

ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ КЛЕТКИ МАТРИЧНЫЕ БИОКИБОРГИ
Преподаватель: Теплова Яна Рафаэлевна
МГУ им.М.В.Ломоносова факультет почвоведение кафедра эрозии и охраны почв
1

МОДУЛЬ 2
2.Клетка как биологическая система
2.3.Химический состав клетки. Макро- и микроэлементы. Взаимосвязь строения и функций
неорганических и органических веществ (белков, нуклеиновых кислот, углеводов,
липидов, АТФ), входящих в состав клетки. Роль химических веществ в клетке и организме человека.
2.6.Генетическая информация в клетке. Гены, генетический код и его свойства. Матричный характер реакций биосинтеза. Биосинтез белка и нуклеиновых кислот
НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ
от лат. «NUCLEUS» - ядро
В1868 – 1869г. швейц. уч. Мишер открыл в ядрах клеток гноя вещества, которые он назвал нуклеинами («нуклеус» от лат. – ядро).
В1889 г. нем. уч. Альтман установил кислотный характер этих соединений, и они были названы
нуклеиновыми кислотами.
Наиболее высокое содержание нуклеиновых кислот обнаружено в ядрах клеток, то они и получили свое название от латинского «нуклеус» – ядро. На данный момент известно о нахождении нуклеиновые кислоты также в цитоплазме и в некоторых органеллах – митохондриях, пластидах.
|
Таб. 2.5 |
Реакции матричного синтеза |
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|||
|
Название реакции |
|
Характеристика процесса |
|
Основные компоненты |
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Репликация |
|
Синтез ДНК на матрице ДНК |
|
Дезоксирибонуклеозидтрифосфа |
|||
|
|
|
ты, ферменты |
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Транскрипция |
|
Синтез РНК на матрицеДНК |
|
Участок ДНК, |
|||
|
|
|
рибонуклеозидтрифосфаты, |
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
ферменты |
|
Трансляция |
|
Синтез полипептида на матрице РНК |
|
Рибосомы, иРНК, аминокислоты, |
|||
|
|
|
|
|||||
|
|
ДНК |
|
ۛۛۛۛۛۛۛۛۛۛۛ |
РНК |
ۛۛۛۛۛۛۛۛ Белок |
||
|
|
|
|
|
|
|
|
тРНК, АТФ, ГТФ, ферменты |
|
|
|
|
транскрипция |
|
трансляция |
ПРЕДСТАВИТЕЛИ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ
• Различают два типа нуклеиновых кислот (в зависимости от вида пентозы)
– дезоксирибонуклеиновые (ДНК) и рибонуклеиновые (РНК).
•Содержание нуклеиновых кислот в клетке ≈ 1%.
•Больше всего НК, особенно ДНК, в меристематических или делящихся клетках, а также регенерирующих и опухолевых.
Нуклеиновые кислоты являются биополимерами, состоящими из мономеров
– нуклеотидов. Каждый нуклеотид состоит из фосфатной группы, пятиуглеродного сахара (пентозы) и азотистого основания.
Остаток фосфорной кислоты, связанный с пятым атомом С в пентозе, может соединяться ковалентной связью с гидроксильной группой возле третьего атома С другого нуклеотида. Обратите внимание: концы цепочки нуклеотидов, связанных в нуклеиновую кислоту, разные. На одном конце расположен связанный с пятым атомом пентозы фосфат, и этот конец называется 5'-концом («пять-штрих»). На другом конце остается не связанная с фосфатом ОН-группа около третьего атома пентозы – 3'-конец. Благодаря реакции
полимеризации нуклеотидов образуются нуклеиновые кислоты.
2

СТРОЕНИЕ МОЛЕКУЛЫ ДНК
ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота.
1.Макромолекула – молекулярная масса составляет от 6,5 до 13 млн.
2.Биополимер, мономером которого является нуклеотид.
3.Состоит из 2-х полинуклеотидных цепей, соединенных друг с другом и имеет
спиралевидный характер
4.Непериодический полимер, так как нуклеотиды отличаются азотистыми основаниями.
5.Аденин и гуанин – пуриновые азотистые основания, цитозин, тимин и урацил – пиримидиновые азотистые основания
|
|
|
|
Азотистое основание: |
Остаток фосфорной |
|
УВ дезоксирибоза: |
|
А – аденин |
кислоты: |
|
|
Г – гуанин |
|
|
С5Н10О4 |
|
||
Н3РО4 |
|
|
Т – тимин |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Ц - цитозин |
|
|
|
|
|
Структура каждой молекулы ДНК строго индивидуальна и специфична, так как представляет собой кодовую форму записи биологической информации (генетический код). Другими словами, с помощью четырех типов нуклеотидов в ДНК записана вся важная информация об организме, передающаяся по наследству последующим поколениям.
Молекулы ДНК в основном находятся в ядрах клеток, но небольшое их количество содержится в митохондриях и пластидах.
УРОВНИ ОРГАНИЗАЦИИ ДНК
Первичная структура
Представляет собой линейную полимерную молекулу, мономером которой является дезоксинуклеотиды (молекула фосфорной кислоты + дезоксирибоза + азотистое основание)
В цепи нуклеотиды связаны ковалентной связью между фосфорным остатком одного нуклеотида и 3-ОН-группой дезоксирибозы другого нуклеотида (3,5 – фосфодиэфирная связь).
3

Вторичная структура
Представлена двойной спиралью полинуклеотидных цепей. Правозакрученные друг относительно друга и вокруг своей оси объемные спирали. Сахарофосфатный остов (заряженный, гидрофильный) молекулы снаружи. Азотистые основания стопкой уложены внутри спирали. Их плоскость перпендикулярна оси молекулы.
Связь между цепями водородная. Аденин связан с тимином двумя водородными связями (А = Т), а гуанин с цитозином – тремя (Г ≡ Ц). Это происходит из-за разной пространственной
организации.
•Ширина ДНК составляет 2 нм (нанометра) или 20 ангстрем = 10-12 м.
•В одном витке спирали – 10 нуклеотидов, расстояние между которыми = 0,34 нм.
•Расстояние между витками = 3,4 нм.
Способность к избирательному соединению нуклеотидов называется принципом комплементарности (дополнительности). Последовательность оснований в одной цепи определяет последовательность оснований в другой цепи.
Правила Чаргаффа:
1) Количество нуклеотидов
ДНК, содержащих аденин равно количеству нуклеотидов, содержащих тимин. (А = Т)
2) Количество нуклеотидов ДНК, содержащих гуанин равно количеству нуклеотидов, содержащих цитозин. (Г ≡ Ц)
3) Сумма дезоксирибонуклеотидов, содержащих пуриновые основания ДНК равна сумме дезоксирибонуклеотидов, содержащих пиримидиновые основания ДНК. (А + Г = Ц + Т)
4) Отношение суммы дезоксирибонулеотидов, содержащих аденин и тимин, к сумме дезоксирибонулеотидов, содержащих цитозин и гуанин
неодинаково у разных видов организмов.
Третичная структура
Представлены нуклепротеинами (-идами) – соединение нуклеиновых кислот с белками.
ДНК + белки (гистоны) → увеличивается степень спирализации молекулы → возникает
суперспираль ДНК, толщина которой возрастает, длина сокращается.
Комплекс ДНК с гистонами в соматических клетках – хроматин – хромосомный матриал, содержащий 60% белка, 35% ДНК и 5% РНК. Взаимодействие белков и нуклеиновых кислот электростатическое: между положительно заряженными группами аминокислот лизина, аргинина, гистидина белков и отрицательно заряженными фосфатными группами ДНК.
4

Нуклеосома («бусинка») – структурная единица хроматина, выполняющая функцию плотной упаковки ДНК. Представлена 8 молекулами белков-гистонов, на которые намотана двухцепочечная нить ДНК длиной около 150-200 пар азотистых оснований. Совокупность
нуклеосом образует полисому.
−Диаметр нуклеосом: 10 нм.
−Общая длина ДНК в 23 парах хромосом человека: 1,5 м.
Такие нити хроматина – молекулы белка, тщательно «упакованные» белками – можно наблюдать в световой микроскоп во время деления клеток в виде хорошо окрашивающихся компактных вытянутых телец – хромосом.
Функции ДНК:
1.Хранение и передача наследственной (генетической) информации от одного поколения к другому.
2.Содержит информацию о первичной структуре белка.
РЕПЛИКАЦИЯ ДНК
Репликация ДНК — процесс самоудвоения, главное свойство молекулы ДНК. Репликация относится к категории реакций матричного синтеза, идет с участием ферментов.
1.Под действием ферментов молекула ДНК раскручивается
2.Около каждой цепи, выступающей в роли матрицы, по принципам
комплементарности и антипараллельности достраивается новая цепь.
3.В каждой дочерней ДНК одна цепь является материнской, а вторая — вновь синтезированной - способ синтеза называется полуконсервативным.
«Строительным материалом» и источником энергии для репликации являются дезоксирибонуклеозидтрифосфаты (АТФ, ТТФ, ГТФ, ЦТФ), содержащие три остатка фосфорной кислоты.
При включении дезоксирибонуклеозидтрифосфатов в полинуклеотидную цепь два концевых остатка фосфорной кислоты отщепляются, и освободившаяся энергия используется на образование фосфодиэфирной связи между нуклеотидами.
5

В репликации участвуют следующие ферменты: |
В репликации участвует |
||
целая «строительная |
|||
1. |
хеликазы («расплетают» ДНК); |
||
бригада» |
|||
2. |
дестабилизирующие белки; |
||
|
|||
3. |
ДНК-топоизомеразы (разрезают ДНК); |
|
|
4. |
ДНК-полимеразы (подбирают дезоксирибонуклетиды и комплементарно |
||
|
присоединяют их к матричной цепи ДНК); |
|
|
5. |
РНК-праймазы (образуют РНК-затравки, праймеры); |
|
|
6. |
ДНК-лигазы (сшивают фрагменты ДНК). |
|
Принципы репликации:
1.Комплементарность. А = Т, Ц ≡ Г.
2.Полуконсервативность. Образуются две дочерние спирали, каждая из которых сохраняет в неизменном виде одну из половин материнской ДНК
3.Антипараллельность. Каждая цепь ДНК имеет определенную ориентацию один конец несет остаток ортофосфорной кислоты, соединяющейся с 5’ углеродом дезоксирибозы, а второй ОН группу, соединенную с 3’ углеродом. Цепи в молекуле ДНК расположены антипараллельно одна от 3’ к 5’ концу, а вторая (комплементарная ей) от 5’ к 3’ концу. Синтез новой цепи начинается с 5’-конца, новые нуклеотиды присоединяются всегда к 3’-концевому нуклеотиду. Т.е. фермент ДНК-полимераза может двигаться вдоль цепи лишь в одном направлении от их 3’ концов к 5’ концам => синтез новых цепей идет антипараллельно.
4.Прерывистость. Чтобы новые нити ДНК могли образоваться, материнские цепи должны быть полностью раскручены и вытянуты, что невозможно, поэтому репликация начинается одновременно в нескольких местах
СТРОЕНИЕ МОЛЕКУЛЫ РНК
1.Молекула РНК – полимер, состоящий из одной цепочки значительно меньших размеров (73 – 10000
нуклеотидов) и меньшей молекулярной массы.
2.Мономерами РНК являются рибонуклеотид, состоящий из рибозы, остатка фосфорной кислоты и одного из четырех азотистых оснований. Три азотистых основания – аденин, гуанин и цитозин – такие же, как и у ДНК, а четвертым является урацил.
3.Образование полимера РНК происходит так же, как и у ДНК, через ковалентные связи между рибозой и остатком фосфорной кислоты соседних нуклеотидов.
Двухцепочечные РНК – хранители генетической информации у ретровирусов, т.е. выполняют функцию хромосом.
Одноцепочечные РНК переносят информацию о последовательности аминокислот в белках, т.е. структуре белков, от хромосом к месту их синтеза и участвуют в синтезе белков.
Молекулы РНК находятся в ядре, цитоплазме, рибосомах, митохондриях и пластидах клетки. Все типы РНК, за исключением генетической РНК вирусов, не способны к самоудвоению и самосборке.
6

ТИПЫ РНК
1.Рибосомные (рибосомальная) РНК (р-РНК) синтезируются в основном в ядрышке.
Они входят в состав рибосом, выполняя роль «каркаса», на котором крепятся полипептиды в строго определенном порядке, и участвуют в формировании активного
центра рибосомы, где происходит процесс биосинтеза белка.
Процентное содержание от общего количества РНК: 80 – 90% Длина молекулы: 150 – 4500 нуклеотидов.
2.Транспортные РНК (т-РНК)
−образуются в ядре на ДНК, затем переходят в цитоплазму.
−самые небольшие по размеру РНК.
−каждая т-РНК присоединяет определенную
аминокислоту и транспортирует ее к месту сборки полипептида в рибосоме.
Все известные т-РНК за счет комплементарного
взаимодействия образуют вторичную структуру, по форме напоминающую «лист клевера». В молекуле т- РНК есть два активных участка: триплет-антикодон на
одном конце и акцепторный конец на другом.
Каждой аминокислоте соответствует комбинация из трех нуклеотидов – триплет. Кодирующие аминокислоты триплеты – кодоны ДНК – передаются в виде информации триплетов (кодонов) и-РНК. У
верхушки клеверного листа располагается триплет нуклеотидов, который комплементарен соответствующему кодону и-РНК. Этот триплет
различен для тРНК, переносящих разные аминокислоты, и кодирует именно ту аминокислоту, которая переносится данной т-РНК. Он получил название антикодон.
Процентное содержание от общего количества РНК: 10 – 15% Длина молекулы: 70 – 100 нуклеотидов.
3.Информационные, или матричные, м-РНК (и-РНК) синтезируются на участке одной из цепей молекулы ДНК и передают информацию о структуре белка из ядра клеток к рибосомам, где происходит синтез белковой цепочки из отдельных аминокислотных остатков. В зависимости от объема копируемой информации молекула и-РНК может иметь
различную длину, который зависит от длины участка ДНК, на котором они синтезированы.
Процентное содержание от общего количества РНК: 2 – 5% Длина молекулы: 73 – 3000 нуклеотидов.
Антикодон — триплет нуклеотидов, «распознающие» нужный кодон иРНК. Конкретная тРНК может транспортировать строго определенную аминокислоту, соответствующую ее антикодону – специфичность соединения аминокислоты и тРНК.
7

АССОТИАТИВНАЯ СТРУКТУРА ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ В КЛЕТКЕ
(на примере поваренной книги)
Экзоны — участки гена, несущие информацию о строении полипептида. Интроны — участки гена, не несущие информацию о строении полипептида.
ТРАНСКРИПЦИЯ
Транскрипция — это процесс синтеза РНК по матрице ДНК. У эукариот происходит в ядре, митохондриях и хлоропластах, у прокариот —
вцитоплазме.
•Информация о структуре белка, заключенная в ДНК, «переписывается» на инфор-
мационную РНК (мРНК).
•С одного гена может «переписываться» множество молекул мРНК. Они подвергаются в ядре процессингу, после чего транспортируются из ядра в цитоплазму, где и выполняют свои функции.
•Промотор — участок гена (представляет собой особое сочетание нуклеотидов), к которому присоединяется фермент РНК-полимераза.
•РНК-полимераза (фермент) движется по молекуле ДНК в направлении 3’ → 5’ матричной цепи.
•Синтез цепи РНК идет антипараллельно, в направлении 5’ → 3’ конец.
Процессинг (от англ. processing — обработка) — совокупность реакций, ведущих к превращению первичных неактивных транскриптов (пре-РНК) в функционирующие молекулы (иРНК, тРНК, рРНК).
Этапы (фазы) транскрипции:
1.Инициация — начало синтеза РНК. Во время этой стадии фермент РНК-полимераза
прикрепляется к промотору – опознавательному участку в начале матричной цепи ДНК;
2.Элонгация — синтез молекулы РНК по правилу комплементарности;
3.Терминация — завершение синтеза РНК, отделение от матричной цепи ДНК. В результате у эукариот образуется пре-РНК, а у прокариот — зрелая РНК.
8

Ген – участок молекулы ДНК, кодирующий первичную последовательность аминокислот в полипептиде.
Промотор — участок гена (представляет собой особое сочетание нуклеотидов), к которому присоединяется фермент РНК-полимераза.
Послеобразования пре-иРНК начинается
процессинг (созревание) РНК. При этом из молекулы РНК удаляются интронные участки с последующим соединением экзонных участков – сплайсинг: из молекулы РНК
удаляются интронные участки (не несущие информацию о структуре белка) с последующим соединением экзонных участков.
9

АДЕНОЗИНТРИФОСФАТ
Широко распространенными являются макроэргические соединения (высокоэнергетические соединения, содержащие богатые энергией, или макроэргические, связи), а среди последних – аденозинтрифосфат (АТФ) – универсальный источник и основной аккумулятор энергии в живых клетках. АТФ содержится во всех клетках растений и животных. Количество АТФ в среднем составляет 0,04% (от сырой массы клетки), наибольшее количество АТФ (0,2–0,5%) содержится в скелетных мышцах.
АТФ состоит из:
1)азотистого основания (аденина),
2)моносахарида (рибозы),
3)трех остатков фосфорных кислот.
АТФ содержит не один, а три остатка фосфорной кислоты, поэтому она относится к
рибонуклеозидтрифосфатам.
АТФ – универсальный хранитель и переносчик энергии в клетке.
При отделении одного остатка фосфорной кислоты АТФ переходит в аденозиндифосфат (АДФ), если отделяется еще один остаток фосфорной кислоты (что бывает крайне редко), то АДФ переходит в аденозинмонофосфат (АМФ). При отделении третьего и второго остатков фосфорной кислоты освобождается большое количество энергии – до 40 кДж – связь между этими остатками фосфорной кислоты называют макроэргической (она обозначается символом «~»). Связь между рибозой и первым остатком фосфорной кислоты макроэргической не является, и при ее расщеплении выделяется всего около 14 кДж энергии.
АТФ + Н2О → АДФ + Н3РО4 + 40 кДж, АДФ + Н2О → АМФ + Н3РО4 + 40 кДж.
•Запасы АТФ постоянно пополняются.
•В клетках всех организмов синтез АТФ происходит в процессе фосфорилирования, т.е. присоединения фосфорной кислоты к АДФ. Фосфорилирование происходит с разной интенсивностью при: дыхании (митохондрии), гликолизе (цитоплазма), фотосинтезе (хлоропласты).
•АТФ является основным связующим звеном между процессами, сопровождающимися выделением и накоплением энергии, и процессами, протекающими с затратами энергии.
Макроэргические (высокоэнергетические) соединения могут образовываться и на основе других нуклеотидов. Например, гуанозинтрифосфат (ГТФ) играет важную роль в ряде биохимических процессов, однако АТФ является наиболее распространенным и универсальным источником энергии для большинства биохимических реакций, протекающих в клетке. АТФ содержится в цитоплазме, митохондриях, пластидах и ядрах. Главным образов в митохондриях в процессе клеточного дыхания.
10