акушерство

Контрольные вопросы:

1.Перечислите основные мероприятия по профилактике бесплодия коров и тёлок.

2.Комплекс организационно-хозяйственных и агрозооветмероприятий по предупреждению и ликвидации бесплодия.

3.Специальные мероприятия по воспроизводству стада.

ТЕМА 24. МЕТОДИКА АНДРОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Овладеть методикой андрологического исследования производителей.

Оборудование: производители разных видов домашних животных (баран, бык, кот и т.д.), наборы для инъекций (иглы, шприцы), 2%-ный раствор новокаина, стерильный физиологический раствор, спиртовые тампоны, скарификаторы, одноразовые и многоразовые катетеры.

Своевременное выявление самцов, непригодных для воспроизводства,

111

имеет большое значение в деле профилактики бесплодия самок.

С этой целью производят общее и рефлексологическое исследование производителей, а также исследование их половых органов и спермы. Совокупность этих методов исследования называют апробацией производителей.

Наряду с указанными исследованиями, учитывают условия кормления, содержания, эксплуатации производителей и качество их спермы.

Общее исследование самцов включает определение возраста, породы, упитанности, телосложения, темперамента, состояния отдельных систем организма. При необходимости дополнительно исследуют кровь, мочу, кал. Наружными методами производят всесторонний общий осмотр производителя. Прежде всего, тщательно осматривают его кожный покров, прощупывают поверхностные лимфатические узлы, суставы конечностей, состояние кожи под щетками, гривой, осматривают копыта.

При отборе производителей их исследуют на туберкулез, кампилобактериоз, трихомоноз и другие заболевания, на которые проводятся исследования в этом районе. Производителей, имеющих экстерьерные недостатки, не допускают для естественного и искусственного осеменения.

Рефлексологическое исследование самцов (пробная садка). Половые рефлексы самцов определяют пробными садками на клинически здоровых самок при выраженной течке и половой охоте. Учитывают последовательность проявления половых рефлексов: приближения или полового влечения, эрекции, обнимательного (обхватывания), совокупительного и эякуляции.

Если производитель полноценный, во время полового акта все половые рефлексы проявляются активно, последовательно и правильно. Он очень быстро возбуждается при виде самки, легко проявляет рефлекс обхватывания (вскакивания) и совершает совокупительный акт.

Чрезмерно сильное половое влечение (гиперсексуализм) вредно и приводит к онанизму, явлению, при котором эякуляция происходит без полового акта. У вялых самцов эрекция и эякуляция часто задерживаются или не проявляются вовсе, половой акт у них остается незаконченным. В итоге многие самки остаются бесплодными. Поэтому при получении спермы при искусственном осеменении надо строго индивидуально подходить к каждому производителю, особенно тщательно и внимательно относиться к подготовке искусственной вагины.

Исследования половых органов самцов производят путем осмотра и пальпации мошонки, семенников, придатков семенников, семенных канатиков, полового члена, препуция и придаточных половых желез.

Мошонка в норме безболезненна, легко смещается и собирается в складки, семенники свободно смещаются вверх и в сторону, семенные канатики прощупываются в виде тяжей.

Придаточные половые железы (пузырьковидные, предстательную, луковичные) исследуют ректально.

Исследование полового члена у самцов производят после извлечения его из препуциального мешка или во время эрекции, которая проявляется в

112

присутствии того же вида самки в охоте. У жеребцов и меринов половой член можно осмотреть во время естественного мочеиспускания. У быков, баранов, козлов, хряков пенис извлечь можно только после местной двусторонней анестезии. Для извлечения пениса у кобеля его кладут на спину, левой рукой удерживают препуций у основания вместе с половым членом, правой рукой охватывают препуций и половой член в конечной части, затем правой рукой оттягивают препуций по направлению к брюшной стенке. У кроликов и котов половой член извлекают после придания им спинного положения. При этом смещают препуций к животу и извлекают пенис.

На слизистой оболочке пениса и препуция возможны царапины, ссадины, пузырьковая сыпь, ушибы в виде кровоизлияний и другие признаки. В случае разрывов слизистой оболочки мочеполового канала перед половым актом обнаруживают выделение крови. Кровь может выделяться и спустя некоторое время после садки.

Исследование спермы. Решающим для оценки производителя служит результат исследования его спермы. Высокие показатели экстерьера и кровности производителя теряют всякое значение, если его сперма по своим качествам (объем эякулята, концентрация спермиев и их качество (активность, наличие патологических форм, резистентность и переживаемость)) не соответствует стандарту.

Иногда самцы при хорошей садке, выраженности половых рефлексов и отсутствии явных изменений со стороны половых органов дают плохую оплодотворяемость. Тогда прибегают к полному исследованию спермы по всем показателям.

При выявлении причин заболеваемости и низкого качества спермы устраняют этиологические факторы или выбраковывают самца. Наиболее частыми причинами выбраковки являются асперматизм, олигосперматизм, аспермия, олигоспермия, астеноспермия, некроспермия, акиноспермия, тератоспермия.

Методика проведения двусторонней новокаиновой блокады по И.И. Воронину.

Для анестезии нужны две иглы – направляющая игла Боброва и инъекционная длиной 12-15 см.

Быка фиксируют в станке и за носовое кольцо. Агрессивным вводят нейроплегические вещества.

Точка вкола иглы располагается в седалищно-прямокишечной ямке на середине заднего контура крестцово-седалищной связки.

Место инъекции обмывают, обрабатывают спиртовым тампоном и дважды спиртовым раствором йода.

Иглой Боброва прокалывают кожу в месте инъекции. Иглу продвигают вперед и вниз по направлению к локтевому бугру под углом 40° к поверхности крестца на всю длину. Затем в просвет направляющей иглы вводят инъекционную и погружают ее на глубину, равную расстоянию от поперечнореберного отростка 1-го хвостового позвонка до седалищного бугра. Присоединяют шприц и вводят 20-30 мл 2% раствора новокаина. При этом

113

введении блокируется срамной нерв.

Инъекционную иглу извлекают, а у направляющей оставляют под кожей кончик. Придают игле Боброва горизонтальное положение и продвигают на глубину 3-4 см. Через канал направляющей вводят 20 мл новокаина. Во время введения препарата иглу постепенно извлекают и слегка смещают во фронтальной плоскости. Таким образом осуществляется блокада геморроидальных и срамного нерва.

Аналогично проводят блокаду с противоположной стороны.

Действие блокады длится 1,5-2,5 часа. Иногда животное после блокады ложится, это явление проходит через2-3 часа самостоятельно.

Контрольные вопросы:

1)В чем заключается принцип рефлексологического исследования производителей?

2)Назовите основные этапы исследования половых органов самцов.

3)Объясните методику проведения двусторонней новокаиновой блокады по Воронину.

ТЕМА 25. МЕТОДЫ ПОЛУЧЕНИЯ СПЕРМЫ. СБОРКА И ОБРАБОТКА ИСКУССТВЕННОЙ ВАГИНЫ

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Овладеть методикой подготовки искусственной вагины.

Оборудование: собранные искусственные вагины для быка, хряка, жеребца, барана. Цилиндры, резиновые камеры, кольца-держатели, спермоприемники, эбонитовые краны к искусственным вагинам самцов разных видов, 2% раствор бикарбоната натрия, стерильные салфетки, спиртовые тампоны, стерильный вазелин, спиртовые термометры.

До сборки искусственной вагины необходимо убедиться в целостности всех ее составных частей. Затем тщательно отмывают составные части вагины 3%-ным раствором двууглекислой соды (резиновую камеру с внутренней и внешней стороны), ополаскивают теплой кипяченой водой, насухо вытирают стерильной салфеткой или полотенцем. После приступают к сборке вагины, состоящей из следующих этапов:

1)натягивание резиновой камеры на цилиндр. Прежде необходимо убедиться, что гладкая поверхность камеры обращена во внутрь, а шероховатая – наружу. Камеру растягивают, надевают на один конец цилиндра, затем на другой. Необходимо следить, чтобы камера натягивалась без перекосов. При правильном натяжении камеры диаметр внутреннего просвета искусственной вагины должен быть одинаков на всем протяжении.

2)фиксация камеры на цилиндре. Камеру на искусственных вагинах быка, хряка и жеребца фиксируют резиновыми кольцами.

3)наполнение вагины горячей водой. В пространство между цилиндром и камерой наливают горячую воду. В вагину для барана –

114

150-180 мл воды температурой 50-55° С, в вагину для быка образца 1942 г. 400-500 мл воды температурой 60-70° С, а в вагину конструкции И.И. Родина – 1200-1500 мл температурой 50-55° С, для хряка – 300-400 мл воды температурой 60-65° С, для жеребца – 10001500 мл температурой 50-60° С.

4)смазывание резиновой камеры стерильным вазелином.

Внутреннюю поверхность камеры смазывают стерильным вазелином или синтетической средой для разбавления спермы. Смазывают вагину стеклянной стерильной палочкой, которую вводят в вагину на 2/3 длины и круговыми движениями размазывают вазелин по стенкам камеры.

5)создание необходимого давления. После укрепления спермоприемника в межстенное пространство нагнетают воздух в таком количестве, чтобы стенки сомкнулись. Нагнетают воздух через краник компрессором. Давление в камере должно составлять 40-60 мм рт. ст. В вагину для жеребца воздух можно не нагнетать.

6)проверка температуры. Перед взятием спермы проверяют температуру в искусственной вагине. Вагину при этом держат в наклонном положении спермоприемником вверх. В момент взятия спермы температура должна составлять 40-42° С.

Контрольные вопросы:

1)Какие основные условия необходимо соблюдать при подготовке и сборке искусственных вагин?

2)Как создается оптимальный температурный режим в вагине?

3)Какой обработке должны подвергаться вагины для предупреждения бактериальной контаминации эякулята?

ТЕМА 26. ОЦЕНКА СВЕЖЕПОЛУЧЕННОЙ СПЕРМЫ

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Овладеть методикой оценки качества свежеполученной спермы.

Оборудование: спермоприемники со спермой быка и барана, градуированные мензурки с профильтрованной спермой жеребца и хряка, столики Морозова, микроскопы, предметные и покровные стекла, стеклянные палочки или глазные пипетки.

Решающим показателем качества производителя служат результаты исследования спермы. Высокие экстерьерные показатели и кровность теряют всякое значение, если у производителя выявляется аспермия или неполноценная сперма.

При получении спермы для оценки производителя пользуются искусственной вагиной. Если сперма недоброкачественная, ее исследуют повторно. Нельзя забывать, что после длительных перерывов в половой нагрузке (у жеребцов весной) производитель при первом коитусе почти всегда выделяет сперму низкого качества.

115

Доброкачественная сперма содержит достаточное количество живых, устойчивых во внешней среде и способных принять участие в оплодотворении спермиев; она свободна от посторонних примесей (крови, гноя, микробов).

Сперму исследуют макроскопически и микроскопически. При работе со спермой быка придерживаются ГОСТов. По стандартам определяют содержание спермиев с анормальной морфологией и наличие включений, количество мертвых спермиев, размеры спермиев, их подвижность (активность), абсолютную выживаемость и ряд других показателей.

1. МАКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ. Оно не дает оснований для заключения о пригодности или непригодности спермы. Но результаты его служат предпосылкой для тщательного микроскопического исследования спермы, которое позволяет установить качество эякулята, а также причины изменения спермы внешнего вида.

Исследование спермы начинают с определения ее объема с помощью мерной пипетки, градуированного цилиндра или мензурки. Можно определять массу эякулята взвешиванием на лабораторных весах с погрешностью не более

±0,08 г.

Цвет нормальной спермы белый или белый с желтым оттенком. Сероватый или голубоватый оттенок — признак олигоспермии (недостаточное число спермиев). Интенсивный желтый цвет обычно указывает на примесь мочи. Розоватый или красноватый — признак примеси крови, как следствие свежей травмы. Буро-красный - указывает на глубокую травму половых путей давнего происхождения. Зеленоватый оттенок сперма приобретает от примеси гноя. Хлопья в сперме наблюдаются при воспалении пузырьковидных желез.

Запаха нормальная сперма не имеет или обладает легким запахом жиропота. При хронических, гнойных процессах в семенниках или в придаточных половых железах сперма может иметь гнилостный запах. Консистенция спермы быка сливкообразная, барана сметанообразная, жеребца и хряка — сходная с молоком.

2. МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СПЕРМЫ. При микроскопическом исследовании, прежде всего, определяют густоту и подвижность (активность) спермиев. По густоте спермы ориентировочно устанавливают насыщенность ее спермиями, относя к густой (Г), средней (С) или редкой (Р). У быков оценка «Г» ставится, если все поле зрения микроскопа заполнено спермиями и в пространстве между ними не укладывается длина одного спермия. Средней считают сперму, когда между спермиями хорошо выражены промежутки, равные приблизительно длине спермиев. В редкой сперме расстояние между спермиями превышает их длину

116

.

Рис. 31 Сперма быка: 1 – густая, 2 – средняя, 3 – редкая.

Сложнее определять густоту спермы производителей с маточным типом осеменения, так как у них секреты придаточных желез очень сильно разбавляют сперму.

У всех видов животных оценка по густоте не позволяет точно установить насыщенность спермы спермиями, поэтому с переходом на использование разбавленной спермы при оценке эякулята определяют концентрацию сперматозоидов.

К использованию допускают сперму быков, хряков и жеребцов с оценкой «Г» и «С», а у баранов — только «Г».

Подвижность спермиев оценивают по 10-балльной системе. Каждый балл равен 10 % сперматозоидов, обладающих поступательным движением. Если спермии имеют манежное движение (по кругу) или только колеблются, качество спермы оценивают буквой «К» (колебательное движение). Сперму с неподвижными спермиями обозначают буквой «Н» (некроспермия).

Подвижность неразбавленной спермы быка определяют при температуре 40 °С. На теплое предметное стекло наносят каплю спермы и 2—4 капли 3%- ного раствора цитрата натрия, перемешивают, накрывают покровным стеклом и просматривают не менее трех полей зрения. Поскольку оценка спермиев по подвижности достаточно субъективна, то для контроля в необходимых случаях можно определять количество живых и мертвых сперматозоидов.

Для искусственного осеменения используется сперма со следующей оценкой в баллах: быка – 10-6, барана – 10-8, хряка – 10-6 и жеребца – 10-5. Однако для разбавления и хранения допускается сперма быка не ниже 9 баллов, барана – 8, хряка -7 и жеребца – 6 баллов.

При оценке спермы на густоту и подвижность применяют комплексное обозначение, позволяющее удобно отражать ее качество. Например, Г-10 баллов означает, что исследуемая сперма густая и 100 % спермиев обладают головным прямолинейным, движением; 9 баллов означает 90%, 8—80, 7—70% подвижных спермиев и т. д.

117

Таблица 1. Качественные показатели спермы

Контрольные вопросы.

1.Что включает в себя органолептическая оценка спермы?

2.Расскажите основные положения методики микроскопического исследования свежеполученной спермы.

3.Дайте объяснения понятиям аспермия, некроспермия, олигоспермия.

4.Что понимают под активностью сперматозоидов и как ее определяют?

ТЕМА 27.ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ СПЕРМАТОЗОИДОВ В ЭЯКУЛЯТЕ

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Овладеть методикой определения сперматозоидов в эякуляте.

Оборудование: спермоприемники со спермой быка и барана, градуированные мензурки с профильтрованной спермой жеребца и хряка, сосуды, столики Морозова, микроскопы, предметные и покровные стекла, стеклянные палочки или глазные пипетки, счетная камера Горяева, меланжеры лейкоцитарные и эритроцитарные,3% раствор хлорида натрия, растворы

фуксина или эозина, 96° спирт, эфир, 2,9% раствор натрия лимоннокислого, чашки Петри, сливные чашки.

Концентрацию спермиев (количество в 1 мл эякулята) наиболее точно определяют в счетной камере Горяева или другого автора (см. Практикум по акушерству). Это один из основных показателей качества спермы, на который ориентируются при разбавлении эякулята.

Для определения концентрации сперму необходимо вначале разбавить и обездвижить сперматозоиды. Для разбавления используют 3% раствор хлорида натрия, а разбавление проводят в меланжерах, используя эритроцитарный для разбавления спермы быков и баранов, лейкоцитарный – хряков и жеребцов.

Набрав в смеситель сперму, а затем раствор до нужных меток, концы его зажимают пальцами и встряхивают 2-3 минуты для равномерного перемешивания. Затем 3-4 капли сбрасывают на тампон и сразу заправляют подготовленную камеру. Камеру в строго горизонтальном положении помещают на столик микроскопа, отыскивают сетку на малом увеличении, затем переводят на увеличение в 280-400 раз. Подсчет сперматозоидов

118

проводят в 5 больших квадратах, расположенных по диагонали и разделенных на 16 маленьких. В каждом малом квадрате подсчитывают головки сперматозоидов, расположенные внутри.

Таблица 2. Степень разбавления спермы для подсчета сперматозоидов

Концентрацию (С) сперматозоидов вычисляют по формуле:

С=n× Д×400×1000/80× Р, где n – число сосчитанных спермиев;

Д – степень разбавления спермы; 400 – число малых квадратов на 1 мм2;

1000 – множитель для пересчета на число сперматозоидов в 1 мл спермы;

80 – число малых квадратов, в которых производился подсчет; Р – глубина счетной камеры, равная 0,1.

Для определения концентрации спермиев жеребцов Г. В. Паршутин и Е. В. Румянцева сконструировали специальные стандарты. Они представляют собой запаянные пробирки, содержащие жидкость, имеющую цвет, соответствующий той или иной известной концентрации спермы. Для определения концентрации исследуемую сперму наливают в пробирку с диаметром стандартных пробирок, устанавливают рядом с ней пробирки стандарта и подбирают наиболее подходящий по виду стандарт, на котором отмечено количество спермиев в 1 мл спермы.

Концентрацию спермиев в эякулятах хряка удобно определять оптическим стандартом С. И. Сердюка.

В настоящее время станции искусственного осеменения пользуются фотоэлектроколориметрическим (ФЭК) методом, основанным не на прямом подсчете спермиев, а на учете степени оптической плотности спермы, т. е. мутности. Этот метод позволяет быстро (2—3 мин) определить концентрацию спермиев в сперме, но так как ФЭК создан для анализа истинных растворов, а сперма является взвесью и в ней содержится большее или меньшее количество эпителиальных и других клеток, то результат может быть неточным.

Сущность методики определения концентрации спермы при помощи ФЕК сводится к следующему. Готовят 3,5% раствор цитрата натрия и наливают его в чистые и сухие флаконы из-под пенициллина. Во флакон микропипеткой добавляют 0,1 мл исследуемой спермы, смешивают и в том же растворе промывают пипетку. Разбавленную в 100 раз сперму переливают в кювету и

119

ставят в правое гнездо прибора. В левое гнездо помещают кювету с чистым раствором цитрата натрия.

Шкалу видимости оптической плотности левого барабана устанавливают на нуле, и, повернув клинья ФЭКа, переводят на нуль стрелку гальванометра, сначала грубой, затем точной настройкой. Затем кювету с разбавленной спермой извлекают из гнезда, на ее место помещают кювету с цитратом натрия. Стрелка гальванометра при этом отклоняется, ее ставят на нуль, поворачивая левый барабан. На красной шкале этого барабана читают показатель оптической плотности.

Для перевода показателей оптической плотности в концентрацию сперматозоидов необходимо иметь специально выведенную для каждого прибора калибровочную кривую, составленную по результатам фотоколориметрии спермы с известной концентрацией.

Биологическая проба спермы. Решающее значение для оценки спермы имеет определение оплодотворяющей способности спермиев. Установлено, что она может быть выявлена только в отношении определенной группы самок, находящихся при конкретных условиях существования и времени осеменения. Оплодотворение зависит от степени родства самки и производителя, состояния их здоровья, упитанности, качества кормления и др. Поэтому для определения оплодотворяющей способности спермы лучше всего использовать здоровых ремонтных телок. Правильно поставленная биологическая проба спермы на здоровых животных — самый надежный критерий ее оценки. Все другие методы являются только косвенными, т. е. они позволяют лишь условно судить об оплодотворяющей способности спермы. Сперма считается нормальной, если оплодотворяемость от первого осеменения составляет не менее 70—75 %. Быки с пониженной оплодотворяющей способностью спермы дают маложизненное потомство, и их нельзя использовать ни при искусственном, ни при естественном осеменении.

Наблюдения показали, что даже всестороннее лабораторное исследование спермы иногда не отражает ее качеств. От некоторых жеребцов с прекрасными лабораторными показателями спермы оплодотворяемость кобыл оказывалась низкой, если интервалы между садками были больше 48 ч. Осеменение кобыл через 24—36 ч этими же производителями давало резкое повышение плодовитости.

В жаркие летние месяцы оплодотворяемость коров от замороженной спермы, как правило, низкая. Наиболее благоприятное время для заготовки замороженной спермы — весна и осень.

Разработана методика замораживания спермы жеребцов в гранулах или алюминиевых пакетах (Е. М. Платов и др.).

Контрольные вопросы.

1.Опишите методику подсчета сперматозоидов в камере Горяева.

2.На чем основан метод стандартов при определении концентрации сперматозоидов?

120