Ход работы:
Исследование группы крови производите в цельной крови, забранной из пальца. На планшет в разные лунки индивидуальными пипетками нанесите растворы анти - А и анти - В по одной большой капле (0,1 мл). Рядом с каплями антител нанесите по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01–0,03мл). Стеклянной палочной (разными концами в каждой лунке) смешайте кровь с реагентами.
За ходом реакции наблюдайте визуально при легком покачивании пластины в течение 3 минут. Результат реакции в лунках может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты наблюдаются в виде мелких красных агрегатов, быстро склеивающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.
Таблица 3
Интерпретация результатов реакции агглютинации
|
Результат реакции с раствором агглютинина
|
Принадлежность к исследуемой крови группе крови | ||
|
анти-А |
анти-В | ||
|
- |
- |
0 (I) | |
|
+ |
- |
A (II) | |
|
- |
+ |
B (III) | |
|
+ |
+ |
AB (IV)
| |
Примечание. «+» - наличие агглютинации, «–» – отсутствие агглютинации.
Рекомендации по оформлению протокола работы
Интерпретируйте результаты реакции агглютинации в соответствии с табл. 3.
Работа № 2. Определение резус-фактора
Цель: ознакомиться с методиками определения резус-фактора.
Задача: определить резус-фактор.
Оборудование: спирт, йод, вата, стерильный скарификатор, эмалированные пластинки с лунками, стеклянные палочки, стандартные сыворотки для определения резус-фактора.
Объект исследования: кровь.
Определение резус - принадлежности заключается в выявлении в эритроцитах крови человека наличия или отсутствия особого белка (антигена), названного резус-фактором.
Выделяют три разновидности резус - антигена: D, С, Е. Наибольшей активностью обладает антиген D, поэтому именно его определение имеет важное значение. Группы крови, в которых содержится антиген Rh(D), условно принято считать резус-положительными (Rh+), а группы крови, не содержащие антигена Rh(D) – резус-отрицательными (Rh-).
Метод определения резус - принадлежности – резус-фактора (Rh-фактора) крови человека – основан на смешивании капли крови с раствором, содержащим антитела против резус - антигена (D).
В качестве таких растворов служат моноклональные анти - D антитела или поликлональная иммунная антирезусная сыворотка.
Ход работы
Исследование группы крови производите в цельной крови, забранной из пальца. В лунку эмалированного планшета внесите большую каплю (0,1мл) реагента – раствора с антирезусными антителами. Рядом поместите маленькую каплю исследуемой крови (0,01–0,03мл). Стеклянной палочкой кровь смешайте с реагентом.
В течение 3 мин наблюдайте за ходом реакции визуально при легком покачивании пластины. Результат реакции в лунках может быть либо положительным, либо отрицательным.
Рекомендации по оформлению протокола работы.
Сделайте вывод, исходя из того, что положительный результат выражается в агглютинации (делается вывод о наличии в крови испытуемого резус-фактора, то есть резус - положительности). При отрицательном результате
агглютинация отсутствует (делается вывод об отсутствии в крови испытуемого резус-фактора).