиум.
Разложение жиров микроорганизмами в почве и воде происходит постоянно, оно является составной частью общего круговорота веществ в природе.
Порча пищевых жиров микробами нередко наносит большой ущерб. Развитию в жирах микроорганизмов способствует наличие в них воды и органических примесей. Поэтому чем меньше влаги содержится в жире и чем полнее он очищен от примесей, тем лучше сохраняется.
-
Влияние состава питательных сред и условий культивирования на рост и образование продуктов.
Микроорганизмы используют питательные вещества среды не только на построение клеточного вещества, но и на обеспечение энергией всех биохимических превращений в клетке. В процессе роста культуры состав среды меняется, это оказывает влияние на развитие культуры и ее биосинтетическую способность.
Часто сырьем для выращивания микроорганизмов служит материал,который они не в состоянии использовать без предварительной подготовки (целлюлоза, гемицеллюлоза, крахмал, пектин и т. д.). В этих слу-
чаях для приготовления питательной среды биополимеры предварительно гидролизуют ферментативным или химическим способом дополучения усвояемой формы.
Наибольшее значение среди веществ питательной среды имеет углерод. Он входит в состав почти всех органических соединений клетки:
аминокислот, белков, углеводов, нуклеиновых кислот, липидов.
Большинство микроорганизмов, применяемых как продуценты белков и аминокислот, в качестве источника углерода используют органические вещества. Клетки сине-зеленых водорослей используют диоксид углерода. Непосредственным источником углерода могут быть
углеводы несложного строения: гексозы, пентозы, низкомолекулярные олигосахариды, органические кислоты, спирты, жирные кислоты, легкие и тяжелые углеводороды и др.
Азот микроорганизмы усваивают только в виде неорганических солей, кислот, органических соединений. Незначительный недостаток азота в питательной среде приводит к «ожирению» клеток, т. е. к повышению содержания в них липидов за счет уменьшения белковой и
аминокислотной фракции. Поэтому в производственных условиях при получении обогащенных белком кормовых дрожжей следят за тем, чтобы в среде не было недостатка азота.
Источниками фосфора являются соли фосфорной кислоты. Их вносят в среду с различными естественными субстратами (отварами растительных тканей, мукой, кукурузным экстрактом), реже – с синтезированными соединениями (фитин). В клетке фосфор входит в состав АТФ, АДФ, АМФ, обеспечивая энергетический конструктивный обмен.
Состав питательной среды для каждого продуцента устанавливают экспериментально. Это трудоемко и требует глубоких знаний физиологии микроорганизма. Для обеззараживания питательных сред применяют дезинфекциию, воздействие температуры и других физических факторов (ультразвук,ультрафиолетовое облучение, ультрафильтрация). Каждый из этих методов весьма избирателен. В биотехнологии широко применяют термические методы обеззараживания (автоклавирование, стерилизацию, кипячение, пастеризацию и др.).
Состав среды и оптимальные режимы определяют двумя способами: длинным многостадийным эмпирическим подбором и использованием математических методов планирования эксперимента. Первый
способ является самым распространенным в настоящее время.