6009

Министерство образования и науки Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования

«Нижегородский государственный архитектурно-строительный университет»

________________________________________________________________________

Кафедра ландшафтной архитектуры и садово-паркового строительства

ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ ПО АНАТОМИИ РАСТЕНИЙ РАСТИТЕЛЬНАЯ КЛЕТКА РАСТИТЕЛЬНЫЕ ТКАНИ

Методические указания для выполнения лабораторных работ по дисциплине «Ботаника»

для студентов очной формы обучения по направлению подготовки бакалавриата 35.03.10 Ландшафтная архитектура

Нижний Новгород ННГАСУ

2015

3

СОДЕРЖАНИЕ

4

ЗАНЯТИЕ 1.

Тема: 1. Устройство микроскопа и работа с ним.

2.Изготовление временных препаратов.

3.Строение растительной клетки, движение цитоплазмы, плазмолиз и деплазмолиз на примере клеток листа элодеи канадской Elodea

canadensis Rich.

Оборудование: микроскопы, предметные и покровные стекла, полоски фильтровальной бумаги, пинцеты, скальпели, стеклянные палочки для воды, кюветы с водой.

Материалы и реактивы: побеги элодеи канадской, 6-8% раствор

КNО3.

Теоретическая часть.

1. Устройство микроскопа и правила работы с ним.

Штативная часть микроскопа включает «револьвер», большой винт (рукоятку грубой фокусировки), микровинт (рукоятку тонкой фокусировки), предметный столик, диафрагму, ручку штатива, подставку и зеркало (рис. 1).

Зрительная трубка (тубус) сверху несет систему линз (окуляр), а на нижнем конце имеет вторую систему линз (объектив). Объектив обеспечивает увеличение, которое можно определить по цифрам или буквам на его оправе (например, 1, 5, 8, 15, 40). Объектив дает обратное изображение предмета. Окуляр состоит из двух линз: собирающей, обращенной к предмету, и глазной, обращенной к глазу. Окуляр увеличивает картину, построенную объективом. Малое увеличение можно получить с помощью комбинаций объектива 8 и окуляра 7×, 10×. Большое увеличение микроскопа можно получить с помощью объектива 40 и окуляров 7×, 10×, 15×. Чаще всего при микроскопировании препаратов используются комбинации 7×40

или 10×40.

5

Рис. 1. Устройство микроскопа с монокулярной насадкой и зеркалом в качестве осветителя: 1 - окуляр; 2 -монокулярная насадка; 3 - револьверное устройство; 4 - объектив; 5 - предметный столик; 6 - конденсор; 7 - зеркало; 8- рукоятка перемещения кронштейна конденсора; 9 - рукоятка тонкой фокусировки; 10 - рукоятка грубой фокусировки; 11 – тубусодержатель; 12 - винт для крепления насадки.

При работе с микроскопом его ставят ручкой штатива к себе, затем, вращая револьвер, устанавливают объектив малого увеличения в соответствующее положение по отношению к отверстию в предметном столике. Вращая зеркальце под столиком и глядя в окуляр, добиваются полного освещения поля зрения микроскопа. После этого приготовленный препарат кладут на столик микроскопа и устанавливают фокусное расстояние при помощи рукоятки грубой фокусировки. Нельзя опускать трубку и одновременно смотреть в окуляр, так как при этом можно разбить объектив и раздавить препарат. При установке фокусного расстояния надо смотреть на

6

препарат сбоку и опускать трубку с таким расчетом, чтобы нижняя линза объектива была вблизи препарата, но не касалась его. После этого можно, глядя в окуляр, медленно поднимать трубку при помощи рукоятки грубой фокусировки до получения четкого изображения предмета. Если освещение слишком яркое и изображение недостаточно отчетливо, следует убавить освещение, уменьшив отверстие диафрагмы.

Сделав соответствующие зарисовки и наметив наиболее важные и характерные места в препарате, микроскоп переводят на большое увеличение. У большинства микроскопов для этого достаточно повернуть револьвер и установить объектив с большим увеличением. Затем, пользуясь микровинтом (рукояткой тонкой фокусировки), получают более четкое изображение предмета. Следует помнить при этом, что поворот микровинта разрешается делать или в ту, или в другую сторону только на 180°. После окончания работы микроскоп надо оставлять обязательно со смещенными объективами.

Уход за микроскопом заключается в поддержании чистоты всех его частей. Для вытирания механических деталей употребляются мягкую тряпочку. Наружные линзы периодически протирают тряпкой, смоченной спиртом. Объективы для чистки отдают в специальные мастерские.

2. Правила приготовления микропрепаратов.

Для приготовления временных микропрепаратов необходимо иметь набор предметных и покровных стекол, скальпели, стеклянные палочки для воды, пинцеты, фильтровальную бумагу, некоторые реактивы.

Предметное и покровное стекла промывают водой и протирают досуха мягкой тряпочкой. Тонкий срез растительного объекта помещают в каплю воды на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Если жидкость на препарате выступает за края покровного стекла, то излишек ее удаляют полосками фильтровальной бумаги. Если вода не покрывает всю

7

площадь под покровным стеклом, пипеткой наносят близ края покровного стекла еще каплю, которая сама втягивается под стекло.

При необходимости введения какого-либо красящего реактива воду из-под покровного стекла отсасывают с помощью фильтровальной бумаги, а капельку реактива наносят с противоположной стороны в край покровного стекла.

Красящими реактивами могут быть следующие вещества:

1)йод, растворенный в йодиде калия (для окрашивания зерен крахмала в клетках);

2)хлор-цинк-йод (для окрашивания целлюлозных клеточных

оболочек);

3)флороглюцин и соляная кислота (для окрашивания одревесневших оболочек);

4)фуксин (для окрашивания цитоплазмы);

5)гематоксилин (для окрашивания ядер);

6)глицерин (для просветления препарата) и др.

3.Строение растительной клетки и движение цитоплазмы на

примере клеток листа элодеи канадской Elodea canadensis Rich.

Листья элодеи линейно-ланцетные длиной до 1 см. Они сидячие и расположены на стебле мутовками по 3 листа. Лист элодеи состоит из различных клеток (рис. 2). Вдоль центральной части листа клетки расположены в несколько слоев и образуют подобие жилки. Клетки «жилки» и клетки, расположенные по краю пластинки, прозенхимные. Они вытянуты в длину, светлые и прозрачные. Некоторые краевые клетки образуют зубчики, направленные в сторону верхушки листа.

Основная часть листа состоит из двух слоев клеток. Они округлопрямоугольные или многоугольные в очертании – паренхимные. Между клетками имеются межклетники – пространства, заполненные воздухом. На

8

препарате они выглядят темными линиями, идущими параллельно жилке.

У всех клеток хорошо заметна оболочка. Паренхимные клетки содержат много хлоропластов. Это зеленые пластиды линзовидной формы, занимающие постенное положение. Центр клетки занимает крупная вакуоль с бесцветным клеточным соком. Ядро в клетках увидеть трудно, но оно также занимает постенное положение.

В прозенхимных клетках средней жилки, реже в паренхимных клетках, заметно перемещение пластид вдоль оболочки. Оно объясняется движением цитоплазмы – циклозом, увлекающим пластиды за собой. Направление движения цитоплазмы может быть различным (правосторонним или левосторонним).

Рис. 2. Клетки листа элодеи канадской. А – клетки средней жилки, прозенхимные; Б - паренхимные клетки; В – клетка – зубчик: 1 – цитоплазма; 2 – вакуоль; 3 – оболочка; 4 – хлоропласты; 5 – ядро.

10

фильтровальной бумагой воду с противоположной стороны покровного стекла.

Пронаблюдать при большом увеличении и зарисовать стадии плазмолиза: вогнутый плазмолиз (протопласт начинает отделяться от клеточной оболочки на некоторых участках) и выпуклый плазмолиз (протопласт полностью отделяется от клеточной оболочки и концентрируется в центре клетки или у одной стороны клеточной оболочки, объем вакуоли резко сокращается).

Вызвать деплазмолиз, заменив плазмолитик водой. Зарисовать клетку после деплазмолиза.

ЗАНЯТИЕ 2.

Тема: I. Пластиды:

1. Хромопласты в клетках мякоти плода шиповника морщинистого

Rosa rugosa Thunb.

2.Лейкопласты в клетках эпидермиса листа традесканции виргинской

Tradescantia virginiana L.

II.Эргастические вещества клетки.

1.Крахмальные зерна в клетках паренхимы клубня картофеля

Solanum tuberosum L.

2.Крахмальные и простые алейроновые зерна в клетках семени гороха Pisum sativum L.

3.Кристаллы оксалата кальция (друзы) в клетках черешка листа бегонии (Begonia sp.).

Оборудование: микроскопы, предметные и покровные стекла, полоски фильтровальной бумаги, пинцеты, скальпели, стеклянные палочки для воды, кюветы с водой.

Материалы и реактивы: зрелые плоды шиповника, живые листья традесканции, клубни картофеля, предварительно (за 1 – 2 дня до занятия)