Определение группы крови с применением цоликлонов анти-а и анти-в

Цоликлоны анти-А и анти-В предназначены для определения группы крови человека системы АВ0 взамен стандартных изогемагглютинирующих сывороток.

Цоликлоны анти-А и анти-В не являются продуктами клеток человека. Выраженность реакции агглютинации у цоликлонов антиА и анти-В выше, чем у изогемагглютинирующих АВ0-сывороток, особенно если антигены эритроцитов выражены слабо. Определение группы крови АВ0 производится в нативной крови, стабилизированной с помощью консервантов, или в крови, взятой из пальца без консерванта. Наиболее четкая реакция агглютинации наблюдается при использовании высокой концентрации эритроцитов. Определение производится при комнатной температуре от +15 °С до +25 °С. Реагенты не должны храниться открытыми, так как при высыхании активность антител снижается. Не используются мутные реагенты, реагенты с нерастворимыми хлопьями.

Цоликлоны анти-А и анти-В выпускаются во флаконах или ампулах с консервантом и красителем. Цоликлоны анти-А (розового цвета) и анти-В (синего цвета) выпускаются во флаконах или ампулах по 20, 50, 100 и 200 доз. Срок хранения - 2 года в холодильнике, 1 мес в темном помещении при комнатной температуре.

Для каждого определения группы крови достаточно применять по одной серии цоликлонов анти-А и анти-В. Цоликлон наносят на сухую тарелку под соответствующие надписи «анти-А» и «анти-В» по одной большой капле (0,1 мл). Рядом с каплями антител наносят исследуемую кровь по одной маленькой капле (0,01 мл). Соотношение сыворотки и крови 10:1. Если кровь брали из пальца, необходимо использовать первые капли (без сильного надавливания). Антитела и кровь смешивают. Наблюдение за ходом реакции с цоликлонами ведут в течение 2,5 мин. Агглютинация с цоликлонами анти-А и анти-В обычно наступает в первые 3-5 с.

• Если агглютинации нет ни с цоликлоном анти-А, ни с цоликлоном анти-В, то кровь принадлежит к 0(I) группе.

• Если агглютинация наблюдается с цоликлоном анти-А, то кровь принадлежит к A(II) группе.

• Если агглютинация наблюдается с цоликлоном анти-В, то кровь принадлежит к В(Ш) группе.

• Если агглютинация наблюдается как с цоликлоном анти-А, так и с цоликлоном анти-В, то кровь принадлежит к AB(IV) группе.

Для исключения аутоагглютинации, которая может наблюдаться у некоторых больных (миеломная болезнь, ожоговая болезнь, а также в пуповинной крови новорожденных) в случае положительной реакции агглютинации эритроцитов с обоими цоликлонами, то есть установление группы AB(IV), необходимо провести дополнительное контрольное исследование данного образца крови с 0,9% раствором хлорида натрия. Смешивают одну большую каплю (0,1 мл) 0,9% раствора хлорида натрия с маленькой (0,01 мл) каплей исследуемой крови. При отсутствии агглютинации в этой контрольной капле кровь принадлежит к группе АВ (IV).

Разные группы крови несовместимы. При переливании крови используется одногруппная кровь!

При переливании крови кроме определения группы больного и группы донорской крови необходимо провести еще ряд проб на совместимость. Только после этого донорская кровь может быть перелита больному.

ПРОБА НА ИНДИВИДУАЛЬНУЮ ГРУППОВУЮ СОВМЕСТИМОСТЬ

Проба проводится при комнатной температуре. Из вены больного в пробирку с 0,3 мл 6% цитрата натрия берут 1-3 мл крови. Пробирку с кровью центрифугируют. На тарелку наносят большую каплю сыворотки больного и в 10 раз меньшую каплю донорской крови. Капли смешивают. Если через 5 мин появляется реакция агглютинации, то кровь несовместима, и переливать ее нельзя.

БИОЛОГИЧЕСКАЯ ПРОБА

В начале переливания крови проводят биологическую пробу.

Первые 75 мл крови вводят струйно, порциями по 25 мл с паузой в 3-5 мин и наблюдают за состоянием больного (признаки гемолитического шока: озноб, слабость, тошнота, боли в пояснице, потеря сознания). Появление жалоб считается противопоказанием к дальнейшему переливанию.

ПРОБА НА РЕЗУС-СОВМЕСТИМОСТЬ

В случаях, когда нет возможности определить резус-принадлежность больного, можно воспользоваться индивидуальной пробой на резус-совместимость крови больного и донора.

На чашку Петри наносят 2 капли сыворотки больного и маленькую каплю донорской крови. Капли перемешивают, чашку ставят на 10 мин на водяную баню (42-45 °С). Если кровь несовместима, то наступает реакция агглютинации.

ПОКАЗАНИЯ К ПЕРЕЛИВАНИЮ КРОВИ

• Острые анемии в результате кровопотери.

• Травматический шок.

• Тяжелая интоксикация.

• Предоперационная подготовка и послеоперационный период.

• Тяжелые операции.

• Хронические анемии.

• Реанимационные мероприятия.

ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ПЕРЕЛИВАНИЮ КРОВИ

• Тяжелые нарушения функции почек и печени.

• Декомпенсация сердечной деятельности.

• Заболевания легких с застоем в малом круге кровообращения.

• Аллергические состояния.

• Активный туберкулезный процесс в стадии инфильтрата.

ОСТРАЯ СОСУДИСТАЯ НЕДОСТАТОЧНОСТЬ Специалист со средним медицинским образованием должен уметь: • определить симптомы обморока; • оказать неотложную доврачебную медицинскую помощь при обмороке; • определить симптомы коллапса; • оказать неотложную доврачебную медицинскую помощь при коллапсе. ТЕЗИСНОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ ТЕМЫ Острая сосудистая недостаточность - это синдром, который характеризуется внезапным падением артериального давления, резкой слабостью, нарушением сознания, периферическими симптомами (бледность, похолодание конечностей, малый пульс). В основе острой сосудистой недостаточности лежит резкое уменьшение объема циркулирующей крови, которое приводит к снижению кровоснабжения жизненно важных органов. Этиология: • сосудистый криз, приводящий к гипотензии, нередко в сочетании с брадикардией (лабильная нервная система, переутомление, страх, боль, вегетативные нарушения, интоксикация барбитуратами, передозировка гипотензивных средств); • органические заболевания - внутренние кровотечения, нарушение сократительной функции миокарда, эпилепсия, интоксикация при инфекциях; • ортостатическая гипотензия; • анафилаксия; • осложнения при проведении некоторых манипуляций - форсированная эвакуация жидкости при лапароцентезе и торакоцентезе. ОБМОРОК Обморок - это внезапная кратковременная потеря сознания, вызванная ишемией головного мозга. Потере сознания предшествует период дурноты: слабость, головокружение, потемнение или мелькание мушек в глазах, онемение рук и ног, зрачки сужены, живая реакция зрачка на свет. Через несколько минут или секунд после потери сознания больной приходит в себя, открывает глаза, начинает реагировать на окружающее, постепенно возвращается нормальный цвет лица. Однако слабость, головная боль могут оставаться в течение нескольких часов.