книги из ГПНТБ / Кощеев, А. К. Люминесцентный анализ пищевых продуктов

Г л а в а II

АППАРАТУРА ДЛЯ ЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО АНАЛИЗА

Стационарные приборы

Источником ультрафиолетовых лучей могут быть флуороскопы с ртутно-кварцевыми лампами типа ПРК-2 и ПРК-4, осветители с лампами типа УФО-4А и другие. Аппаратура для люминесцентного анализа вы­ пускается отечественной промышленностью. Имеется также много оригинальных устройств или приспособле­ ний, серийный выпуск которых не налажен. Некоторые приборы можно изготовить самостоятельно.

Наиболее доступны для проведения люминесцентных исследований приборы:

Э л е к т р о н н ы й . ф л у о р о м е т р ЭФ-ЗМ — высоко­ чувствительный прибор, предназначенный для проведе­ ния количественного люминесцентного определения ви­ таминов Bi и В2, фолиевой кислоты, гетероауксина и дру­ гих люминесцирующих в растворах веществ. Электрон­ ный флуорометр применяют в различных отраслях пище­ вой промышленности, в сельском хозяйстве, медицине; в научно-исследовательских и лечебных учреждениях, в производственных и заводских лабораториях. При соот­ ветствующем подборе светофильтров область примене­ ния прибора может быть расширена. Выпускается элек­ тронный флуорометр ЭФ-ЗМ Московским эксперимен­ тальным заводом продовольственного машиностроения (Москва, И-90, ул. Дурова, 37).

Принцип действия прибора (рис. 4) заключается в том, что свет от кварцевой лампы 1 типа СВД-120А про­ ходит через отверстия диафрагмы 2, 3, первичный фильтр 4, кварцевую оптику 5 и попадает на пробирку с ^испытуемым раствором 6. Испытуемый раствор, облу­ ченный коротковолновой частью спектра, начинает лю-

21

Кнопка Кн предназначена для настройки усилителя; ручка реостата Р2— для настройки усилителя при

нажатии кнопки Кн; ручка Р5 необходима для корректировки темновых

токов фотоэлементов; ручка Рб, переменный шунт микроамперметра, — од­

новременно ручка включения прибора в сеть; Г — микроамперметр типа М-24; Л7 — индикатор включения; Кл — клавиша заслонки; Д — ручка диафрагмы.

Подготовка флуорометра к работе

1.Включить шнур с вилкой, идущей от стабилизато­ ра, в сеть переменного тока (220 вольт).

2.Подключить шнур, идущий от флуорометра, к клеммам стабилизатора.

3.Установить стрелку гальванометра на нуль, повер­

нув корректор («Кор») с помощью отвертки в нужную сторону.

4.Тщательно промыть и высушить кюветы, после че­ го заполнить их испытуемым и стандартным раствора­ ми. Стандартный и испытуемый растворы приготовляют по методу, разработанному для каждого вещества (для витамина Bi — по ГОСТу 7047—55).

5.Установить в гнездо 3 первичный светофильтр. Для

витамина Bi устанавливают светофильтр с надписью

Вг 1, для витамина В2 — с надписью В2-1.

6.Установить в гнездо 2 вторичные светофильтры: для витамина Bi — с надписью Bi-2, для витамина В2 —

снадписью В2-2.

7.В гнездо 1 установить пробирку со стандартным раствором, кювету закрыть крышкой.

8.Повернуть ручку реостата Рб по часовой стрелке до отказа, включить приборы, после чего дать им про­ греться в течение 10 минут.

9.Нажать кнопку Кн и, держа ее, с помощью ручки реостата Р2 установить стрелку гальванометра на нуль.

10.Повернуть ручку реостата Р5, установить стрелку гальванометра на нуль, после чего нажать кнопку Кн и

спомощью реостата Р2 перевести стрелку на нуль. Операдию с реостатами Р2 и Р5 повторять до тех пор, пока стрелка не сохранит нулевое положение как при нажа­ той, так и при опущенной кнопке.

23

11. Нажать клавишу заслонки Кл и с помощью руч­ ки Д установить диафрагму так, чтобы стрелка прибо­ ра встала на нужное деление, например на 80 (лучше делать это не сразу, а в несколько приемов, в противном случае может прогреться и лопнуть фильтр). Если при закрытой диафрагме стрелка гальванометра уходит за шкалу, необходимо в одно из гнезд 2 вставить заглушку и повторить настройку.

После работы свыше двух часов прибор выключить для охлаждения кварцевой лампы в течение получаса.

12. Вынуть стандартный раствор, вставить в гнез­ до 1 пробирку с испытуемым раствором, нажать клави­ шу заслонки Кл и произвести отсчет показаний гальва­ нометра.

Расчет концентрации для чистых растворов: предпо­

Х0,005 = 0,1 мкг.

Проводя исследования, необходимо учесть, что рас­ творитель способен люминесцировать: в процессе изме­ рения отдельных проб измерить и его люминесценцию. При расчете эту величину вычесть из показаний флуо­ ресценции испытуемого раствора.

Нижний предел чувствительности для витамина Bi — 0,01 мкг, для витамина В2 — 0,004 мкг в пробе. Погреш­ ность измерения от максимального значения шкалы при­ бора ±2% . Минимальный объем испытуемого раствора 5 мл. Скорость одного замера 2 секунды. Питание при­ бора от сети переменного тока 220 вольт с отклонениями не более ±15% .

Ф л у о р о с к о п (рис. 6) предназначен для анализа витаминов в растворах методом визуального сравнения интенсивности флуоресценции опытной пробы с эталоном стандартной шкалы.

Корпус прибора металлический, в виде прямоуголь­ ного ящика. Внутри — камера, в которой установлены отражатель и ртутно-кварцевая горелка типа ПРК-2 или ПРК-4. Горелка представляет собой лампу дуговогоразряда. На передней стенке камеры помещен свето­ фильтр УФС-3, поглощающий видимые и пропускающий ультрафиолетовые лучи. Между светофильтром и лам-

24

А п п а р а т д л я ф л у о р е с ц е н т н о г о а н а л и з а в и т а м и н о в , м о д е л ь 833 (рис. 7 ) — уменьшенный образец флуороскопа, имеет те же технические данные. Выпускается медико-инструментальным производствен­ ным объединением «Красногвардеец».

Рис. 7. Усовершенствованный флуороскоп, модель 833.

Для проведения исследований в незатемненной комна­ те мы изменили конструкцию аппарата путем присоеди­ нения к нему дополнительной передней стенки А с оку­ ляром Б. Стенка подвижно соединена с корпусом при­ бора с помощью шарнира В вверху и черного светонепро­ ницаемого материала с боков и снизу. Таким образом создана темная камера. Необходимы также нарукавни­ ки с резинками Г для уплотнения.

А п п а р а т д л я л ю м и н е с ц е н т н о й д и а г н о ­ с т ик и ЛЮМ- 1 , м о д е л ь 0 - 1 1 (рис. 8), представ­ ляет собой переносную ртутно-кварцевую лампу типа ПРК-4 с металлическим кожухом, в который вмонтиро­ ван ультрафиолетовый светофильтр УФС-3. Кожух имеет жалюзи для воздушного охлаждения светофильтра. На панели питающего устройства — выключатель электро­ сети и штифт для переключения на напряжение 110/ 127/220 вольт. Аппарат смонтирован в деревянном фут­ ляре. Вес аппарата 9,3 кг.

Перед работой горелку с кожухом вынимают из фут­ ляра, укрепляют на специально?*! держателе-кронштейне. Горелка должна находиться в горизонтальном положе­ нии. Исследования проводят через 10 минут после вклю­ чения и прогревания аппарата. Перед повторным вклю­ чением горелка должна остывать в течение 15 минут.

При работе с аппаратами, имеющими ртутно-кварце-

26